何泽 作品数:8 被引量:39 H指数:2 供职机构: 苏州大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 更多>>
家蚕生物反应器研究——转hGM-CSF基因家蚕及杆状病毒表达SARS-CoV M基因 桑蚕生物反应器主要有两种形式;转基因桑蚕(transgenicsilkworm)和杆状病毒表达载体系统(BaculovirusExpressionVectorSystem,BEVS)。
本文将由家蚕核型多角体病毒(... 何泽关键词:杆状病毒 SARS病毒 M蛋白 文献传递 基于piggyBac转座子转hGM-CSF基因家蚕的研究 被引量:30 2006年 将由家蚕核型多角体病毒IE-1基因启动子控制下的hGM-CSF基因克隆到p igA3GFP载体中,构建了家蚕转基因载体p igA3GFP[IE-GMCSF],利用压力渗透法和精子介导法将其与辅助质粒helper p igA3一起导入家蚕蚕卵,获得产生绿色荧光的家蚕,次代产生荧光蚕的比例分别为0.17%,0.15%。将次代荧光蚕与正常蚕交配后代(G1)的荧光蚕个体再相互杂交,连续进行多代选育,获得了稳定遗传的转hGM-CSF基因家蚕品系。 曹广力 薛仁宇 何泽 郑小坚 沈卫德 贡成良关键词:转基因家蚕 精子介导法 转hGM-CSF基因家蚕研究 为了使外源基因能在桑蚕中连续表达,克服BEVS系统的缺点,转基因家蚕的研究正日渐受到国内外学者的重视。我们将由家蚕核型多角体病毒(BmNPV)IE-1基因启动子及其控制下的hGM-CSF基因克隆到PigA3GFP中,构建... 刘波 何泽 郑小坚 曹广力 薛仁宇 贡成良关键词:转基因 生物反应器 PIGGYBAC 转座子 文献传递 中国野桑蚕mtDNA COⅡ-ATPase 6基因区域的序列测定及分析 被引量:2 2005年 对中国山东青州野桑蚕mtDNACOⅡ-ATPase6基因区域进行了序列测定与分析。结果表明在所测定的1.9kb左右的片段中,含有COⅠ基因的部分序列、tRNA-Leu基因、COⅡ基因、tRNA-Lys基因、tRNA-Asp基因、ATPase8基因、ATPase6基因和部分COⅢ基因,该片段的基因组织结构与其他家蚕/野桑蚕的基本一致,显示蚕类线粒体基因排列的保守性。COⅡ、ATPase8、ATPase6三个结构基因不同家蚕/野桑蚕之间的比对分析表明,它们在核苷酸水平、氨基酸水平的同源性很高。结构基因密码子与其他蚕类的相似;3个tRNA基因(tRNA-Leu、tRNA-Lys、tRNA-Asp)的碱基错配率高,TψC环缺乏相对保守的T-ψ-C-Pu-A序列,各臂的碱基配对数、各环碱基数目变化较大。以COⅡ、ATPase8、ATPase6基因的核苷酸序列进行家蚕/野桑蚕的分子进化分析表明,家蚕同中国野桑蚕的亲缘关系最近,是家蚕起源于中国野桑蚕的又一证据。 何泽 陈淼 郑小坚 曹广力 薛仁宇 贡成良关键词:野桑蚕 MTDNA 分子进化 家蚕微孢子虫16S rRNA基因序列及分子进化 2005年 通过PCR克隆了家蚕微孢子虫(Nosemabombycis)苏州株的完整16SrRNA基因序列。序列分析表明,16SrRNA基因大小为1235bp,缺乏多个被认为是真核生物序列的区域,序列结构特征更多地类似于原核生物的,在进化上,推测微孢子虫在很早以前与原始真核生物产生分歧;分子进化分析发现,同属的微孢子虫可以处于系统进化树不同的分枝。 潘中华 曹广力 薛仁宇 郑小坚 陈淼 何泽 贡成良关键词:家蚕微孢子虫 RRNA 分子进化 中国野桑蚕mtDNA中A+T丰富区片段的克隆及序列分析 被引量:7 2004年 对中国野桑蚕mtDNAA +T丰富区片段进行了克隆和序列分析。在所测定的 72 0bp左右的片段中 ,A +T含量为 92 0 8% ,与不同家蚕品种的mtDNA相近 ,中国野桑蚕与家蚕之间的核苷酸序列呈高度同源性 (98%以上 ) ;但与日本野桑蚕相比 ,中国野桑蚕mtDNA的A +T丰富区片段 ,缺少 2个 12 6bp的重复单位 ,A +T含量低 0 9% ,核苷酸序列同源性也较低 (72 % )。该片段与中系家蚕mtDNA比较 ,有 15个变异位点。对mtDNAA +T丰富区的中国野桑蚕和日本野桑蚕及中系、日系和韩国的 4个家蚕品种进行聚类分析表明 ,日本野桑蚕有可能由中国野桑蚕分化而来。 郑小坚 曹广力 薛仁宇 陈淼 何泽 贡成良关键词:野桑蚕 MTDNA SARS-CoV S蛋白在大肠杆菌和家蚕中的表达 2005年 将SARS-CoV S蛋白基因的部分序列(accession number为AY304495的22 908-23 542 nt区域),克隆到表达载体pET28 a(+)中,并在大肠杆菌BL21中诱导表达。SDS-PAGE、W estern b lotting分析表明,重组S蛋白的分子量约为27 kD,与理论分子量相符。将S蛋白基因的部分序列克隆入杆状病毒转移载体pBacPAK-H is后,与线性化家蚕杆状病毒BmBacPAK-6共转染BmN细胞,经空斑筛选获得重组杆状病毒BmBac-S,并将其在细胞和家蚕中进行表达。SDS-PAGE、W estern b lotting分析表明,表达产物的分子量约30 kD,用金属螯合亲和层析纯化得到家蚕细胞表达的重组S蛋白。 陈文柱 何婀妮 曹广力 薛仁宇 陈淼 何泽 沈卫德 贡成良关键词:S蛋白 大肠杆菌 杆状病毒 家蚕 家蚕生物反应器研究 桑蚕生物反应器主要有两种形式;转基因桑蚕(transgenic silkworm)和杆状病毒表达载体系统(Baculovirus Expression Vector System,BEVS)。我们将由家蚕核型多角体病毒(... 何泽关键词:转基因 生物反应器 PIGGYBAC 转座子 杆状病毒 文献传递 网络资源链接