刘伟民
- 作品数：8 被引量：19H指数：3
- 供职机构：黑龙江省科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 人鼠嵌合抗体重链基因转染小鼠骨髓瘤细胞的初步研究
- 1990年
- 本文介绍了通过人鼠嵌合抗体重链基因转染小鼠骨髓瘤J558L的研究,较详尽地阐述了用原生质体融合法将重组的人鼠嵌合抗体重链基因转染到S558L骨髓瘤细胞中,并用ELISA法检测转染子的过程和方法。同时简要地说明了影响转染率的一些因素。
- 杨志兴杨学成王革伏陈虹刘伟民张云湖
- 关键词：骨髓瘤
- DNA重组技术(Ⅰ) 小量快速提取质粒DNA方法
- 1991年
- 质粒DNA的提取是最基础的DNA重组技术。国内外已经发展了许多方法用于批量提取质粒DNA。这些方法都可以获得满意的效果。这里介绍两种小量快速提取质粒DNA的方法,可用于重组子筛选及酶切分析。 (一)碱裂解法 1.将过夜培养的菌液1.5ml转移到小离心管内,15.000r/min离心30sec,弃去上清,将离心管倒置尽量除去培养液。 2.将沉淀的菌体再悬于100ml冰冷的溶液A中(50mM葡萄糖,25mM Tris pH8.0,10mM EDTA),不必要加入溶菌酶。 3.向A液中加入新配制的溶液B200μl(0.2N NaOH,1％SDS),迅速倒置几次,混合两溶液,放在冰浴上3—5分钟。 4.再加入150μl溶液C(5M醋酸钠60ml,冰醋酸11.5ml,蒸馏水28.5ml)混均后冰浴3～5分钟。
- 刘伟民
- 关键词：脱氧核糖核酸质粒DNA
- 大麻哈鱼基因文库的构建及其生长激素基因的克隆被引量：7
- 1991年
- 本文主要论述了黑龙江省特有鱼种,大麻哈鱼全基因文库的构建方法以及从所构建的1.9×10^(?)噬菌体成斑单位/ugDNA基因文库中克隆出生长激素基因片段的研究结果,作者使用DM-BL3入噬菌为载体,将大麻哈鱼肝总DNA的15-20Kb片段重组到载体中,再包装成新的重组噬菌体,以含虹鳟鱼生长激素DNA部分序列的PAF51为探针,经[^(12)P]dCTP标记后,与噬菌斑杂交,自显影,获得3个阳性斑,复筛获得90％以上阳性斑,酶切回收生长激素基因片段,实验证明,已成功地获得大麻哈鱼生长激素基因片段,可供进一步亚克隆或转移研究使用。
- 杨学成杨志兴刘伟民毕吉威赵晓祥姜凯波张云湖李洪超
- 关键词：大麻哈鱼基因文库基因克隆
- 肌苷产生菌B.Subtilis H841在2升罐中的发酵被引量：3
- 1991年
- 枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)H841肌苷产生菌是腺嘌呤、组氨酸、硫胺素三重缺陷型菌株,并对8—氮杂乌嘌呤、6—巯基嘌呤有抗性。在摇瓶中产肌胺18.1克/升,在2L自控发酵罐中最高可产肌苷19.6克/升,在流加葡萄糖情况下可产肌苷26.2克/升。控制pH较不控制pH发酵肌苷产量有较大的增加,控制pH发酵并补加营养时,肌苷产量可稳定地增长,但对葡萄糖的转化率是相同的。
- 王梦鹤刘伟民刘风元
- 关键词：肌苷发酵枯草芽孢杆菌
- 赤爱胜蚯蚓(Eisenib Foetide Sorigng)纤溶酶的研究 1.提取纯化和生物化学性质被引量：3
- 1991年
- 采用35％和65％的饱和硫酸铵分级沉淀法,获得蚯蚓纤溶酶活性蛋白,并对其纤溶酶的分子量,纤溶酶对其底物专一性,温度对纤溶酶的影响,纤溶酶最适pH值和pH值稳定性,纤溶酶的等电点,抑制剂对蚓蚯纤溶酶的影响几方面的测定,从而确定了蚯蚓纤溶酶的生物化学性质。
- 杨志兴杨学成张云湖马元生李洪超刘伟民赵晓祥姜凯波赵克强董桂华
- 关键词：蚯蚓纤溶酶
- 赤爱胜蚯蚓(Eisenia Foetida Sarigny)纤溶酶的研究Ⅱ药理学作用被引量：8
- 1992年
- 对蚯蚓纤溶酶进行了哈白兔体内、体外溶栓、抗凝试验,分别以蛇毒抗栓酶和尿激酶不同剂量组作对照试验,均有显著的溶解血栓功能.另外,蚯蚓纤溶酶溶解天然血块,对纤维蛋白原含量及凝血时间影响的药理学试验,结果证明蚯蚓纤溶酶具有溶栓与抗凝作用.
- 杨志兴杨学成张云湖马元生李洪超刘伟民赵晓祥姜凯波张昕赵克强董桂华张凤琴
- 关键词：蚯蚓纤溶酶溶血栓药理
- 虹鳟鱼(Salmo grairdneri Richard)基因文库的构建及生长激素基因的克隆和亚克隆被引量：3
- 1991年
- 以噬菌体EMBL3作为载体,构建了虹鳟鱼的全基因文库,制备了包装蛋白效率达4.6×10~8Pfu/μgDNA.基因文库重组噬菌的量为8.2×10~5pfu/μgDNA.同时用含虹鳟鱼生长激素基因cDNA的pAF-51△S作为探针,从该文库中筛选出两个阳性噬斑,复筛获得90％以上的阳性斑。并从阳性克隆中回收虹鳟收生长激素基因片段为6kb,亚克隆到puc-18质粒中,进行了酶切分析。
- 杨学成杨志兴毕吉威刘伟民赵晓祥王革伏
- 关键词：虹鳟鱼基因文库克隆亚克隆
- 含人抗体恒定区基因的酵母表达质粒的构建被引量：1
- 1992年
- 本文主要报告了用以表达人-鼠嵌合抗体基因的酵母表达载体的构建、筛选与鉴定的研究结果.作者利用高度表达的酵母质粒YEP_(51),与含人抗体恒定区基因的pSV_2gptHuG_4两个质粒为材料,构建成可以供表达任何小鼠单克隆抗体的可变区基因,以构成嵌合的人-鼠抗体基因,用酶切回收插入DNA片段、原位和斑点杂交法对重组质粒予以鉴定和筛选,获得了pYEP-H重组的酵母表达载体.
- 杨志兴杨学成王革伏刘伟民张云湖赵晓祥姜凯波李洪超
- 关键词：酵母质粒
