黄志斌
- 作品数:8 被引量:12H指数:2
- 供职机构:深圳职业技术学院应用化学与生物技术学院更多>>
- 发文基金:广东省教育部产学研结合项目深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 重组人干扰素βla基因、其表达载体和重组人干扰素βla的制备方法
- 本发明公开了一种重组人干扰素β1a基因、其表达载体和重组人干扰素β1a的制备方法。重组人干扰素β1a基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,通过将重组人干扰素β1a基因与质粒pSV2-dhfr连接构建质粒表达载体,...
- 王妍党建章黄志立黄志斌张丽君
- 重组人干扰素β表达体系及其适应证的研究进展被引量:4
- 2011年
- 干扰素β(Interferon β,IFNβ)具有抗病毒、抗增殖及免疫调节活性等生物学功能。重组人干扰素β(rhIFNβ)产品在临床上的应用极为广泛,但国内目前尚无自主研制的rhIFNβ药物上市。有两项临床研究为以大肠杆菌为表达体系,国内目前正在进行用CHO细胞表达rhIFNβ1a的研究。本文对rhIFNβ的生物活性、结构、表达体系、临床治疗多发性硬化症(Multiple selerosis,MS)及新增适应证作一综述。
- 黄志斌党建章王妍
- 关键词:干扰素Β多发性硬化适应证
- 生物反应器培养分泌重组人干扰素β1a的CHO细胞工艺的建立被引量:2
- 2013年
- 目的建立生物反应器培养分泌重组人干扰素β1a(IFNβ1a)的CHO细胞的工艺,探讨CHO细胞表达分泌IFNβ1a的反应动力学规律。方法应用15 L生物反应器悬浮微载体方式培养CHO工程细胞,比较不同时期细胞的生长形态、数量、生物活性、灌流量、葡萄糖消耗量及其他物理参数的变化规律。结果 15 L生物反应器中在初始pH 6.86~7.20,溶氧30%~70%,温度36.8~37.2℃,微载体4 g/L,罐流量6.5 L/h的条件下连续培养40 d,CHO工程细胞的密度维持在5×105个/ml之间,收获的细胞液中重组人IFNβ1a的生物活性为2.5×104~4.0×105IU/ml,葡萄糖消耗量在0.5~2.5 mg/ml之间。结论初步建立了15 L生物反应器培养分泌重组人IFNβ1a的CHO细胞的工艺,为进一步建立工业化生产工艺奠定了基础。
- 王妍张丽君黄志斌张英梁雯荻
- 关键词:生物反应器微载体中国仓鼠卵巢细胞无血清培养基
- 盐酸水解橄榄苦苷粗提物制备羟基酪醇被引量:2
- 2011年
- 目的:建立测定羟基酪醇含量的高效液相色谱法,考察盐酸水解橄榄苦苷粗提物制备羟基酪醇。方法:采用正交实验,对橄榄苦苷粗提物的水解工艺条件进行考察;以HPLC检测羟基酪醇的含量。结果:最佳水解工艺为:盐酸浓度0.5 mol/L,水解时间15 min,水解温度105℃,料液比1/30,水解后相对于橄榄苦苷的转化率为56.3%,大样经粗提取后羟基酪醇纯度4.6%。结论:该法工艺简单,经济实用,为进一步提高羟基酪醇纯度奠定基础,并为工业化生产羟基酪醇开辟了一条新途径。
- 党建章侯金星黄志斌代建国金刚张燕
- 关键词:水解
- A、C、Y、W135四群脑膜炎球菌发酵罐培养工艺的研究被引量:4
- 2010年
- 目的利用40L发酵罐分别培养四群流行性脑膜炎奈瑟球菌(简称脑膜炎球菌)A、C、Y和W135;优化和比较四种菌的发酵工艺,为开发四价脑膜炎疫苗提供工艺技术。方法通过培养基组成、发酵时间、发酵中补料的形式和补料量,以及搅拌速度、接种密度等培养动力学的研究,比较四种菌培养特性的相同和差异。结果四群流脑球菌的培养特性基本相同,达到最高培养密度的时间及菌体收获率分别为,A和Y群在接种后11 h,收获率均为40%;C群在10 h,收获率30%;W135群在9 h收获率为25%。每种菌对于营养的要求基本相同但在发酵动力学上的差异使补料有所区别。结论发酵罐中采用完全培养基培养,并设定良好的培养条件,及时补充碳源,有利于脑膜炎球菌生长,提高了四价脑膜炎疫苗的产量和质量。
- 李云富王妍黄志立张水华黄志斌
- 关键词:脑膜炎球菌发酵工艺收获率
- 电池自动分类回收器
- 本实用新型实施例涉及一种电池自动分类回收器,可通过滑槽对不同规格的电池进行分类筛选,并将一定规格的电池自动分配到对应的电池回收槽内,所述滑槽分为若干内径以筛选对应规格电池设置的筛选段,滑槽底部及每个筛选段的底部一侧设置有...
- 廖强华罗志海黄志斌
- 文献传递
- 重组人干扰素β1a的纯化及其理化性质被引量:1
- 2013年
- 目的纯化重组人干扰素β1a(recombinant human interferonβ1a,rhIFNβ1a),并分析其理化性质。方法应用15 L生物反应器悬浮微载体培养表达rhIFNβ1a的重组CHO细胞,细胞培养收获液经超滤浓缩、蓝胶亲和层析、脱盐和CM离子交换层析纯化后,采用水泡性口炎病毒抑制法测定rhIFNβ1a的效价;Lowry法测定蛋白含量;等电聚焦电泳法测定其等电点;SDS-PAGE和高效液相色谱法测定其纯度;Western blot法分析其免疫活性;SDS-PAGE和质谱仪测定其相对分子质量;圆二色谱法分析其二级结构。结果共纯化了3批样品,纯化的rhIFNβ1a平均蛋白浓度为0.284 0 mg/ml,平均比活可达1.06×108IU/mg,纯度达95%以上,蛋白质平均回收率为58.36%,蛋白质相对分子质量为20 445.0,等电点约为6.6,免疫活性良好,二级结构与国家标准品基本一致。结论成功纯化了rhIFNβ1a,并检测了其理化性质,为建立大规模制备rhIFNβ1a的生产工艺和制造检定规程,实现产业化奠定了基础。
- 李柳萍杨胥微黄志斌喇文军王妍
- 关键词:中国仓鼠卵巢细胞纯化生物活性
- 重组人干扰素β1a基因、其表达载体和重组人干扰素β1a的制备方法
- 本发明公开了一种重组人干扰素β1a基因、其表达载体和重组人干扰素β1a的制备方法。重组人干扰素β1a基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,通过将重组人干扰素β1a基因与质粒pSV2-dhfr连接构建质粒表达载体,...
- 王妍党建章黄志立黄志斌张丽君
- 文献传递