亓晓温
- 作品数：4 被引量：18H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院毒物药物研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RSV CTL表位与G蛋白片段的融合表达对G蛋白片段诱导的免疫应答的调节作用被引量：11
- 2007年
- 目的:观察呼吸道合胞病毒(RSV)的CTL表位F/M2与G蛋白抗原活性片段G1融合表达后,对G1诱导的免疫应答的调节作用。方法:将重组表达质粒pET-DsbA-G1和pET-DsbA-G1F/M2分别转化E.coli BL21(DE3),诱导表达融合蛋白DsbA-G1和DsbA-G1F/M2,亲和层析纯化。取上述蛋白,腹腔注射免疫BALB/c小鼠,定期采集血清和脾细胞,用MTT法测定CTL杀伤活性,ELISA测定IgG及其亚类IgG1和IgG2a抗体滴度,空斑抑制实验检测血清中和抗体。结果:经表达和纯化获得了纯度达90%以上的融合蛋白;DsbA-G1F/M2诱导了显著的RSV特异性CTL杀伤活性,而无CTL表位的DsbA-G1则不能诱导产生CTL反应;DsbA-G1F/M2和DsbA-G1均刺激产生了强烈的IgG抗体应答,但DsbA-G1所产生的IgG亚类仅为IgG1,而DsbA-G1F/M2同时诱导了高滴度的IgG1和IgG2a,显著下调了IgG1与IgG2a的比例;二者均诱导了高滴度的中和抗体,但与DsbA-G1相比,DsbA-G1F/M2所诱导的中和抗体滴度有所减弱。结论:CTL表位F/M2与G蛋白片段G1的融合表达产物DsbA-G1F/M2,能够同时诱导细胞免疫和体液免疫应答,CTL的激活下调了IgG1与IgG2a的比例,使得免疫应答更平衡,有利于改善该候选疫苗的安全性。
- 曾瑞红梅兴国龚伟亓晓温
- 关键词：CTL表位IGG1IGG2A
- 卡铂长循环热敏脂质体研究
- 目前,癌症仍然是严重威胁人们生命的主要疾病之一,癌症引起的死亡人数超过了艾滋病、肺结核和疟疾的总和。据估计,2007年全球新增癌症病例1200多万,死亡760万,相当于每天有20000人死于癌症。由于人口增长和老龄化的问...
- 亓晓温
- 关键词：卡铂脂质体抑瘤率
- 文献传递
- 呼吸道合胞病毒M2：81-95与热休克蛋白70L1融合蛋白的制备及其免疫原性被引量：1
- 2009年
- 目的构建呼吸道合胞病毒（RSV）CTL表位M2：81-95与热休克蛋白（HSP）70L1融合蛋白的重组质粒，原核表达后初步研究其免疫原性。方法从SMMC7721细胞中克隆HSP70L1基因，PCR扩增M2：81-95基因片段，鉴定后构建质粒pET-HSP70L1-M2：81-95（pET-HSP70L1-M2），经PCR和酶切鉴定，转化E．coli BL21（DE3），用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达HSP70L1-M2：81-95（HSP70L1-M2），Ni^＋螯合亲合层析纯化，梯度透析复性。用该蛋白免疫10只BALB／c小鼠，ELISA检测IgG抗体及其亚型，噻唑蓝（MTT）法检测CTL杀伤活性。结果成功构建重组质粒pET-HSP70L1-M2，并在E．coli中表达重组蛋白HSP70L1-M2，该蛋白诱导RSV及表位特异性的CTL活性，还诱导蛋白抗原特异性的IgG，为4．87±0．35、IgG1为5．53±0．28、IgG2a为4．40±0．21，且IgG1／IgG2a（1．26）的比例平衡，与PBS对照组的IgG，为0．33±0．17、IgG1为0．51±0．21、IgG2a为0比较，差异有统计学意义（t=3．512，3．681，5．856；P＜0．05）。结论成功构建原核表达质粒pET-HSP70L1-M2，并表达纯化获得重组蛋白，免疫小鼠后诱导RSV及表位特异性的CTL活性和辅助性T淋巴细胞（Th）1／Th2混合型应答。
- 曾瑞红梅兴国亓晓温张振亚魏林
- 关键词：呼吸道合胞病毒T淋巴细胞T淋巴细胞热休克蛋白质类重组融合蛋白质类
- 卡铂热敏脂质体释药特性考察被引量：4
- 2009年
- 目的建立卡铂热敏脂质体包封率和含量测定方法，并对其体外热敏释药特性进行考察。方法采用超滤法分离载药脂质体和游离药物，以甲醇-水作为流动相，采用C8柱，用HPLC测定包封率。采用超滤分离法考察脂质体在42℃的体外释放规律和不同温度条件下的释放度。结果超滤分离方法的药物回收率为99．5%加样回收率为100．6%,药物含量测定方法的工作曲线为A=8572．6 ρ-918．77（n=6），r=0．9999，线性范围0．517～51．7mg·L^-1；脂质体在42℃条件下的释放规律符合一级动力学过程。结论本方法简便、准确，可以用于测定卡铂脂质体的含量和包封率，所制备的热敏脂质体具有显著的热敏释药特性。
- 亓晓温梅兴国
- 关键词：卡铂脂质体释药
