刘丽琴
- 作品数：7 被引量：38H指数：3
- 供职机构：广州军区广州总医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家重点实验室开放基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 利用等位基因特异性扩增检测人结直肠癌BRAF基因V600E突变被引量：1
- 2012年
- 目的建立一种基于等位基因特异性扩增技术检测人BRAF基因V600E突变的技术,用于检测低水平肿瘤点突变。方法设计选择性扩增人BRAF基因V600E的引物,利用BRAF V600E突变型大肠癌细胞系HT29核酸混合于BRAF野生型大肠癌细胞系SW480中进行灵敏度检测,通过与Sanger测序法比较,利用其检测40例结直肠癌石蜡标本的BRAF V600E突变情况。结果模拟细胞系混合检测显示该方法可检测出6.2%混杂于野生型基因里的BRAF V600E突变,利用该方法在40例大肠癌标本中成功检测出3例BRAF V600E突变,与测序法检出结果一致。结论成功建立了利用等位基因特异性扩增技术检测人BRAF基因V600E突变的实验技术并用于检测实体肿瘤标本,与测序法相比该方法具有灵敏、简便、快速的特点,可用于人肿瘤BRAF V600E突变的筛查应用。
- 司徒博曹楠楠刘丽琴李博刘芹兰林丽王前郑磊
- 关键词：大肠肿瘤BRAF突变
- 胱抑素C与早期肾功能损害的关系被引量：25
- 2010年
- 目的探讨内源性标志物血清胱抑素C(cystatin C,Cys C)在评价早期肾功能损害中的价值。方法收集住院的慢性肾病患者108例,按内生肌酐清除率(Ccr)值分为早期肾功能不全组及中晚期肾功能不全组,40例对照组取自体检健康人群。乳胶颗粒增强免疫透射比浊分析法(PETIA)测定血清Cys C的浓度,肌氨酸氧化酶法测定血清肌酐(Scr)浓度,酶偶联法测定尿素氮(BUN)。比较Cys C、Scr、BUN与Ccr的相关性及其阳性检出率。采用似然比(LR)评价Cys C的可靠性。结果对照组、早期肾功能不全组、中晚期肾功能不全组的血清Cys C分别为(0.63±0.41)、(2.59±1.32)(、7.13±1.68)mg/L。Cys C、Scr、BUN与Ccr均呈显著相关(P<0.05),以Cys C与Ccr的相关程度最密切。血清Cys C的阳性检出率最高,LR以血清Cys C为最佳。结论血清Cys C是一个敏感的反映肾小球滤过功能的指标,对早期诊断肾功能损害具有重要价值。
- 刘丽琴王捷袁仕善黄志红
- 关键词：胱抑素C肾功能损害肾小球滤过率
- 高分辨率熔解曲线分析法检测结直肠癌KRAS基因突变被引量：1
- 2012年
- 目的:采用高分辨率熔解曲线分析法检测结直肠癌中KRAS基因突变,探讨其用于临床检测的可行性。方法:首先用高分辨率熔解曲线分析法检测64例结直肠癌患者KRAS基因第2外显子的突变情况,再用直接测序法对结果进行验证。结果:通过高分辨率熔解曲线分析法检测,发现有23例KRAS基因突变(35.9%),经直接测序法验证,证实所有患者的突变情况与高分辨率熔解曲线法的结果完全一致;共检测出6种KRAS突变类型,G12D(GGT>GAT)的突变率最高(47.8%),G12D、G12V和G13D等3种常见突变型占总突变数的78.3%。结论:与直接测序法相比,应用高分辨率熔解曲线分析法检测KRAS基因突变具有操作简单快捷、结果准确、成本低的优点,适合应用于临床检测。
- 刘丽琴张海燕吴小丽张伟陈晓东王捷
- 关键词：结直肠癌KRAS基因突变高分辨率熔解曲线
- KRAS基因突变高分辨率熔解曲线检测技术参数的优化被引量：3
- 2012年
- 目的建立KRAS基因突变高分辨率熔解曲线分析法(high resolution melting,HRM)检测方法,确立最佳反应体系和反应条件,为将此技术用于临床基因突变的快速检测奠定基础。方法根据引物Tm值设立退火温度梯度,确定适宜的退火温度。利用正交实验,对影响实时荧光定量PCR(qPCR)-HRM反应体系的模板DNA、Mg2+、引物等3种主要因素进行优化。通过对SW480和MDA-MB-231细胞基因组DNA进行HRM分析检测突变,并直接测序验证,观察反应体系和反应条件的可行性。结果引物最适退火温度为60.8℃。KRAS基因突变qPCR-HRM最佳反应体系为:20μl qPCR-HRM反应体系中,引物浓度为0.5μmol/L,Mg2+为2.5mmol/L,模板DNA为40ng。优化的qPCR-HRM反应体系和反应条件能检测基因突变,和直接测序结果一致。结论采用正交实验优化的qPCR-HRM反应体系,操作简便,电泳条带清晰,熔解曲线峰型单一,特异性好,结果准确可靠,可为进一步建立HRM技术检测基因突变的临床应用提供借鉴。
- 刘丽琴张海燕王捷
- 关键词：突变高分辨率熔解曲线正交实验
- 高分辨率熔解曲线分析法检测非小细胞肺癌KRAS和BRAF基因突变被引量：5
- 2012年
- 目的探讨高分辨率熔解曲线分析(HRM)法检测非小细胞肺癌(NSCLC)中KRAS和BRAF基因突变用于临床检测的可行性。方法用HRM法检测64例NSCLC患者KRAS基因第2外显子和BRAF基因第15外显子的突变情况,用直接测序法对结果进行验证。结果 HRM法检测结果表明有9例NSCLC患者发生KRAS基因突变(14.06%)、4例发生BRAF基因突变(6.25%),直接测序法证实两法的结果完全一致;共检测出4种KRAS基因突变类型,G12C(GGT>TGT)的突变率最高(44.4%),BRAF基因突变型均为V600E。结论用HRM法检测临床样本KRAS和BRAF基因突变,具有操作简便、结果准确、成本低的优点,适用于临床检测。
- 刘丽琴张海燕吴小丽张伟陈晓东王捷
- 关键词：非小细胞肺癌KRAS基因BRAF基因突变高分辨率熔解曲线
- 高分辨率熔解曲线分析技术及其应用进展被引量：2
- 2011年
- 高分辨率熔解曲线分析(High Resolution Melting,HRM)是结合饱和荧光染料、未标记探针和实时荧光定量PCR的一种新的检测基因突变与基因分型的分子诊断技术,具有高通量、低成本、简单快捷、结果准确、灵敏度和特异性高和真正闭管操作等优点。本文就高分辨率熔解曲线分析的临床应用和研究进展进行综述。
- 刘丽琴张海燕王捷
- 关键词：高分辨率熔解曲线突变实时荧光定量PCR
- KRAS基因突变检测与结直肠癌分子靶向治疗的研究进展被引量：1
- 2011年
- 结直肠癌是常见的恶性肿瘤之一,其治疗一直是国内外学者研究的重要方向。随着靶向治疗药物表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂西妥昔单抗的问世,结直肠癌的治疗进入了靶向治疗时代。近年来,多项临床研究表明:KRAS基因突变状态与转移性结直肠癌抗EGFR单抗治疗的疗效密切相关。许多国家已经将KRAS基因突变作为是否选择EGFR抑制剂治疗的必检指标。如何快速准确地检测KRAS基因突变,对个体化治疗显得尤为重要。
- 刘丽琴张海燕王捷
- 关键词：结直肠癌KRAS基因西妥昔单抗
