丛佩清
- 作品数:37 被引量:27H指数:2
- 供职机构:中山大学更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 一种提高猪克隆胚胎体外发育效率的方法
- 本发明具体公开了一种提高猪克隆胚胎体外发育效率的方法。本发明对骨髓来源的间充质干细胞进行了分子鉴定,建立了通过6通道流式技术利用少量细胞即可鉴定细胞纯度的方法;然后对猪骨髓间充质干细胞进行基因修饰,获得了表达多种重编程因...
- 宋振威丛佩清冀倩倩赵海静何祖勇陈瑶生
- 文献传递
- 一种制备CD44基因缺陷小鼠诱导多能干细胞的方法
- 本发明具体公开了一种高效制备CD44基因缺陷小鼠诱导多能干细胞(IPSC)的方法。本发明首先利用TSA对小鼠成纤维细胞(MEF)进行预处理,然后再对MEF进行诱导重编程,IPSC的效率可以随着TSA的浓度升高而被提高。在...
- 宋振威冀倩倩赵海静聂宇丛佩清陈瑶生
- 文献传递
- 一种用于单碱基编辑的gRNA、载体、细胞及其制备方法
- 本发明公开了一种用于单碱基编辑的gRNA,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用该gRNA,将IGF2基因相应位点的胞嘧啶突变为胸腺嘧啶,解除ZBED6对IGF2表达的抑制作用,提高产肉量。
- 何祖勇陈瑶生刘小红曾检华莫德林丛佩清刘小凤李瑞强
- 文献传递
- 一种通过延迟基因的表达时间来提高猪瘦肉产量的方法
- 本发明公开了一种通过延迟基因的表达时间来提高猪瘦肉产量的方法,具体为通过推迟猪胚胎早期成肌决定基因MyoD表达时间,使得胚胎早期初级肌纤维形成时间推后,增加肌纤维总数,从而提高出生后产肉量(瘦肉产量)。本发明首先研究发现...
- 莫德林张续勐陈瑶生刘小红何祖勇丛佩清邱柏钦郭慈琳
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- 转基因猪细胞中CMV启动子区域甲基化的研究
- 2015年
- 为研究转基因猪外源基因表达与启动子区域甲基化的关系,利用流式细胞仪检测体外传代至第5、10和15代的转基因猪成纤维细胞中EGFP荧光强度的变化情况;采用亚硫酸盐测序的方法对这3代细胞CMV IE启动子区域30个Cp G岛的甲基化程度进行测定。结果显示细胞从第5代培养到第10代时荧光变弱,但是当继续培养到15代时EGFP荧光又渐渐变强,但EGFP阳性细胞的比例没有发生变化,均为100%。第5、10、15代细胞启动子区域的Cp G岛甲基化阳性率分别为3.64%±1.25、2.97%±1.03和1.65%±0.74,统计结果表明3代细胞间的甲基化阳性率差异不显著(P>0.05)。表明转基猪成纤维细胞中CMV启动子区域的甲基化程度随着体外培养时间的变化不明显,与EGFP的表达水平变化无明显相关。
- 任广彩张英丛佩清陈瑶生何祖勇
- 关键词:甲基化启动子CPG岛转基因猪
- 利用ZFN敲除转基因猪细胞中多拷贝EGFP基因
- 2014年
- 锌指核酸酶(zinc finger nuclease,ZFN)是由特异性识别DNA的锌指结构域和Fok I切割结构域组成,能够在基因组特定位点上切割DNA,引起DNA双链断裂(double-strand break,DSB).通过DSB修复机制,可以使基因修饰的效率比传统方法提高102~104倍.目前,利用ZFN对动物内源基因进行敲除的研究较多,但对转基因动物中外源多拷贝基因进行敲除的报道较少.本研究首先利用荧光定量PCR法对本实验室培育的两头转基因猪中增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的拷贝数进行鉴定,发现其拷贝数分别为11.95和17.36拷贝;然后将靶向EGFP的一对ZFN转染进拷贝数为17.36的EGFP转基因猪的成纤维细胞中,并通过流式和CEL-1酶切方法检测敲除效率.结果表明,转染400 ng、800 ng和1 200 ng ZFN的切割效率分别为0.97%、1.39%和1.76%,可见随着转染ZFN剂量的增加,ZFN的切割效率逐渐提高.但是,不发绿色荧光的细胞比例却没有明显提高,因此认为,ZFN敲除转基因动物中多拷贝基因的效率还是比较低.
- 任广彩张英丛佩清陈瑶生何祖勇
- 关键词:锌指核酸酶增强型绿色荧光蛋白转基因猪
- 2c-mos基因在猪的体细胞克隆中的作用研究
- 蔡青青丛佩清陈瑶生
- 一种木聚糖酶基因xynB及其表达载体和应用
- 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种木聚糖酶基因xynB及其表达载体和应用,要解决的是现有技术中xynB基因表达量低的问题。本发明提供一种木聚糖酶基因xynB,其核苷酸序列如SEQIDNO:1或SEQIDNO:2所示。一...
- 何祖勇陈瑶生冯涛刘志国丛佩清莫德林
- 文献传递
- 两种密码子优化方式对木聚糖酶基因xynB在哺乳动物细胞中表达水平的影响
- 究通过“一种氨基酸对应一种最高频率密码子”以及“人源化密码子”两种优化方式将木聚糖酶基因xyn8的密码子优化为哺乳动物常用密码子,并在蛋白C端融合增强型绿色荧光蛋白作为标签,通过GFP报告系统测定其在哺乳动物细胞中的表达...
- 刘志国陈瑶生黄源凯丛佩清何祖勇
- 关键词:密码子哺乳动物细胞表达流式细胞术木聚糖酶基因
- 透明带损伤对胚胎感染PCV2的影响
- 赵海静冀倩倩宋振威丛佩清陈瑶生
- 关键词:PCV2透明带