丁丽娜
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：昆明理工大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域：生物学冶金工程更多>>
- PCR-DGGE技术分析浸矿体系细菌群落结构的实验优化
- 2012年
- 为了研究低品位黄铜矿细菌搅拌浸出的浸矿菌液中的细菌群落结构,对PCR-DGGE(变性梯度凝胶电泳)技术相关的实验方法进行了优化,主要涉及低丰度基因组DNA提取方法优化、16S rRNA基因的PCR扩增条件优化以及变性梯度凝胶电泳条件的优化.结果表明,采用分级离心多次浓缩的方法收集矿浆样品中的菌体,再用试剂盒提取基因组DNA,有较好效果;使用含特定"GC夹板"的引物5'-CGCCCGCCGCGCCCCGCGCCCGTCCCGCCGCCCCCGCCCG-3'进行热启动降落PCR,能显著提高目的条带的PCR扩增效率;当DGGE电泳设置温度为60℃左右,胶浓度为6%,尿素变性梯度为30%～50%,恒定电压为100 V,时间为9 h时,可以获得效果较好的DGGE电泳图谱,该优化方案提高了对浸矿体系中细菌群落结构的检测效果.
- 林连兵张兰兰丁丽娜季秀玲魏云林
- 关键词：16SRRNA基因
- 深黄被孢霉的低温适应性及D12D基因RNAi表达载体的构建
- 被孢霉属(Mortierella)是目前国内外研究亚油酸(Linoleic Acid, LA)和γ-亚麻酸(γ-Linolenic, GLA)等多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acids, P...
- 丁丽娜
- 关键词：深黄被孢霉
- 文献传递
- 深黄被孢霉Δ^(12)-脂肪酸脱氢酶基因RNAi表达载体的构建被引量：1
- 2012年
- 深黄被孢霉是国内研究生产γ-亚麻酸(γ-linolenic acid,GLA)和花生四烯酸(Arachidonic acid,AA)等多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acid,PUFA)的主要产油丝状真菌.前期的实验结果表明,深黄被孢霉M6-22具有潮霉素抗性,而且目前也没有关于深黄被孢霉营养缺陷型菌株的报道,限制了一些基于深黄被孢霉菌株进行遗传操作的研究.研究以红色荧光蛋白DsRED基因作为报告基因,构建能同时用于丝状真菌外源基因和RNAi表达载体pS-DsRED.通过PEG/CaCl2原生质体转化法将pS-DsRED导入深黄被孢霉M6-22中进行表达,成功获得产粉红色的阳性菌落,并在此基础上构建了深黄被孢霉Δ12-脂肪酸脱氢酶基因RNAi表达质粒pSREDMID12RNAi,为下一步目的基因的敲除和基因功能分析奠定了基础.
- 丁丽娜胡彬彬林连兵季秀玲魏云林张琦
- 关键词：深黄被孢霉
