- 乳酸菌表达质粒的构建被引量：3
- 2004年
- 粪肠球菌是乳酸菌的一个属.采用生物信息学方法,预测了粪肠球菌AS1.2984基因组中乳酸脱氢酶和三磷酸甘油醛脱氢酶的组成型启动子序列.设计引物通过PCR扩增得到这2段启动子序列,并克隆到乳酸菌 大肠杆菌穿梭质粒pNZ8037上,在启动子下游接上绿色荧光蛋白基因作为标记,构建乳酸菌的组成型蛋白表达质粒.通过电转化将上述改造过的pNZ8037质粒导入粪肠球菌中,在共聚焦显微镜中可以观察到绿色荧光蛋白的表达.在乳酸菌MRS培养基中加入乳酸、盐酸、氢氧化钠等试剂,发现可以调节绿色荧光蛋白的表达量.
- 倪伟明黄路标王荫榆刘国元张伯生任大明
- 关键词：粪肠球菌表达质粒绿色荧光蛋白电转化MRS培养基乳酸菌
- 一种促凋亡重组卡介苗及其制备方法
- 本发明属于遗传工程和结核病疫苗研究技术领域，具体为一种促凋亡重组卡介苗及其制备方法。其通过在大肠杆菌—分枝杆菌穿梭质粒pMV261中依次插入结核保护性抗原Ag85B的信号肽ASP和促细胞凋亡基因BAX先得到重组质粒<...
- 王洪海李光华徐颖刘国元宋娜孔聪黄琪
- 文献传递
- ZNF191靶向上调beta-catenin促进肝癌细胞增殖
- ZNF191基因是我们实验室1997年率先报道的的一个人类C2H2型锌指蛋白基因。已完成的前期研究表明ZNF191在人的心、脑、胎盘、肝脏、肺脏、骨骼肌、肾、胰腺均有表达；ZNF191的mRNA在肝癌组织中呈现显著性上调...
- 刘国元
- 关键词：ZNF191Β-CATENINCYCLIND1肝癌细胞增殖
- 文献传递
- TGF-β1对大鼠肾脏系膜细胞基质表达的影响及其相关反应性基因的初步研究
- 第一部分:转染人TGF-β基因对MsC表达ECM成分的影响;目的:通过向大鼠MsC转染人TGF-β1基因,观察该基因对MsC表达ECM成分的影响.结论:TGF-β1可通过对大鼠系膜细胞ECM成分表达的影响,在肾小球硬化的...
- 刘国元
- 关键词：大鼠系膜细胞肾小球硬化纤维连接蛋白IV型胶原肾小球肾炎
- 文献传递
- 转染人TGF-β1基因对大鼠系膜细胞基质表达的影响被引量：7
- 2004年
- 目的 通过对大鼠系膜细胞(MsC)转染人TGF-β1基因,观察该基因对MsC表达细胞外基质成分的影响。方法 采用脂质体介导法转染人TGF-β1基因至大鼠MsC,Western blot法鉴定;细胞爬片ABC免疫酶标法观察纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原、Ⅰ型胶原、层黏蛋白(LM)的表达,并对结果定量分析。结果 重组质粒pcDNA 3.0-TGF-β1成功转染至大鼠MsC,Western blot及免疫组化检测均证实TGF-β1蛋白表达增强;与正常的MsC相比,TGF-β1转染的MsC表达FN、Ⅳ型胶原增强,其差异有显著性意义;而Ⅰ型胶原、LM表达改变不明显。结论 TGF-β1可通过对大鼠MsC ECM成分表达的影响,而在肾小球硬化的发生发展过程起着重要作用。
- 刘国元蒋涛曾文姣刘学光赵仲华张农
- 关键词：系膜细胞转化生长因子Β1纤维连接蛋白肾小球硬化
- TGF-β1与肾小球硬化关系的研究被引量：19
- 2002年
- TGF β是多功能细胞因子 ,具有调节细胞分裂、炎症反应及细胞外基质沉积等作用。本文重点介绍TGF β1与肾小球硬化发生的关系、针对TGF β为靶向的基因治疗及TGF
- 刘国元
- 关键词：转化生长因子Β肾小球硬化基因治疗
- 结合电生孔技术的抗体-纳米TiO_2靶向光敏杀癌细胞被引量：4
- 2006年
- 报道了用免疫、电生孔和纳米TiO2光催化组合技术进行杀伤结肠癌LoVo细胞的研究.先把结合LoVo细胞表面CEA抗原的单克隆抗CEA抗体吸附在纳米TiO2微粒表面,抗体-纳米TiO2复合微粒就会自动吸附到LoVo细胞的表面,然后用电脉冲法使LoVo癌细胞的细胞膜上产生小孔,促使纳米TiO2微粒进入癌细胞内部.最后在紫外光照射下使TiO2纳米粒子在癌细胞内部发生光催化氧化作用,杀伤癌细胞.结果表明,这种组合技术具有很高的杀癌细胞能力.在仅含3.12μg/mL抗体-纳米TiO2的细胞培养液内和强度为4mW/cm2的紫外光照射下,可在30min内将所有LoVo癌细胞杀死.这种技术对LoVo癌细胞的杀伤力远高于对不表达CEA抗原的人正常TE353.sk细胞的杀伤力,显示了组合技术杀癌细胞的高选择性.因此,这种组合技术有望成为治疗癌症的新方法,值得进一步探索.
- 许娟赵尧敏陈春妹孙毅刘国元严曼明江志裕
- 关键词：光催化癌症治疗
- 一种促凋亡重组卡介苗及其制备方法
- 本发明属于遗传工程和结核病疫苗研究技术领域，具体为一种促凋亡重组卡介苗及其制备方法。其通过在大肠杆菌—分枝杆菌穿梭质粒pMV261中依次插入结核保护性抗原Ag85B的信号肽ASP和促细胞凋亡基因BAX先得到重组质粒，再将...
- 王洪海李光华徐颖刘国元宋娜孔聪黄琪
- 转染人TGF-β1基因对大鼠系膜细胞酸性核糖体蛋白P0表达的影响
- 2005年
- 目的筛选转染人转化生长因子β1(TGFβ1)基因的大鼠系膜细胞相关反应性基因,并观察TGFβ1对其中之一的酸性核糖体蛋白P0的影响。方法筛选经SSHPCR和反向杂交法构建的大鼠系膜细胞TGFβ1相关反应性基因cDNA消减杂交库,并进行测序及与GenBank资料作同源性比较;分别用NorthernBlot、半定量RTPCR观察TGFβ1、酸性核糖体蛋白P0基因在培养的大鼠系膜细胞和动物模型体内表达的变化。结果经筛选获得的28个反应性基因cDNA片段,长度为59～535bp,其中7个片段均和已知酸性核糖体蛋白P0基因同源性一致。在转染TGFβ1的大鼠系膜细胞中P0基因mRNA表达增强;在大鼠抗Thy1系膜增生性肾小球肾炎模型的病变肾组织中,P0基因mRNA和TGFβ1基因mRNA的上调表达趋势一致。结论酸性核糖体蛋白P0是一个与TGFβ1基因表达密切相关的基因,可能参与TGFβ1介导的肾小球肾炎和肾小球硬化的发生机制。
- 刘国元沈素芹曾文姣蒋涛陈琦赵仲华张农
- 关键词：转化生长因子Β1系膜细胞
- 8例自身免疫性肝炎病理学分析被引量：4
- 2001年
- 目的 探讨自身疫性肝炎的病理组织学特点。方法 回顾性分析和研究 8例自身免疫性肝炎 (AIH)的临床资料、肝脏活检组织病理学、肝炎病毒免疫荧光检查结果。结果 8例临床诊断为AIH病例均为女性 ,年龄 16～ 72岁 ,临床表现主要包括发热、关节疼痛、皮疹或黄疸。多数伴有类风湿性关节炎等其他自身免疫性疾病表现。实验室检查 :γ球蛋白、ALT和AST等均有不同程度升高 ,且多数病例为自身抗体 [RF和 (或 )ANA]阳性。血清学肝炎病毒标志物均为阴性。肝组织病理变化主要为轻、中度慢性肝炎 (小叶性肝炎居多 ) ,肝细胞点状坏死、碎片状坏死、桥接样坏死多见 ,汇管区纤维组织增生和炎症细胞浸润。免疫荧光检查 :多数病例中可在肝细胞膜、汇管区和肝血窦等处见不同程度的IgG等免疫复合物沉积 ;2例有HBsAg阳性。 结论 我国该组AIH病例的肝组织病理学改变主要表现为慢性肝炎 ,病变具有特征性但无特异性 ,肝活检组织病理学和免疫荧光检查对AIH的诊断和鉴别诊断 ,尤其是对于变异型AIH的诊断具有重要意义 ,有助于指导临床治疗 。
- 刘国元张农
- 关键词：自身免疫性肝炎肝活检病理组织学免疫荧光
