刘嘉熙
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
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- 发文基金：广州市科技计划项目中国博士后科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组TRAIL的纯化及其对非小细胞肺癌细胞株的杀伤活性
- 2013年
- 目的:表达、纯化重组肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的活性片段,并观察其对非小细胞肺癌细胞株的杀伤活性。方法:利用已有的pGEx-4T-l/TRAIL重组质粒转化BL21/DE3菌;异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达谷胱甘肽转移酶(GST)标签的TRAIL,用GST-BIND树脂亲和层析柱纯化;SDS-PAGE电泳分析纯化结果;蛋白质超滤除盐、浓缩TRAIL;Bradford法定量。形态学观察肺癌细胞;乳酸脱氢酶(LDH)释放法确定TRAIL对肺癌细胞的杀伤活性。结果:共获得8.6 mg纯化TRAIL,其对A549、SPC-Al、HLAMP、95D、PGCL3、95C、H460等7株细胞株的IC50值分别为(2.33±0.22)μg/mL、(50.0±17.0)、(872.0±241.0)、(427.0±12.0)、(328.0±28.0)、(270.0±33.0)、(178.0±8.0)ng/mL。结论:相同组织类型的不同肺癌细胞株对重组TRAIL的敏感度不同,从低到高依次为A549、HLAMP、95D、PGCL3、95C、H460和SPCA1。
- 王飞朱郇悯韦雪梅刘嘉熙汤娟娟王嘉雯黎银燕陈晓湘李孜
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体肺癌药物敏感度
- 一氧化氮合酶抑制物对糖尿病骨骼肌收缩功能的影响及其机制
- 目的：骨骼肌摄取葡萄糖经线粒体代谢产生ATP是维持骨骼肌收缩的主要能量来源;糖尿病时易致骨骼肌损害，但目前既无文献报道糖尿病不同病程骨骼肌收缩功能损害的动态变化，也不清楚其发生机制。最近我室研究发现，糖尿病大鼠血中升高的...
- 刘嘉熙李聪黄程雷艳萍熊燕
- 关键词：糖尿病骨骼肌收缩
- 组织型转谷氨酰胺酶与人非小细胞肺癌细胞侵袭力的关系及其机制
- 2013年
- 目的:研究组织型转谷氨酰胺酶(tTG)表达与人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549和PAα侵袭力的关系,及其与表皮生长因子受体(EGFR)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)等肿瘤侵袭相关基因之间的关系。方法:Transwell法检测细胞株A549和PAα的侵袭力;RT-PCR法、Real-Time PCR法及Western blot检测A549和PAα细胞株中tTG、EGFR和MMP-2的转录和表达水平,观察使用tTG或EGFR抑制剂后PAα细胞中tTG、EGFR、p-EGFR和MMP-2的表达水平变化。结果:PAα细胞株的侵袭能力为A549的165.3倍(P<0.05)。PAα细胞株的tTG、EGFR转录水平为A549细胞株的650.68(P<0.05)和34.4(P<0.001)倍。PAα细胞株的tTG、p-EGFR表达水平高于A549细胞株,MMP-2的转录水平在A549和PAα细胞株之间的差异没有统计学意义(P>0.1),但PAα的MMP-2表达水平高于A549。结论:PAα相对于A549具有高的侵袭力;其机制可能与EGFR的高表达和磷酸化、tTG和MMP-2的高表达有关;tTG可调控MMP-2的水平但它本身不受EGFR信号通路的调控。
- 朱郇悯汤娟娟黎银燕刘嘉熙韦雪梅王飞陈晓湘张雪雁李孜
- 关键词：组织型转谷氨酰胺酶侵袭力表皮生长因子受体
- 原纤毛在3T3-L1细胞向脂肪细胞分化过程中的动态变化及对脂滴生成的影响
- 2015年
- 目的研究原纤毛在3T3-L1前体脂肪细胞分化中的表达及对脂肪分化的影响。方法诱导3T3-L1前体脂肪细胞向脂肪细胞分化,在分化第0天和第4天分别孵育水合氯醛以化学方式抑制原纤毛。Western blot法检测原纤毛关键蛋白驱动蛋白3a(Kif3a)、鞭毛内转运蛋白88(IFT88)和乙酰化α微管蛋白(acAT)以及脂肪分化关键蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达;免疫荧光染色检测ac AT反映原纤毛数目;双萤光素酶报告基因系统检测PPARγ基因启动子活性;油红染色检测脂滴沉积程度。结果原纤毛关键蛋白Kif3a、IFT88以及ac AT在分化第0天呈高表达,分化第2天表达降低,分化第4天表达恢复至第0天水平,分化第8天又明显减少。在分化第0天给予水合氯醛,可明显抑制原纤毛关键蛋白Kif3a、IFT88以及ac AT的表达及数目,显著增加PPARγ的启动子活性和蛋白表达及脂滴沉积。而在分化第4天给予水合氯醛,与溶媒对照组相比,虽也显著抑制原纤毛生成,但PPARγ启动子活性和蛋白表达及脂滴沉积无明显变化。结论原纤毛在3T3-L1前体脂肪细胞分化过程中呈动态变化;分化早期原纤毛减少可明显增加脂滴生成能力,然而一旦分化过程被启动,原纤毛减少不影响脂滴生成。
- 邱霓韦雪梅方伟进刘嘉熙熊燕
- 关键词：3T3-L1细胞脂肪细胞分化
