- 小鼠SLC基因真核表达载体的构建及表达被引量：1
- 2005年
- 次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid tissue chemokine,SLC)是重要的CC趋化因子,对多种免疫细胞特别是T淋巴细胞、树突状细胞(dendritic cell,DC)及NK细胞具有趋化作用.研究证实,SLC通过募集T淋巴细胞、DC和NK等免疫效应细胞到肿瘤组织、促进细胞因子的释放以增强肿瘤局部非特异性免疫以及抑制肿瘤血管生成等作用,达到其显著的抗肿瘤效果,是目前肿瘤免疫治疗的理想效应分子.为了进一步探索SLC在肿瘤基因治疗中的应用,我们构建了小鼠SLC基因的真核表达载体pVAX1-mSLC,为今后开展体内基因治疗肿瘤奠定基础.
- 侯丽赵跃然王来城焦玉莲张捷马春燕崔彬
- 关键词：基因真核表达载体SLC次级淋巴组织趋化因子抑制肿瘤血管生成小鼠趋化作用
- 人CCL21基因真核表达载体的构建及表达被引量：2
- 2005年
- 为了构建可在哺乳动物细胞内高效表达人次级淋巴组织趋化性细胞因子(hCCL21)的真核表达质粒pVAX1-hCCL21,以便用于hCCL21基因治疗研究。以BamHI和XhoI双酶切重组克隆pSK-hCCL21,胶回收约540bp的hCCL21目的基因片段,以亚克隆法构建于真核表达载体pVAX1的相应酶切位点,转化后进行菌落PCR分析和BamHI、XhoI双酶切鉴定。阳性克隆提取质粒,体外电穿孔法转染COS-7细胞,Westernblot法检测转染细胞中hCCL21的瞬时表达,趋化小室法检测表达产物对淋巴细胞的免疫趋化作用。结果显示,菌落PCR和酶切鉴定证实,目的基因hCCL21正确插入到真核表达载体pVAX1中,转染COS-7细胞后,细胞培养上清及裂解产物中可检测到重组蛋白hCCL21的表达,并且表达产物对人外周血单个核细胞有明显的趋化活性。已成功构建了可在哺乳动物细胞内高效表达hCCL21基因的真核表达质粒pVAX1-hCCL21,为进一步研究hCCL21基因治疗肿瘤奠定了基础。
- 侯丽赵跃然焦玉莲张捷王来城马春燕崔彬
- 关键词：CCL21真核表达COS-7细胞电穿孔
- 次级淋巴组织趋化因子在肿瘤治疗中的研究进展
- 2005年
- 次级淋巴组织趋化因子 (SLC)是体内重要的趋化因子 ,高表达于次级淋巴组织 ,通过与细胞表面受体结合 ,趋化并活化T淋巴细胞、天然杀伤细胞和树突状细胞等免疫效应细胞 ,在机体抗感染和抗肿瘤免疫中具有重要的调节作用。现综述SLC的生物学特性 。
- 侯丽赵跃然
- 关键词：趋化因子肿瘤免疫疗法基因疗法
- 真核表达载体pVAX1-mSLC的构建及在COS-7细胞中的表达
- 2005年
- 目的:构建小鼠次级淋巴组织趋化因子(mSLC)高效真核细胞表达载体pVAX1-mSLC。方法:用BamHⅠ和XbaⅠ双酶切重组克隆pMD-mSLC,胶回收约410bp的SLC基因片段,以亚克隆法构建于真核表达载体pVAX1的相应酶切位点。转化后进行菌落PCR分析和HinDⅢ酶切鉴定。阳性克隆提取质粒,体外电穿孔法转染COS-7细胞,用Westernblot检测转染细胞中mSLC的瞬时表达。结果:菌落PCR和HinDⅢ酶切鉴定证实,mSLC基因片段正确插入到真核表达载体pVAX1中。Westernblot检测表明,以重组质粒pVAX1-mSLC转染的COS-7细胞能表达mSLC,表达产物的相对分子量同预期的结果相一致。结论:成功地构建小鼠SLC基因的真核表达质粒pVAX1-mSLC,用它转染COS-7细胞后,能瞬时表达mSLC,为下一步mSLC的肿瘤基因治疗研究奠定了基础。
- 侯丽马金龙王来城张捷焦玉莲马春燕崔彬赵跃然
- 关键词：次级淋巴组织趋化因子真核表达COS-7细胞电穿孔
- 重组共表达载体pSLC-IRES-IL-2的构建及在COS-7细胞中的表达被引量：2
- 2005年
- 目的:构建共表达质粒pSLC-IRES-IL-2,并在COS-7细胞中表达。方法:根据人SLC和IL-2cDNA的序列分别设计、合成引物,构建以内部核糖体进入位点(IRES)相连的SLC和IL-2基因的真核表达质粒pSLC-IRES-IL-2,用电穿孔法以共表达质粒转染COS-7细胞。用Westernblot检测SLC和IL-2的表达。结果:Westernblot检测表明,以重组共表达质粒pSLC-IRES-IL-2转染的COS-7细胞能表达SLC和IL-2,表达产物的Mr同预期的结果相一致。结论:成功地构建SLC和IL-2基因的共表达质粒,以其转染COS-7细胞后,能分泌性表达SLC和IL-2,为肿瘤基因治疗的研究提供一定途径。
- 侯丽赵跃然王来城焦玉莲张捷马春燕崔彬
- 关键词：SLC白细胞介素-2内部核糖体进入位点COS-7
- SLC基因真核表达载体的构建及在COS-7细胞中的表达
- 目的
次级淋巴组织趋化因子(secondarylymphoidtissuechemokine，SLC)又称为CCL21(CCchemokineligand21)、6Ckine、exodous2、TCA4等，是趋化因子家...
- 侯丽
- 关键词：真核表达COS-7细胞抗肿瘤基因肿瘤免疫学
- 文献传递
