何娜
- 作品数：5 被引量：10H指数：3
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学更多>>
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- 基于HTS-ELISA的抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体制备新方法研究
- 黄曲霉毒素M是黄曲霉毒素B在动物体内氧化酶作用下经羟基化而形成的,该毒素具有强烈的致癌性、致畸性以及致突变性,此毒素痕量存在于乳制品中,由于黄曲霉毒素M耐高温能力强,因此在乳制品的加工过程中无法通过高温杀菌工艺直接除去,...
- 何娜
- 关键词：黄曲霉毒素M1单克隆抗体
- 文献传递
- 基于HTS-ELISA的抗黄曲霉毒素M<sub>1</sub>单克隆抗体制备新方法研究
- 黄曲霉毒素M<sub>1</sub>是黄曲霉毒素B<sub>1</sub>在动物体内氧化酶作用下经羟基化而形成的,该毒素具有强烈的致癌性、致畸性以及致突变性,此毒素痕量存在于乳制品中,由于黄曲霉毒素M<sub>1</su...
- 何娜
- 关键词：单克隆抗体
- 黄曲霉毒素M1检测ELISA条件的优化及应用研究被引量：3
- 2008年
- 采用黄曲霉毒素M1与牛血清白蛋白偶联物抗原免疫Balb/C小鼠获得特异性抗体。利用此抗体,进行间接竞争ELISA法试验,确定了最佳抗原包被反应浓度为1.0μg·mL-1,最佳抗原包被条件为4℃过夜,一抗和酶标二抗IgG-HRP最佳工作浓度为1∶8000和1∶5000。建立间接竞争定量ELISA方法,该方法的最低检出限是0.08ng·mL-1,间接竞争ELISA50%抑制率浓度为0.62ng·mL-1,校正曲线的线性范围为0.04～5ng·mL-1。在此优化条件下制备的抗体检测黄曲霉毒素M1具有很高的特异性和灵敏性,具有实际应用价值。
- 裴世春郑丽娜唐彦君张园园何娜
- 关键词：黄曲霉毒素M1酶联免疫吸附测定单克隆抗体
- 应用HTS-ELISA筛选方法制备抗黄曲霉毒素M1单抗被引量：4
- 2010年
- 【目的】确立基于高通量酶联免疫(HTS-ELISA)筛选方法制备高亲和力抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的方法体系。【方法】采用AFM1-BSA(Aflatoxin M1-bovine serum albumin)免疫Balb/C小鼠,利用HTS-ELISA方法筛选分泌抗黄曲霉毒素M1单抗的杂交瘤细胞株,并分析抗体的特性。【结果】筛选到14株具有分泌高活性抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化的最佳抗体的亲和力为5.5×10-10 mol/L。与黄曲霉毒素M1及其结构类似物黄曲霉毒素M2、B1、B2、G1、G2以及其他物质脱氧雪腐镰刀菌烯醇和BSA的交叉反应率分别为100%、4.5%、21.5%、1.0%、16.6%、1.0%、0%、0%。间接竞争ELISA检测最低检测限可达0.01μg/L,线性范围为0.1-10μg/L,竞争性抑制抗体反应50%的抑制浓度IC50为0.82μg/L,添加0.25-5μg/L黄曲霉毒素的牛奶间接竞争ELISA检测回收率在60.3%-152.8%之间。【结论】HTS-ELISA方法可以制备具有高亲和力的抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体,可为黄曲霉毒素M1免疫检测体系的建立提供优质抗体材料。
- 裴世春何娜张立军陆梅生
- 关键词：黄曲霉毒素M1单克隆抗体
- 抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的制备及定量ELISA方法的建立被引量：4
- 2008年
- 采用黄曲霉毒素M1与牛血清白蛋白偶联物免疫8周龄BALB/c小鼠,4次免疫后,使小鼠产生免疫应答,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合、筛选,最终获得1株能稳定分泌抗黄曲霉毒素M1的杂交瘤细胞株系。其染色体平均计数为90±10对,间接ELISA检测该株系培养上清的效价为1∶6400,纯化腹水效价为5000×27,与黄曲霉毒素M1及其结构类似物黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇的反应率分别为100%、7%、0%。经传30代后,抗体效价稳定。并在此基础上建立了间接竞争ELISA检测方法,该方法的最低检出浓度是0.08ng/mL,校正曲线的线性范围为0.08ng/mL～5ng/mL。该方法的加标回收率为80.0%～128.3%。
- 张园园裴世春才琳何娜赵识非霍贵成
- 关键词：黄曲霉毒素M1酶联免疫吸附测定单克隆抗体
