魏宇佳
- 作品数:6 被引量:26H指数:4
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:山东省医药卫生科技发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 免疫磁珠法分离、培养人脑胶质瘤干细胞被引量:9
- 2008年
- 目的建立免疫磁珠法分离,并培养人脑胶质瘤干细胞的方法。方法将术中取得的脑胶质瘤标本,通过剪切、消化和吹打成单细胞悬液,筛网过滤,免疫磁珠分选试剂盒分选出CD133+细胞,用神经干细胞无血清培养法培养出具有单细胞克隆能力的细胞球,取第3代进行诱导分化,分化前后用免疫细胞荧光化学方法鉴定肿瘤干细胞及分化后细胞。结果免疫磁珠分选出的CD133+细胞,可悬浮生长并形成神经干细胞样细胞球,有较强的增殖能力,干细胞标志物巢蛋白(nestin)阳性,分化后细胞表达神经元小管相关蛋白-β3(-βtubulin 3)和星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白质(GFAP)特异性抗原,而巢蛋白、CD133阴性,并具有肿瘤的核型。结论免疫磁珠分选法可避免原代培养中众多细胞混杂生长的发生,能够从大量肿瘤细胞中分离出只占极少比例的肿瘤干细胞,细胞结合磁珠后在体外可以长期培养和传代,进一步证实了肿瘤干细胞的存在,并为胶质瘤干细胞的研究奠定基础。
- 魏宇佳赵洪洋姜晓兵靳峰
- 关键词:肿瘤干细胞胶质瘤细胞分选
- 胶质瘤U251细胞及其干细胞抗凋亡与多重耐药基因的关系被引量:2
- 2009年
- 目的利用培养成功的U251胶质瘤干细胞,探讨其抗凋亡和耐药基因的表达差异。方法WST-8法检测胶质瘤干细胞增殖活性,实时荧光定量RT-PCR技术检测Livin、Livinα、Livinβ、Survivin和MRP1、MRP3 mRNA的表达。结果单层培养的U251细胞比胶质瘤干细胞表现出更强的增殖活性;U251胶质瘤干细胞Livin、Livinα、Livinβ、Survivin和MRP-1 mRNA表达量较U251单层培养细胞表达量都有不同程度的升高,而MRP-3 mRNA表达量降低。结论U251胶质瘤干细胞抗凋亡和MRP-1 mRNA表达量较U251单层培养细胞表达量有不同程度的升高,提示胶质瘤干细胞比较其同源的肿瘤细胞具有更强的耐药性,这可能是肿瘤耐药的机制。
- 靳峰张军臣孔令胜魏宇佳郭强邵彤冯军姜晓兵赵洪洋
- 关键词:胶质瘤胶质瘤干细胞凋亡耐药
- 胶质瘤干细胞抗凋亡和多重耐药基因的表达被引量:5
- 2010年
- 目的从人脑胶质瘤组织中分离、培养胶质瘤干细胞,并探讨其生物学特性及其抗凋亡和多重耐药基因的表达差异。方法人脑胶质瘤组织经过原代细胞培养后,用无血清培养方法获得胶质瘤干细胞球,用10%的胎牛血清培养诱导分化,分化前后分别做nestin、tubulin—β、GFAP免疫细胞化学荧光染色,并观察胶质瘤干细胞形态学改变。同时,应用实时荧光定量PCR技术检测livin,livinm,livinβ,survivin,MRP1和MRP3 mRNA的表达。结果有2例分离培养出干细胞球体,这些球体具有典型的干细胞特性,nestin染色为阳性;在无血清培养基中呈悬浮球样生长,能够自我更新和增殖,在有血清培养基中能够分化,tubulin-β、GFAP染色为阳性。胶质瘤干细胞球livin、livinα、livinβ、survivin和MRP-1 mRNA表达量比较胶质瘤组织表达量都有不同程度的升高,而MRP-3 mRNA表达量降低。结论胶质瘤干细胞抗凋亡和MRP-1基因表达量较胶质瘤表达量有不同程度的升高,提示胶质瘤干细胞比较其同源的胶质瘤细胞具有更强的耐药性,这可能是肿瘤耐药的机制。
- 靳峰赵万巨魏宇佳张浩张军臣高超郭强邵彤陈德勤赵洪洋
- 关键词:神经胶质瘤胶质瘤干细胞凋亡耐药
- 重型脑室出血患者的手术时机选择研究被引量:5
- 2007年
- 目的:探讨脑室穿刺引流并脑脊液置换术治疗重型脑室出血的最佳手术时机。方法:48例重型脑室出血患者随机分为超早期组(A组)、急性期组(B组)和亚急性期组(C组),按照不同的时间点行双侧脑室穿刺引流术后,分别在入选时和治疗后1个月末进行改良Barthel指数评分,治疗满1个月时记录患者的基本痊愈率、总有效率、病死率和再出血发生率。结果:治疗后A、B组Barthel指数评分、基本痊愈率、总有效率均高于C组,而死亡率低于C组(P<0.01);A、B两组的基本痊愈率、总有效率、死亡率无明显差异(P>0.05)。A、B和C3组的再出血发生率无明显不同(P>0.05)。结论:重型脑室出血患者在24h内行脑室穿刺引流并脑脊液置换术可以有效地降低病死率、致残率,提高治愈率和日常生活能力。
- 靳峰郭守刚赵洪洋冯军魏宇佳种衍军赵甲山
- 关键词:重型脑室出血微创手术手术时机
- 免疫磁珠法分离、培养人脑胶质瘤干细胞
- 目的:建立免疫磁珠法分离并培养人脑胶质瘤干细胞的方法。
方法:将术中取得的脑胶质瘤标本,在严格无菌的条件下,去除血管及坏死的肿瘤组织,通过反复剪切、消化和吹打成单细胞悬液,200 目筛网过滤,免疫磁珠分选试剂盒...
- 魏宇佳
- 关键词:免疫磁珠法脑胶质瘤原代培养肿瘤干细胞星形胶质细胞
- 文献传递
- 胶质瘤TJ905细胞及其干细胞抗凋亡与MRP基因的关系被引量:5
- 2008年
- 目的从人脑胶质瘤细胞TJ905中分离、培养肿瘤干细胞,并探讨其生物学特性及其抗凋亡和耐药基因的表达差异。方法TJ905细胞经免疫磁珠分离获取CD133^+细胞,用无血清培养方法获得肿瘤干细胞球,用含有10%的胎牛血清培养基诱导分化,分化前后分别做兔抗人巢蛋白抗体(nestin)、鼠抗人微小管相关蛋白p(tubulin-β)、兔抗人胶质纤维酸性蛋白质(GFAP)、免疫细胞化学荧光染色,WST-8检测干细胞增殖活性,应用实时荧光定量RT-PCR技术检测Livin、Livinα、Livinβ、生存素和MRP1、MRP3的表达,并观察肿瘤干细胞形态学改变。结果TJ905细胞中含有少量CD133^+细胞,约为0.21%,这些细胞具有典型的干细胞特性,nestin染色为阳性;在无血清培养基中呈悬浮球样生长,能够自我更新和增殖,在有血清培养基中能够分化,tubulin-β、GFAP染色为阳性。TJ905干细胞球Livin、Livinα、Livinβ、生存素和MRP-1、MRP-3mRNA表达量较TJ905单层培养细胞表达量都有不同程度的降低。结论TJg05细胞中含有少量肿瘤干细胞,TJ905干细胞球抗凋亡和MRP基因表达量较TJ905单层培养细胞表达量都有不同程度的降低,提示肿瘤干细胞在肿瘤耐药机制中发挥的作用不尽相同,也不总是造成肿瘤耐药的惟一因素。
- 靳峰李洪生赵雷魏宇佳张浩郭远瑾庞然姜晓兵赵洪洋
- 关键词:神经胶质瘤肿瘤干细胞凋亡耐药