严林海
- 作品数：14 被引量：17H指数：3
- 供职机构：广西医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- E2F-1过表达对胃癌细胞凋亡及相关基因表达的影响被引量：6
- 2009年
- 背景与目的:E2F-1(E2F transcription factor1)基因是细胞周期的重要转录因子,也参与了细胞凋亡的过程,但机制尚不明确。本研究通过观察E2F-1过表达对胃癌细胞MGC-803凋亡的影响及对下游基因的调控,初步探讨其参与凋亡的分子机理。方法:用流式细胞仪检测稳定转染E2F-1的胃癌MGC-803/E2F-1细胞(实验组)、转染空载体的MGC-803/EV(阴性对照组)及未转染的MGC-803细胞的凋亡情况。再分别抽取MGC-803/E2F-1和MGC-803细胞的总RNA,采用逆转录的方法,制成cDNA,并以两种荧光Cy5和Cy3标记后作为探针(荧光交换芯片),与含有21522条人类基因表达谱芯片进行杂交。采用LuxScan10K/A双通道激光扫描仪扫描芯片上两种荧光信号,应用LuxScan3.0图像分析软件对芯片图像进行处理和分析与凋亡相关的基因的表达,再用RT-PCR针对性的对筛选得到的基因进行验证。结果:MGC-803/E2F-1组细胞的凋亡率明显高于MGC-803/EV组和MGC-803组,3组凋亡率分别为(8.40±0.91)%、(4.53±0.61)%、(4.97±0.47)%;基因芯片扫描筛选出与凋亡相关的差异表达基因15条,其中上调基因4条,下调基因11条;RT-PCR验证多条相关基因其上、下调趋势同基因芯片结果一致。结论:E2F-1基因过表达促进了胃癌MGC-803细胞的凋亡,其影响机制可能与这15条差异表达基因有关系。
- 严林海李雷谢玉波肖强王长青
- 关键词：E2F-1基因表达谱芯片差异表达基因凋亡
- CDX2过表达在胃癌多药耐药中的功能研究
- 1 背景与目的 迄今为止，化疗仍是胃癌的主要治疗方法之一，但是在反复接触某种抗癌药物或化合物后，肿瘤细胞可以获得对该药物以及其他结构类似药物（作用机制不尽相同）的耐受性，即多药耐药性(MDR)。MDR是一个多基因参与、...
- 严林海
- 关键词：胃癌CDX2基因多药耐药动物模型
- 文献传递
- 过表达E2F-1的MGC-803细胞抗原致敏DC对胃癌细胞杀伤作用的体外实验研究
- 目的:通过研究人外周血单核细胞来源的树突状细胞(Dendritic Cells,DCs)的体外诱导扩增的改进方法、生物学特征及由转染过表达E2F-1的MGC-803细胞所制成的细胞抗原所引起的DCs介导的特异性CTL体外...
- 严林海
- 关键词：E2F-1细胞毒性T淋巴细胞免疫杀伤
- 文献传递
- 微小RNA miR-647/-593-5p/-1284与胃癌关系的研究
- 肖强谢玉波严林海韦尉元罗文曹稳珑张笑石
- 研究目的与意义：该课题拟通过检测和验证目的miR-647/-593-5p/-1284在胃癌组患者肿瘤织和血清中的表达，分析其与临床病理特征的关系，明确其在胃癌中的价值；预测和验证目的miRNAs的靶基因，并通过构建目的m...
- 关键词：
- 关键词：胃癌基因表达肿瘤治疗
- E2F-1过表达对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响及其机制
- 2014年
- 目的探讨E2F-1过表达对胃癌SGC-7901细胞增殖、生长和细胞周期的影响及其分子机制。方法采用携带E2F-1基因的重组慢病毒颗粒(LV-E2F-1-GFP)感染人胃癌SGC-7901细胞(LV-E2F-1-GFP组);以对照慢病毒颗粒(LV-GFP)感染人胃癌SGC-7901细胞作为阴性对照(LV-GFP组);空白对照组常规培养胃癌SGC-7901细胞,不作任何处理。分别采用CCK-8法检测细胞的增殖活力,流式细胞仪检测各组细胞周期的分布,RT-PCR和Western blot技术检测细胞中Skp2、Bax、Bcl-2、CylinD1和Survivin基因mRNA和蛋白的表达。结果与LV-GFP组和空白对照组比较,LV-E2F-1-GFP组人胃癌SGC-7901细胞增殖活力明显降低(P<0.05),G0/G1期所占比例上升(P<0.05),Skp2、Bcl-2、CylinD1和Survivin基因的mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),Bax基因的mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05),而LV-GFP组和空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢病毒介导E2F-1基因过表达抑制胃癌细胞增殖和生长,使细胞周期停滞在G0/G1期,其机制可能与E2F-1基因过表达使胃癌细胞Skp2、Survivin、Bcl-2、CylinD1基因表达下调和Bax基因表达上调有关。
- 曹稳珑韦尉元张笑石罗文严林海谢玉波肖强
- 关键词：胃癌SGC-7901细胞E2F-1过表达
- 过表达细胞周期相关转录因子1的MGC-803细胞抗原致敏树突状细胞对胃癌细胞的杀伤作用
- 2012年
- 目的观察过表达细胞周期相关转录因子1（E2F-1）的MGC-803稳定株所制成的细胞抗原所引起的树突状细胞（Dc）介导的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）体外杀伤胃癌MGC-803细胞的作用。方法用30阻g／L重组人白细胞介素4（rhlL-4）、100μg／L重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子（rhGM—CSF）、50μg／L重组人肿瘤坏死因子-γ（rhTNF—α）和100μg/L脂多糖（LPS）联合诱导健康人外周血单个核细胞成为DC，通过形态学及流式细胞仪对DC进行鉴定；实验分E2F-1组、NC组、MGC．803组和DC组，采用细胞计数试剂盒（CCK一8）法分别在DC：T为1：5、1：10、1：20、1：40时检测T淋巴细胞的增殖；采用乳酸脱氢酶（LDH）释放法在T淋巴细胞：MGC一803细胞分别为10：1、20：1、50：1时检测杀伤效果；用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测培养液中的干扰素（IFN）一叮的含量变化。结果形态学和流式细胞仪检测结果显示经诱导的DC细胞成熟特征明显，过表达E2F-1组T淋巴细胞增殖能力刺激指数（SI）值（4．42±0．23）高于空载体组（2，95±0．53）和空白对照组（3．014-0．68），差异有统计学意义（P〈0．05）；过表达E2F，1抗原致敏的DC诱导的CTL对胃癌MGC-803细胞株的杀伤率[（65．00±8．24）％]高于DC—CTL组[（45．25±7．89）％]、单纯MGC-803组[（41．83±4．79）％]、空载体组[（31．16±11．96）％]和空白对照组[（33．25±8．38）％]，差异有统计学意义（P〈0．05）；过表达E2F-1抗原组T淋巴细胞分泌IFN-1的量[（571．03±5．96）ng／L]高于空载体组[（382．85±4．94）ng／L]、MGC-803组[（390．13±7．06）ng／L]和DC组[（356．03±5．36）ng／L]，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论过表达E2F-1的MGC-803抗原致敏的DC在体外可增加T淋巴细胞的增殖，加强T淋巴细胞对MGC-803细胞的杀伤力。
- 严林海王晓通肖强
- 关键词：树突状细胞转录因子免疫杀伤干扰素-Γ
- 转录因子CDX2过表达对人胃癌SGC-7901细胞增殖和细胞周期的影响被引量：6
- 2014年
- 目的:探索CDX2过表达对人胃癌SGC-7901细胞增殖、生长和细胞周期的影响及其分子机制。方法:采用携带CDX2基因的重组慢病毒颗粒(LV-CDX2-GFP)感染SGC-7901细胞,作为实验组(LV-CDX2-GFP组);以对照慢病毒颗粒(LV-GFP)感染SGC-7901细胞,作为阴性对照组(LV-GFP组);空白对照组常规培养,不做任何处理。分别采用CCK-8法检测细胞的增殖活力,流式细胞术检测各组细胞周期的分布,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting技术检测细胞中CDX2、Bax、Bcl-2、cyclin D1和survivin mRNA和蛋白的表达。结果:与LV-GFP组和空白对照组比较,LV-CDX2-GFP组细胞增殖活力明显降低(P<0.05),G0/G1期所占比例上升(P<0.05),Bcl-2、cyclin D1和survivin mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),Bax mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05),而LV-GFP组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:慢病毒介导的CDX2过表达抑制胃癌细胞增殖和生长,使细胞周期停滞在G0/G1期,其机制可能与CDX2过表达使胃癌细胞Bcl-2、cyclin D1、survivin表达下调和Bax表达上调有关。
- 曹稳珑韦尉元张笑石罗文严林海谢玉波肖强
- 关键词：SGC-7901细胞
- 同源盒基因Cdx2对胃癌发生发展的影响
- 肖强谢玉波严林海王晓通韦尉元李雷曹稳珑
- 该课题组在国家自然科学基金的资助下，通过体外-体内实验，应用细胞和分子生物学、分子免疫学等方法，从细胞实验、动物实验和临床研究等三个不同角度，探讨了Cdx2基因在胃癌进展中的作用。通过对人胃癌组织中Cdx2 mRNA表达...
- 关键词：
- 关键词：胃癌临床病理基因表达动物实验
- 结直肠癌精准诊疗的分子基础和临床应用研究
- 唐卫中莫显伟覃宇周刘军杰钟华戈茹海明柳俊刚罗善山严林海陆绍
- 所属科学技术领域：属于医学应用基础领域
主要研究内容、发现点：
我国60%以上的结直肠癌（简称肠癌）患者首诊时病情已属中晚期，基于精准医学治疗概念的综合治疗已被引入欧美的治疗指南，并为国内很多临床医师接受。但肠癌成因...
- 关键词：
- 关键词：结直肠癌基因检测
- 慢病毒介导Cdx2基因过表达抑制人胃癌MGC-803细胞增殖的分子机制被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨Cdx2基因过表达对胃癌细胞周期凋亡相关基因Skp2、Survivin、Bcl-2和Bax表达的影响,及其抑制人胃癌MGC-803细胞增殖的分子机制。方法:利用携带Cdx2基因的重组慢病毒颗粒(LVCDX2-GFP)、空载体慢病毒颗粒(LV-GFP)感染人胃癌MGC-803细胞,分别作为实验组(LV-CDX2-GFP)、阴性对照组(LV-GFP),未转染处理的人胃癌MGC-803细胞作为空白对照组,以上三组细胞按照常规培养,应用RT-PCR和Westren blot技术检测细胞中Skp2、Bax、Bcl-2以及Survivin基因的mRNA和蛋白的表达。结果:与LV-GFP组和空白对照组比较,LV-Cdx2-GFP组人胃癌MGC-803细胞Skp2、Bcl-2和Survivin基因的mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),Bax基因的mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05),而LV-GFP组和空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:慢病毒介导Cdx2基因过表达抑制人胃癌MGC-803细胞增殖,其分子机制可能通过Cdx2调控Skp2、Survivin、Bcl-2和Bax基因表达,进而启动下游相关信号通路有关。
- 张笑石韦尉元罗文曹稳珑严林海谢玉波肖强
- 关键词：MGC-803细胞CDX2过表达
