- E.coliRecQ解旋酶克隆表达纯化及生物学活性检测被引量：4
- 2013年
- RecQ解旋酶是生物分子代谢过程中重要的大分子物质,对保持遗传物质的稳定性具有重要作用。通过PCR从E.coli DH5α菌株的基因组中扩增出E.coli RecQ基因并克隆入原核表达载体pET24a(+)中,转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,目的蛋白主要以可溶形式存在于菌体中。优化表达条件后,经镍柱螯合亲和层析纯化获得纯度大于90%的目标蛋白质,应用生物化学和生物物理学技术研究E.coli RecQ解旋酶的生物学活性。结果表明,E.coli RecQ解旋酶具有DNA依赖性和蛋白浓度依赖性的ATP水解活性。在等蛋白质浓度下,E.coli RecQ酶结合DNA活性强弱依次为开叉dsDNA,ssDNA,平末端dsDNA。其还具有ATP依赖的dsDNA解链活性和时间依赖的DNA退火活性。实验为RecQ解旋酶家族其他重要成员的活性功能研究提供了理论依据和重要参考。
- 黄振蓉吴海丽张三军杜冰钱旻任华
- 关键词：蛋白表达蛋白纯化生物学活性
- 枯草杆菌RecQ解旋酶结构与生化功能研究
- RecQ解旋酶为SF2亚家族DNA解旋酶中一个重要家族,其广泛存在于几乎所有生物体中,具有高度保守性。它是机体分子代谢途径中重要的调控蛋白,主要参与DNA复制、DNA修复、重组、转录甚至端粒稳定等分子代谢过程,对保持遗传...
- 黄振蓉
- 关键词：锌指结构生化活性
- 文献传递
