刘奔
- 作品数：65 被引量：217H指数：7
- 供职机构：大连医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 香菇菌C91-3凋亡相关蛋白24414对小鼠肝癌细胞Hca生物学功能的影响被引量：3
- 2012年
- [目的]通过诱导表达香菇菌C91-3凋亡相关蛋白24414,研究其对小鼠肝癌细胞Hca的生物学功能影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的机制。[方法]构建真核重组表达质粒pPIC9K-24414,用毕赤酵母GS115体系进行诱导表达,将已鉴定的诱导表达蛋白作用于小鼠肝癌细胞Hca,用MTT法测定不同浓度目的蛋白组、顺铂(DDP)组及空白对照组的抑瘤率,用流式细胞术检测目的蛋白对肿瘤细胞的凋亡作用,同时用MTT法检测目的蛋白对正常鸡胚成纤维细胞的毒性作用。[结果]Western-blot结果显示目的蛋白成功表达;MTT法检测结果显示,不同浓度此蛋白对Hca细胞的生长抑制作用(OD595)与对照组比较差异均有显著性意义(P<0.05),7.5μg/mL、15μg/mL和30μg/mL目的蛋白的最大抑瘤率分别为70.03%、82.02%和74.66%,均超过5μg/mL DDP的作用;流式细胞术结果显示,此蛋白具有诱导Hca细胞凋亡的能力,早晚双期细胞凋亡诱导率与对照组比较差异均有显著性意义(P<0.05),浓度为30μg/mL时诱导凋亡的作用最强,早晚两期凋亡率分别为(9.28±0.04)%和(9.37±0.03)%;同时此蛋白对正常细胞无毒性作用。[结论]香菇菌C91-3凋亡相关蛋白24414在毕赤酵母GS115中成功诱导表达,此蛋白对小鼠肝癌细胞Hca生长具有抑制作用,能够诱导其产生凋亡,为进一步深入研究香菇菌C91-3的抗肿瘤机制奠定了基础。
- 刘奔钟民涛王晓丽孙文长宁安红李星云刘磊黄敏
- 关键词：毕赤酵母蛋白凋亡
- 双侧椎动脉夹层动脉瘤致脑干梗死一例被引量：2
- 2012年
- 临床资料 男性，46岁，以“眩晕、呕吐、左侧肢体活动不灵2d”为主诉于2010年9月27日入院，患者全头部搏动性疼痛。
- 程学英孙雷侯力王延平刘奔王剑锋
- 关键词：椎动脉夹层动脉瘤脑干梗死肢体活动搏动性
- 体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞被引量：6
- 2008年
- 目的：国内外对骨髓间充质干细胞体外成功诱导分化为胰岛素分泌细胞的报道屡见不鲜,但这些诱导方法都比较繁琐,而且大多都应用了细胞因子。实验拟验证体外非细胞因子方法诱导骨髓间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞的可能性。方法：实验于2005-11/2007-01在大连医科大学诊断学实验中心,校一级实验室完成。①实验材料：4-6周龄Wistar大鼠由大连医科大学实验动物中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法：无菌条件下取大鼠的骨髓细胞,并通过贴壁时间差异性去除单核细胞从而获得骨髓干细胞。应用二甲基亚砜及高糖环境依次对大鼠骨髓间充质干细胞进行体外诱导,以直接加入含体积分数为0.10胎牛血清的L-DMEM培养基培养的为对照。③实验评估：通过形态、双硫腙染色、免疫组织化学及RT-PCR方法对诱导后的细胞进行检测,采用ELISA方法对诱导后细胞分泌的胰岛素进行检测。结果：①培养10d时,诱导组细胞呈细胞团样改变,内层的细胞为圆形,外层的细胞呈长梭形并包绕着内层细胞。对照组细胞也呈团样改变,但形态不规则,呈发散状,细胞呈梭形类似骨髓间充质细胞。②诱导组的细胞团双硫腙染色后呈明显猩红色,对照组形成的细胞团双硫腙染色不显色。③诱导组成团及单个存在的圆形和梭形细胞中有胰岛素存在,对照组细胞团及未成团细胞中无胰岛素存在。④在内参蛋白GAPDH表达量大致相等的条件下,诱导组诱导的细胞表达Ins1和Ins2,对照组培养的细胞不表达Ins1和Ins2。⑤ELISA法证实诱导后细胞向胞外分泌胰岛素,与对照组比较差异显著（P〈0.05）。结论：大鼠骨髓间充质干细胞体外经过二甲基亚砜和高糖环境诱导可分化为胰岛素分泌细胞。
- 张伟苏本利孟秀香刘奔刘丹丹王莺燕范颖
- 关键词：胰岛素分泌细胞骨髓间充质干细胞分化胰岛细胞
- 双轨模式教学法(案例式与PBL式)在实验诊断学实验教学中的应用实践被引量：9
- 2017年
- 目的探索新医学教育背景下适合临床医学专业实验诊断学实验的教学方法。方法选取共14个班级的七年制临床医学专业三年级学生为教学研究对象,传统教学与双轨制教学各7个班级,在教学大纲内容指导下进行分别授课,统计学生对教学的满意程度与接受水平。结果通过将案例式与问题导向教学方式这两种教学方法的有机结合,能够较好地实现从重多媒体应用的教学模式向重教学设计的教学模式转变、从灌输式的的教学模式向独立自主的学习模式转变。结论将案例式与PBL式两种教学方法有机结合,对提高教学效果和质量能够起到有益的帮助。
- 刘奔程学英刘丹丹谷雪明曹华军李岩范颖孟秀香
- 关键词：案例式问题导向教学法实验诊断学
- 医学留学生《实验诊断学》实验教学方法探讨与展望被引量：6
- 2010年
- 针对留学生"实验诊断学"实验教学中出现的教学语言、课程安排、课前准备及教学方法等问题进行了探讨,积极探索教学模式的建立,为今后的留学生教学提供借鉴,以期进一步提高留学生的教学质量。
- 范颖孟秀香韩记红刘丹丹刘奔
- 关键词：留学生实验诊断学实验教学教学方法
- Bmi-1-siRNA抑制肺腺癌SPC-A1细胞的增殖及其机制被引量：7
- 2014年
- 背景与目的:Bmi-1(B-cell specific moloneymurine leukemiavirus insertion site 1)基因是多梳基因家族的重要成员之一,主要通过调控INK4a/ARF位点来调节细胞的增殖和衰老。本研究旨在探讨Bmi-1-siRNA对具有INK4a/ARF位点的肺腺癌SPC-A1细胞生长和增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:①本实验选用已确定有效的siRNA序列进行病毒包装,构建反转录病毒si-Bmi-1 pSUPERretro-neo,然后感染到SPC-A1细胞中,建立稳定表达Bmi-1-siRNA的肺癌细胞株。②利用RT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)技术分析Bmi-1基因在Bmi-1-siRNA转染后SPC-A1细胞中表达情况。③利用台盼蓝拒染法、MTT法、平板克隆形成实验和裸鼠实验,分析Bmi-1-siRNA对SPC-A1细胞体内外增殖能力的影响。④利用流式细胞术分析SPC-A1各组细胞的周期分布。⑤利用Western blot法分析增殖通路相关分子:p16INK4a、p53、Cyclin D1、PTEN和Ser473p-Akt等蛋白表达情况。结果:反转录病毒介导的Bmi-1-siRNA被转染后,有效抑制了SPC-A1细胞中Bmi-1基因的转录和表达,抑制了SPC-A1细胞的体内外增殖能力(P<0.01),并使转染组细胞阻滞在G1期[(64.6±1.2)%,P<0.05]。沉默Bmi-1基因后,与对照组细胞相比,p16INK4a、p53和Akt蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),Cyclin D1和Ser473p-Akt表达水平下降(P<0.01),PTEN表达水平上调(P<0.01)。用PTEN抑制剂处理转染组细胞后,Bmi-1和Ser473p-Akt蛋白表达得以重塑。结论:Bmi-1-siRNA通过将肺腺癌SPC-A1细胞周期阻滞于G1期来抑制肿瘤细胞增殖,这种抑制作用可能不依赖于p16INK4a来调控Cyclin D1的表达,进而参与调控肿瘤细胞增殖。
- 王艺芳刘奔刘纯青郑翔宇刘丹丹朱杰杨春辉孟秀香
- 关键词：BMI-1基因肺腺癌细胞增殖
- 原发性头痛的最新国际分类被引量：28
- 2005年
- 程学英王剑锋刘奔
- 关键词：原发性头痛就诊患者内科门诊临床诊治
- 反义Bmi-1 RNA转染对人肺癌细胞株A549体外增殖的影响被引量：3
- 2009年
- 目的研究转染反义Bmi-1RNA对人肺腺癌细胞A549的体外增殖及细胞周期和凋亡的影响。方法将表达反义Bmi-1RNA的真核表达载体稳定转染A549细胞株，G418筛选挑取阳性克隆。应用即时荧光定量RT-PCR及Westernblot检测转染后Bmi-1基因在mRNA水平及蛋白水平的表达；应用M1Tr比色法及平板克隆形成实验检测A549细胞体外生长能力；用PI单染及Annexin-VPI双染技术在流式细胞仪上检测细胞周期及凋亡情况。结果Westernblot结果显示转染反义Bmi-1RNA使A549细胞中Bmi-1蛋白表达量减少了95％；MTT检测细胞生长曲线表明反义Bmi．1RNA使A549细胞生长速度明显减慢；平板克隆形成实验结果显示转染反义Bmi．1RNA的A549细胞在平板中形成集落的数目（0．67±0．50）明显低于未转染组（73．04±4．1）及转染空质粒组（67．04±4．0，P〈0．01）；流式细胞仪结果显示反义Bmi-1使A549细胞阻滞在G0／G1期，但对细胞凋亡没有影响。结论反义Bmi-1RNA在体外对A549细胞增殖有明显的抑制作用，其抑制作用是通过使A549细胞阻滞在G0／G1期实现的。
- 于琦孟秀香刘奔刘丹丹张伟刘卫红杨光
- 关键词：转染反义BMI-1
- 阿卡波糖对2型糖尿病患者粪便中双歧杆菌数量的影响被引量：45
- 2011年
- 2型糖尿病患者118例分为阿卡波糖治疗组（A组，58例）和未服阿卡波糖组（B组，60例），57名健康个体作为对照组（C组），以实时定量PCR测定粪便中双歧杆菌、粪肠球菌的含量。结果显示，A、B两组粪便中双歧杆菌数量明显低于C组，肠球菌数量高于C组。经4周干预治疗，A、B两组双歧杆菌数量均较基线时升高，但A组的双歧杆菌数量升高程度更加显著。Spearman单因素相关分析发现，基线时双歧杆菌与脂多糖、超敏C反应蛋白（hs—CRP）、晚期糖基化指数、体重指数（BMI）呈负相关（P〈0．05或P〈0．01）；粪肠球菌与单核细胞趋化蛋白1、脂多糖、肿瘤坏死因子α、血浆纤溶酶原激活物抑制物1、hs—CRP、BMI、HbA1c和年龄呈正相关（均P〈0．01）。干预治疗4周后，上述因子和肠道菌群的相关性全部消失。多因素逐步回归分析发现，基线BMI是双歧杆菌独立负相关因素，BMI、HbA1c和年龄是粪肠球菌的独立正相关因素。
- 刘海霞李晶刘奔刘丹丹孙李永眷张萍孟秀香苏本利
- 关键词：阿卡波糖肠道菌群
- 香菇C91-3菌株的Latcripin-5基因片段、编码蛋白及制备方法
- 本发明公开一种香菇C91-3菌株的<I>Latcripin-5</I>基因片段、编码蛋白及制备方法，<I>Latcripin-5</I>基因片段，具有如SEQIDNO：1所示的核苷酸序列；编码蛋白具有如SEQIDNO：2...
- 黄敏刘奔曹淑云钟民涛伦永志张伟李星云王晓丽曹婧宁安红
- 文献传递
