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倪飞
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1
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供职机构:
中国科学院深圳先进技术研究院生物医学与健康工程研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
严飞
中国科学院深圳先进技术研究院生...
郑海荣
中国科学院深圳先进技术研究院生...
刘红梅
南方医科大学第三附属医院
王平
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2014
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载尿激酶阴离子脂质微泡联合低频超声体外溶栓的效率研究
2014年
目的制备载尿激酶(uPA)阴离子脂质微泡,探讨其联合低频超声的体外溶栓效果。方法利用二硬脂酸磷酯酰胆碱(DSPC)、二棕榈酰磷酯酰甘油(DPPG)、PEG2000修饰二硬脂酸磷酯酰乙醇胺(DSPE-PEG2000)3种磷脂,通过机械振荡法制备阴离子微泡,再将微泡与uPA混合孵育,两者结合即得载药微泡,用粒径分析仪测定其粒径及分布。用FITC标记uPA,制得荧光标记的载药微泡,在荧光显微镜下观察微泡的形态及uPA与微泡的黏附情况。用Zeta电位仪分别测定载药微泡与未载药微泡的表面电荷;用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)对载药微泡进行验证;测量加入10000、50000和100000UuPA时微泡的包封率。抽取大鼠血液制作体外血栓模型,测定载药微泡联合低频超声的体外溶栓效果。采用两样本t检验、单因素方差分析及Bonferroni法进行数据比较。结果载药微泡的平均粒径为(1.76±0.29)μm,在荧光显微镜下可以观察到FITC标记的uPA成功结合到阴离子微泡表面。载药微泡的表面电荷明显低于未载药微泡的表面电荷:(-36.64±0.21)mV与(-66.33±2.38)mV,t=21.538,P〈0.05;SDS—PAGE显示载药微泡的泳道有明显的蛋白质条带,而未载药微泡没有;当uPA加入量分别为10000、50000和100000U时,药物包封率分别为(42.01±2.02)%、(33.24±1.95)%和(33.10±1.65)%(F=22.340,P〈0.05)。生理盐水组、生理盐水±超声组、未载药微泡±超声组、载药微泡±超声组、单纯uPA组的体外溶栓效率分别为(4.09±0.80)%、(8.50±1.48)%、(14.27±1.59)%、(35.72±6.31)%、(16.87±0.46)%,载药微泡超声组最高(F=48.783,t=-8.613、-7.273、-5.942及-6.908,均P〈0.05)。结论阴离子微泡能成功搭载uPA,该微泡联合低频超声的溶栓效果良好。
陈逸寒
王平
严飞
倪飞
刘红梅
郑海荣
关键词:
血栓溶解疗法
微气泡
尿激酶
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