侯道荣
- 作品数：16 被引量：32H指数：2
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省国际科技合作项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 建立稳定表达猪LIF蛋白的小鼠STO细胞系被引量：1
- 2016年
- 目的:在STO小鼠成纤维细胞中表达猪白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF),并尝试使用其作为饲养层培养大鼠诱导多能性干细胞(i PS细胞)。方法:通过脂质体转染的技术,将已构建的猪LIF基因真核表达载体p CAG-p LIF转染至小鼠STO细胞中,获得能够稳定表达猪LIF的转基因STO细胞(STO-p LIF细胞)。通过RT-PCR、q PCR、Western blot等方法检测STO-p LIF细胞中猪LIF基因的表达量,选择高效表达猪LIF的STO-p LIF细胞作为饲养层,培养大鼠i PS细胞。通过生长曲线检测、碱性磷酸酶染色、干细胞多能因子的RT-PCR和免疫荧光染色等方法,检验STO-p LIF细胞饲养层在大鼠i PS细胞培养方面的功能。结果:STO-p LIF细胞中LIF RNA和蛋白表达水平均上调(P<0.05),而该细胞系作为饲养层所培养的大鼠i PS细胞在形态、多能性因子表达方面更接近于传统培养的大鼠i PS细胞,与无外源添加LIF所培养的大鼠i PS存在差异(P<0.05)。结论:成功获得了稳定表达猪LIF基因的STO-p LIF细胞,并证明该细胞作为饲养层在大鼠i PS细胞培养中具有一定优势。
- 陈袁赵丽华杨宁张曼玲金永侯道荣吴兆强李艳如姜海滨李荣凤
- 关键词：饲养层细胞
- 一种便携式干细胞冷藏转运装置
- 本实用新型公开了一种便携式干细胞冷藏转运装置，具体涉及冷藏转运装置技术领域，包括箱体，所述箱体内部设有制冷机构，所述制冷机构包括隔板，所述隔板顶端镶嵌有半导体制冷片，所述隔板顶端固定设有导热板。本实用新型通过设置制冷机构...
- 侯道荣鲍丹付鹤玲朱信强戴有金
- 卵泡刺激素受体短肽的表达及纯化被引量：1
- 2010年
- 目的:表达人卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)N端第18-34氨基酸片段。方法:将FSHRN端第18-34氨基酸片段克隆至pGEX4T-1中,构建成重组质粒pGEX4T-1-FSHRN(18-34位氨基酸)。将该重组质粒转化E.coliBL21后,IPTG诱导其表达,经亲和层析进行分离纯化,western blot鉴定。结果:克隆成功,并表达FSHRN端第18-34氨基酸片段,所表达的融合蛋白中60%为可溶性蛋白。结论:成功克隆、表达、纯化了人FSHRN端第18-34氨基酸片段,为后续动物免疫试验提供抗原。
- 袁栎侯道荣徐荣夏彪德伟王心如
- 关键词：FSHR纯化
- 浅谈无线射频识别技术(RFID)在SPF级实验动物管理上的应用被引量：7
- 2010年
- 通过对无线射频识别技术和电子标签系统工作原理的了解,结合实验动物识别与跟踪管理的重要性,阐述了无线射频电子标签技术在SPF级实验动物繁育管理和代养管理上的应用。
- 温泽锋夏龙齐长永侯道荣姜平
- 关键词：电子标签射频识别技术
- 钴胺转运蛋白TCN1在结直肠肿瘤中的研究进展被引量：1
- 2020年
- 目的探讨钴胺转运蛋白TCN1(transcobalaminⅠ)在肿瘤发生、发展中的作用,进一步阐明对结直肠肿瘤的作用机制。方法复习国内外近年来关于TCN1的相关知识,对结直肠肿瘤的机制研究进行综述。结果异常DNA甲基化,能改变关键基因,导致结直肠癌的发生。而其中维生素B 12相关基因钴胺转运蛋白TCN1是一种新的被发现的基因,通过一系列的级联反应,影响单碳代谢,直至引起肿瘤发生。结论TCN1在结直肠肿瘤中高表达,会对肿瘤的生长增殖起到促进作用,进一步研究TCN1在结直肠肿瘤中作用的分子机制,有助于为结直肠肿瘤的临床治疗提供新的药物靶点和实验依据。
- 朱信强侯道荣黄海龙蒋学通邢春根
- 关键词：结直肠肿瘤
- 颅内注射无水乙醇致小鼠脑损伤模型的初步观察被引量：1
- 2016年
- 目的经颅注射无水乙醇建立小鼠脑损伤模型。方法60只ICR小鼠分为6组，颅内注射不同剂量的无水乙醇，建立小鼠脑损伤模型。7d后对各组小鼠脑组织做病理、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和基因表达等检测。结果15灿无水乙醇剂量组的死亡率为30％，造模成功率为100％；造模后各实验组初期表现为行走和平衡功能障碍，后期恢复正常，但采食量和体质量明显下降。脑损伤造模后，神经细胞出现坏死，周围出现水肿并伴有神经元细胞和神经胶质细胞的细胞间隙扩大；微血管外间隙扩大并且血管内有血细胞渗出；神经细胞和神经胶质细胞的出现空泡样病变。脑组织soD活性下降和MDA含量显著升高。Q—PCR检测环氧合酶-2（Cox-2），血管内皮细胞生长因子（VEGF）和突触小体相关蛋白-25（SNAP-25）mRNA表达水平结果表明，与对照组相比，各实验组COX-2，VEGF和SNAP-25mRNA的表达显著升高。结论颅内注射无水乙醇建立小鼠脑损伤模型较传统大鼠脑损伤模型的建立操作简单、模型表型均一，重复性好，成功率高。
- 胡凡戴有金侯道荣
- 关键词：脑损伤小鼠
- 角蛋白17基因敲除加剧糖尿病小鼠的创面愈合障碍
- 2023年
- 目的 探究角蛋白17(keratin 17,Krt17)基因敲除对糖尿病小鼠创面愈合的影响。方法 取6周龄野生型小鼠和Krt17基因敲除小鼠,利用60%高脂饲料喂养4周和腹腔注射链脲佐菌素(40 mg/(kg·d),连续5 d)联合诱导建立糖尿病小鼠模型;于造模成功后1周,小鼠异氟烷全身麻醉,背部剃毛,用6 mm环钻制造在体的皮肤圆形损伤;于制造创面后第8天,利用Western blot和免疫荧光染色检测KRT17在创面近端中的表达和定位及病理组织学分析;并于制造创面后第0、2、4、6和8天拍照记录,计算伤口愈合速率。结果 在正常生理情况下,KRT17主要在小鼠毛囊中表达;当皮肤受到损伤时,创面近端的角质形成细胞中KRT17的表达显著升高;而糖尿病小鼠创面中KRT17的表达较对照组小鼠显著下调。与野生型小鼠相比,Krt17基因敲除小鼠的伤口愈合速率显著降低;创面局部炎症反应更持续。结论 Krt17基因敲除加剧了糖尿病小鼠的创面愈合障碍,Krt17可能是参与该病理进程的重要调控基因之一。
- 鲍丹郭蕊侯道荣
- 关键词：角蛋白17糖尿病创面创面愈合
- 非小细胞性肺癌患者Runx3基因启动子区甲基化状态研究
- 2009年
- 目的:分析非小细胞性肺癌(NSCLC)中Runx3基因启动子区甲基化状态。方法:运用甲基化特异性PCR技术检测62例NSCLC组织和癌旁正常肺组织中Runx3基因启动子甲基化,并分析该基因启动子甲基化Runx3基因mRNA和蛋白表达的影响及其与临床特征之间的关系。结果:NSCLC组织中Runx3基因异常甲基化率(48.4%)显著高于癌旁正常肺组织中Runx3基因的异常甲基化率(17.7%,P=0.000);发生完全或者不完全甲基化的NSCLC组织或者正常肺组织中Runx3基因mRNA和蛋白表达显著降低。Runx3基因启动子区高甲基化和肿瘤分化程度及临床分期有相关性(P=0.041和0.009),而与NSCLC患者性别、年龄、有无吸烟史及肿瘤类型等临床特征无关(P=0.400,0.301,0.290和0.965)。结论:Runx3基因启动子区异常甲基化是导致Runx3基因在NSCLC中表达下调的重要因素,有望成为NSCLC早期辅助诊断的分子标志物之一。
- 侯道荣王红中
- 关键词：非小细胞性肺癌RUNX3基因启动子甲基化
- 核转染技术转染大鼠胚胎干细胞的初步研究
- 2015年
- 大鼠胚胎干细胞(rat embryonic stem cells,r ESCs)的基因转染研究仍处于探索阶段。该文利用不同的核转染条件,将红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)表达载体p EF1alphaDs Red-Express2导入大鼠胚胎干细胞中,比较不同转染条件下大鼠胚胎干细胞的红荧光蛋白表达效率和死亡率,确定最佳核转染条件。在采用最佳核转染条件转染大鼠胚胎干细胞后,利用碱性磷酸酶染色、RT-PCR、免疫荧光染色等方法,比较核转染前后大鼠胚胎干细胞的干细胞特性,探讨核转染过程对大鼠胚胎干细胞的干细胞特性的影响。实验结果显示,转染条件为A-13时,可获得最好的大鼠胚胎干细胞转染效率(39.63±1.75)%。核转染后,表达红色荧光蛋白的大鼠胚胎干细胞的碱性磷酸酶染色结果仍为阳性。另外,RT-PCR和免疫荧光染色结果表明,核转染前后大鼠胚胎干细胞的干细胞多能性标志基因的表达情况未出现明显差异。研究表明,核转染条件A-13可以在不改变大鼠胚胎干细胞特性的条件下有效地对其进行基因转染,即核转染技术适用于大鼠胚胎干细胞的基因转染。
- 吴兆强赵丽华张曼玲金永聂晓伟侯道荣杨宁陈袁李荣凤
- 关键词：红色荧光蛋白
- miRNA-205过表达载体的构建及其对猪诱导性多能干细胞建系的作用被引量：1
- 2018年
- 目的:构建miRNA-205过表达载体并研究miRNA-205对猪诱导多能干细胞系建立的影响。方法:对本实验室已建系的猪primed胚胎干细胞、猪内细胞团细胞及猪胎儿成纤维细胞三者之间进行miRNA表达谱的分析比较,利用PCR扩增miRNA-205前体序列,并将其克隆于基础表达载体p CAGDNA3-h Fat1,构建过表达载体p CAG-miR205。使用脂质体转染技术将该载体转染到已转基因修饰的猪胎儿成纤维细胞(含有鼠源干细胞多能性转录因子Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc)。利用干细胞培养液诱导培养建立猪诱导性多能干细胞系。通过实时荧光定量PCR检测转染前后细胞内miRNA-205的表达情况,比较分析miRNA-205对猪诱导性多能干细胞的建系效率的影响。结果:成功构建了p CAG-miR205过表达载体;相较于未转染细胞,转染该载体细胞的miRNA-205表达量显著升高(P<0.01);利用干细胞培养液诱导后培养转染组的诱导性多能干细胞克隆长出率高于未转染细胞组。结论:研究结果表明在细胞水平上过表达micro RNA-205,可提高猪诱导性多能干细胞建系效率;已构建的miRNA-205过表达载体将有助于在后续研究中建立稳定表达miRNA-205的细胞系,为进一步深入研究miRNA-205在干细胞重编程和多能性维持中的作用机制打下基础。
- 陈俏羽赵丽华陈袁张曼玲侯道荣姜海滨王俊政刘曼菱王晨宇尤志欢李荣凤
- 关键词：诱导多能干细胞
