侯新芳
- 作品数：24 被引量：128H指数：6
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- 金属硫蛋白1H在儿童和青少年骨肉瘤血清中的表达及其对细胞增殖的影响被引量：7
- 2017年
- 目的检测金属硫蛋白1H（MT1H）在儿童和青少年骨肉瘤血清中的表达，分析MT1H与临床病理特征的关系，并探讨MT1H对人骨肉瘤细胞U2OS增殖能力的影响及其机制。
方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测MT1H在儿童和青少年骨肉瘤和骨良性疾病中表达情况，分析MT1H表达和骨肉瘤临床病理特征之间的关系。在体外将MT1H基因转染人骨肉瘤细胞U2OS，采用反转录聚合酶链反应（RT－PCR）和Wes－tern blot方法检测MT1H mRNA和蛋白的表达情况，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖，采用Western blot方法检测核因子（NF）－κB、抑制性κB（IκB）－α蛋白表达情况。
结果MT1H在骨良性疾病和骨肉瘤血清中的表达水平分别为（0.51±0.52） μg/L和（2.17±0.78） μg/L，其在骨肉瘤血清中的表达水平明显升高（t＝－8.966，P〈0.05）。MT1H在Ⅰ～ⅡA期、ⅡB～Ⅲ期骨肉瘤血清中的表达水平分别为（1.98±0.69） μg/L、（2.45±0.82） μg/L，其表达水平呈逐渐升高趋势，差异有统计学意义（t＝－2.343，P〈0.05）。转染MT1H基因后，骨肉瘤细胞MT1H mRNA和蛋白表达均升高（均P〈0.05）。MTT结果显示，与空白对照组、空质粒转染组相比，MT1H真核质粒转染骨肉瘤细胞系U2OS 72 h后，细胞增殖加快。空白对照组、空质粒转染组、MT1H转染组A值分别为0.38±0.03、0.36±0.03、0.42±0.03；与空白对照组、空质粒转染组相比，MT1H转染组A值升高（F＝4.213，P〈0.05）。Western blot检测显示，空白对照组、空质粒转染组、MT1H转染组细胞中NF－κB的相对表达量分为0.56±0.05、0.53±0.05、0.92±0.07，IκB－α蛋白的相对表达量分别为0.64±0.06、0.62±0.09、0.34±0.08，与空白对照组、空质粒转染组相比，MT1H转染组NF－κB蛋白表达上调、IκB－α蛋白表达下调（F＝44.581、14.927，均P〈0.05）。
结论MT1H在儿童和青少年骨肉瘤血清中表�
- 侯新芳李帅吴晨徐淑宁李克王居峰
- 关键词：骨肉瘤酶联免疫吸附试验增殖
- 大肠癌组织c-Met和VEGF表达及其与微血管密度关系的初步研究被引量：9
- 2012年
- 目的:探讨大肠癌组织c-Met和血管内皮生长因子(VEGF)的表达以及两者与肿瘤血管生成的关系及其临床病理学意义。方法:选取经病理确诊的51例大肠腺癌手术切除组织标本,免疫组化SP法检测c-Met和VEGF的表达及微血管密度(MVD)。结果:大肠癌组织中c-Met和VEGF的阳性表达率分别为72.55%(37/51)和52.94%(27/51);与Dukes分期密切相关,P<0.05。大肠癌组织c-Met、VEGF均为阳性时MVD值为37.94±7.53,单一阳性时分别为30.67±1.45和23.82±7.45,均为阴性时MVD值最小,为13.64±5.33。大肠癌组织中c-Met和VEGF的表达呈显著正相关,rs=0.614,P<0.05。结论:c-Met和VEGF在大肠癌发生、发展和转移过程中起重要作用,并与肿瘤血管生成相关。
- 刘文静马杰李克刘莺侯新芳王居峰
- 关键词：肠肿瘤受体蛋白质酪氨酸激酶类
- 金属硫蛋白IH在非小细胞肺癌中的表达及其对耐药性的影响
- 金属硫蛋白(metallothionein，MT)是一类普遍存在的低分子量(6-7KD)，富含半胱氨酸的金属结合蛋白。MT对维持一些必需金属的体内代谢平衡及抵抗有毒金属毒性、清除自由基有重要意义。近年来，MT和肿瘤的关系...
- 侯新芳
- 关键词：金属硫蛋白非小细胞肺癌SIRNA顺铂耐药性
- 文献传递
- 金属硫蛋白1H在晚期NSCLC患者外周血中的表达及其意义被引量：2
- 2007年
- 收集经病理确诊的40例晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者经含顺铂方案化疗前后的外周静脉血,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测金属硫蛋白1H(MT1H)的表达。化疗前MT1H表达水平明显低于化疗后(P<0.05),且与肿瘤的分化程度、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。有效者化疗前后的表达差异与无效者比较无明显差异。提示MT1H可作为确定治疗方案、判断预后的实验室指标;MT1H阳性表达可能耐药,但能否作为晚期NSCLC对含铂方案耐药的分子指标,值得进一步研究。
- 许林平樊青霞侯新芳王留兴王瑞林
- 关键词：非小细胞肺癌逆转录多聚酶链反应顺铂
- RNAi沉默N-cadherin表达对EC9706细胞裸鼠移植瘤生长的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨RNAi沉默N-cadherin表达对人食管鳞状细胞癌EC9706细胞体内生物学行为的影响。方法:通过逆转录病毒介导的RNAi技术将N-cadherin基因的RNA干扰载体pMSCVneo/N-cadherin质粒及对照质粒pEGFP-MSCVneo质粒分别转染至人食管癌细胞系EC9706,运用G418进行抗性克隆的筛选和扩增,进而得到稳定转染的人食管癌细胞系EC9706(分别命名为干扰载体组和空载体组),将正常对照组、空载体组和干扰载体组EC9706细胞通过皮下注射的方式接种于裸鼠背部肩胛区,比较各组裸鼠成瘤期、成瘤大小、瘤体终重量及终体积等情况。运用免疫组织化学方法和Western blotting方法检测3组裸鼠移植瘤组织中E-cadherin、N-cad-herin和MMP-9蛋白的表达情况。TUNEL法检测3组裸鼠移植瘤组织中细胞的凋亡水平。结果:(1)与正常对照组和空载体组相比较,干扰载体组裸鼠移植瘤的生长速率、成瘤大小、瘤体终重量和终体积明显降低(P<0.05)。(2)与正常对照组和空载体组相比,干扰载体组裸鼠移植瘤组织中N-cadherin和MMP-9的蛋白表达均下调(P<0.05),而E-cadherin的蛋白表达则无明显变化(P>0.05)。(3)与正常对照组(51.55±4.68)和空载体组(54.17±5.26)相比,干扰载体组(106.81±6.47)裸鼠移植瘤组织中凋亡的阳性细胞数明显增加(P<0.05)。结论:RNAi沉默N-cadherin表达可明显抑制EC9706细胞裸鼠体内移植瘤的生长,其作用机制可能是通过下调MMP-9的表达,降低细胞对细胞外基质的降解能力,进而降低EC9706细胞的体内侵袭力。RNAi沉默N-cadher-in表达具有体内抑制食管鳞状细胞癌细胞生长的作用。N-cadherin可望成为抗食管鳞状细胞癌治疗的潜在分子靶点。
- 李克刘莺刘文静侯新芳何素英王居峰
- 关键词：食管肿瘤RNA干扰肿瘤侵袭
- 多西紫杉醇联合奥沙利铂、卡培他滨治疗晚期胃癌的疗效观察被引量：1
- 2010年
- 目的:观察多西紫杉醇联合奥沙利铂、卡培他滨治疗晚期胃癌的临床疗效和毒副反应。方法:选择不能手术或手术后复发的晚期胃癌患者80例,随机分为试验组和对照组,各40例。试验组采用多西紫杉醇60mg·m-2,静脉滴注,第1天;奥沙利铂130mg·m-2,静脉滴注,第1天;卡培他滨800mg·m-2,口服,bid,第1～14天。对照组采用顺铂20mg·m-2,静脉滴注,第1～5天;5-氟尿嘧啶500mg·m-2,静脉滴注,第1～5天。2组均以21d为1个周期。至少2周期后评价疗效及毒副反应。结果:试验组40例患者有38例可评价疗效,有效率为55.3%,中位疾病进展时间(TTP)为6.6个月,中位总体生存时间(OS)为11.3个月。对照组40例均可评价疗效,有效率42.5%,中位TTP为5.1个月,中位OS为8.9个月。2组差异无统计学意义(P>0.05)。毒副反应主要为骨髓抑制、消化道反应、外周神经毒性,大部分患者可以耐受。结论:多西紫杉醇联合奥沙利铂、卡培他滨治疗晚期胃癌疗效肯定,毒副反应可耐受,可作为主要治疗方案。
- 侯新芳刘莺刘文静臧凯王居峰
- 关键词：多西紫杉醇奥沙利铂卡培他滨胃癌
- siRNA干扰MT1H基因对A549/DDP细胞耐药性的逆转被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨siRNA干扰金属硫蛋白1H(metallothionein 1H,MT1H)基因逆转A549/DDP细胞耐药的可行性。方法:采用RT-PCR方法检测MT1H基因在A549和其顺铂耐药株A549/DDP细胞中的表达;将针对MT1H的siRNA导入A549/DDP细胞;用RT-PCR和斑点印迹方法分析MT1H基因表达情况;MTT法观察细胞顺铂耐药性;TUNEL、流式细胞术检测顺铂诱导细胞凋亡率;免疫细胞化学分析凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:MT1H在A549/DDP细胞中高表达但不在A549细胞中表达;A549/DDP细胞转染48 h后,与对照组比较,MT1HsiRNA转染组MT1H mRNA和蛋白表达均明显下调,细胞对DDP的药物敏感性明显提高,DDP诱导凋亡率明显增加,Bcl-2表达明显下降,Bax表达无变化。结论:MT1H基因沉默能降低Bcl-2表达,增强顺铂对A549/DDP细胞凋亡诱导作用,有效逆转A549/DDP细胞耐药。
- 侯新芳樊青霞王留兴王瑞林陆士新赵培荣
- 关键词：细胞凋亡
- C端带His标签重组MT1G真核表达载体构建及其在EC9706中的表达被引量：4
- 2009年
- 目的:构建含MT1GcDNA的重组真核表达载体,并观察在人食管癌细胞EC9706中表达情况。方法:用PCR法从含MT1G基因cDNA质粒pACT2-MT1G中扩增获得目的基因片段,正向克隆入C端带Myc和6×His标签的真核表达质粒pcD-NA3.1/Myc-His(-)中。经酶切及测序鉴定后,以脂质体法转染EC9706细胞,经G418加压筛选获得阳性单克隆细胞,用RT-PCR和蛋白质印迹法技术检测MT1G mRNA和蛋白的表达。结果:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1/Myc-His(-)-MT1G,转染pcDNA3.1/Myc-His(-)-MT1G的EC9706细胞内有带His标签MT1G融合蛋白表达。结论:获得了人MT1G重组载体和稳定表达带His标签MT1G融合蛋白的EC9706细胞株,为进一步研究MT1G的功能奠定了基础。
- 侯新芳王居峰臧凯杨树军陆士新
- 关键词：食管肿瘤基因表达
- MT1H基因对肺腺癌细胞A549耐药性的影响
- 目的:探讨金属硫蛋白1H(metallothionein 1H,MT1H)基因对人肺腺癌A549细胞耐药性的影响。方法:构建真核表达载体pcDNA3.1(-)-MT1H,利用脂质体介导将其转染肺腺癌A549细胞,G418...
- 侯新芳王居峰臧凯刘文静
- 关键词：肺腺癌耐药凋亡
- 文献传递
- 恶性肿瘤病人中弓形虫感染结果分析被引量：16
- 2001年
- 目的 为了解肿瘤病人中弓形虫感染情况 ,探讨肿瘤病人与弓形虫之间的关系。方法 采用ELISA间接法 ,按样品OD值与阴性参考二孔OD平均值之比≥ 3 0为阳性标准。结果 肿瘤病人、普通病人和健康人群弓形虫感染率分别为 6 3 5 3%、2 4 14%和9 5 2 %。结论 肿瘤病人中弓形虫感染率远远高于普通病人组和健康人群 ,经统计学处理有非常显著意义 (χ2 =2 6 6 0 ,P <0 0 0 1)。
- 杨占军王传兵侯新芳
- 关键词：肿瘤病人弓形虫
