高立
- 作品数：89 被引量：200H指数：9
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生天文地球更多>>
- 鸡传染性法氏囊病病毒VP5缺失标记疫苗的生物学特性研究被引量：2
- 2014年
- 为评价鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP5缺失病毒株rHLJ0504HT△VP5的生物学特性,本研究首先对该缺失病毒与其亲本病毒rHLJ0504HT(vvIBDV HLJ0504 253/284双位点突变细胞适应病毒)进行了体外复制动力学比较研究。结果表明,VP5缺失病毒复制滴度明显低于亲本病毒(p<0.05)。动物实验结果表明,该缺失病毒可以诱导机体产生良好的免疫应答反应,免疫后10 d,其抗体水平与亲本病毒相当;并能够抵抗同源或异源超强毒的攻击,为免疫鸡提供100%保护。此外,该缺失病毒对免疫鸡无明显的致病性;VP5缺失病毒免疫组与未免疫组禽流感血凝抑制效价相当,不存在明显差异(p>0.05),表明该病毒对免疫鸡无免疫抑制作用,不影响其它疫苗的免疫效果。而且,VP5的缺失可以作为鉴定该缺失病毒的生物学标记。以上结果表明,rHLJ0504HT△VP5是一株安全有效的IBDV标记候选疫苗株。
- 高立李凯祁小乐高玉龙高宏雷王永强孔宪刚王笑梅
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒标记疫苗
- 鸡传染性法氏囊病病毒重组弱毒疫苗株及其应用
- 本发明公开了鸡传染性法氏囊病病毒重组弱毒疫苗株及其应用。本发明克隆了流行超强毒株HLJ-0504的主要保护性抗原基因VP2，将其核苷酸进行突变修饰，然后将其替换IBDV弱毒株Gt基因组的相应区段，构建IBDV重组基因组的...
- 王笑梅祁小乐高玉龙高宏雷秦立廷王永强高立
- 血清Ⅱ型鸡马立克氏病毒的分离鉴定及SW14分离株pp24基因的序列分析
- 2023年
- 为了解鸡马立克氏病毒(MDV)在我国鸡群中的流行情况,本研究于2021年从福建省已免疫鸡马立克氏病(MD)疫苗鸡群且发生疑似MD病例的鸡场采集21份疑似发病蛋鸡外周血,分离其淋巴细胞接种鸡胚成纤维细胞(CEF),5 d后收集病毒,盲传1~2代后获得21株能够形成典型MDV蚀斑的分离株,依次命名SW1~SW21,采用PCR分别扩增MDV血清Ⅰ型(MDV-1) Meq基因、Ⅱ型(MDV-2) ORF873基因、Ⅲ型(MDV-3) US3基因进行MDV分型鉴定,扩增鸡传染性贫血病毒(CAV) VP3基因、禽网状内皮组织增殖病病毒(REV) LTR基因、禽白血病病毒A亚群(ALV-A)、B亚群(ALV-B)、J亚群(ALV-J)的env基因进行外源病毒检测,结果显示MDV-1均为阴性,MDV-2均为阳性,MDV-3阳性率为38.1%(8/21),未检测到外源病毒基因。在MDV-2分离株中选择SW14株进行pp24基因的PCR扩增,测序后与MDV-2参考株SB-1、301B/1、HPRS24的pp24基因进行基因序列比对分析,结果显示,SW14和SB-1株同源性(96.3%)最高。通过透射电镜观察SW14,可见分离株呈双环型,直径约110 nm,符合MDV病毒粒子形态特征。本研究证实该鸡场中存在MDV-2流行,可能会影响疫苗的免疫效果,但其致病性有待进一步研究。本研究从疑似发病蛋鸡中分离到新的MDV-2株,为我国MDV-2的研究提供重要参考依据,同时为我国MD疫情防控提供有价值的研究材料。
- 林雨萌胡明雪刘长军葛成菲郭榕容李凯崔红玉高立祁小乐王素艳王笑梅高玉龙张艳萍
- 表达传染性法氏囊病毒VP2基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种表达传染性法氏囊病毒VP2基因的重组鸡马立克氏病病毒疫苗株及其构建方法和应用，属于医学或兽医学技术领域。本发明利用重组克隆技术，将包含传染性法氏囊病毒VP2基因和CAG启动子序列的基因片段CAG-VP2插...
- 王笑梅李凯刘长军张艳萍崔红玉祁小乐高立高玉龙王永强高宏雷
- 文献传递
- 新型鸭呼肠孤病毒的分离鉴定及其σC基因遗传进化分析被引量：9
- 2020年
- 新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)病,是一种以肝脾不规则坏死、出血斑/点和心肌、腔上囊出血为主要特征的新疫病。为研究某养鸭企业不同年份分离的NDRV病株的生物学特性,本研究将2019年从25份樱桃谷鸭脏器组织中分离的3株病毒以及2016年和2017年分离的2株病毒同时进行了生物学特性比较研究。RT-PCR及基因测序结果表明,该5株分离病毒均为NDRV,且纯净性良好。体外复制研究表明,该5株分离病毒均能100%致死鸡胚,且在Vero细胞中增殖良好;除2017年的分离株外,其余4株分离病毒均能在CEF中产生明显的细胞病变。σC基因同源性及遗传进化分析显示,5株NDRV分离株与其它NDRV病毒株之间具有较高的同源性(90.0%~98.2%),而与番鸭呼肠孤病毒(MDRV)同源性较低(29.6%~46.1%),再次证明5株分离病毒均为NDRV,但2017年分离株NDRV-SD19/6202与其余4株病毒的遗传距离稍远。σC基因编码氨基酸序列分析结果显示,以CEF适应病毒为代表的NDRV-SD19/6201株与CEF非适应病毒NDRV-SD19/6202株之间存在13个氨基酸差异位点,但这些差异位点是否是引起两株病毒复制特性差异的关键氨基酸还需要进一步研究。综上,本研究结果表明来源于同一养殖企业不同年份分离的NDRV病毒株之间生物学特性存在一定差异,提示持续开展该病流行病学调查的必要性,同时为了解NDRV的遗传进化特征和基因变异情况提供参考。
- 罗丹高立孟照洁高玉龙李凯祁小乐刘长军崔红玉王笑梅
- 关键词：新型鸭呼肠孤病毒遗传进化
- 蛋鸡感染传染性法氏囊病病毒新型变异株的鉴定被引量：10
- 2020年
- 传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)新型变异株正在成为养禽业健康发展新的重要威胁。目前报道的IBDV新型变异株均来自肉鸡群的感染。为了解IBDV新型变异株感染蛋鸡的情况,通过对黑龙江省一个疑似非典型IBD发病蛋鸡群样品进行RT-PCR检测及相关分析,结果显示,引起该鸡群非典型IBD的病原是IBDV新型变异株。这是蛋鸡感染IBDV新型变异株的首次报道,对于更全面了解IBDV新型变异株的流行态势具有重要意义。
- 王雨龙范林进姜楠高玉龙李凯李凯刘长军高立潘青刘长军崔红玉祁小乐
- 关键词：传染性法氏囊病病毒蛋鸡
- MDCC-MSB1细胞酵母双杂交cDNA表达文库的构建与鉴定被引量：5
- 2013年
- 提取生长状态良好的MDCC-MSB1细胞的mRNA,以5′端标记有生物素的Oligo dT primer为引物反转录,合成双链后连接Adapter。分级纯化后,通过BP重组反应构建入门文库,滴度为1×105 CFU/mL,文库总容量为1.1×106 CFU,平均插入片段长度为1190bp,阳性重组率为100%。入门文库扩增后提取质粒,通过LR重组反应转化为表达文库,平均滴度为1×105 CFU/mL,文库总容量为1.2×106 CFU,平均插入片段长度为1087bp,重组率为100%。构建的表达文库具有较高的质量,为研究鸡传染性贫血病毒的受体及其细胞嗜性奠定了基础。
- 崔鹏鹏高宏雷李凯高立高玉龙祁小乐王笑梅
- 关键词：CDNA文库鸡传染性贫血酵母双杂交
- 禽重要免疫抑制病防控关键技术创制写应用被引量：1
- 2019年
- 我国家禽年饲养量超过100亿只,养禽业已成为“乡村振兴战略”跨入新时代的重要支柱。然而,传染性法氏囊病(IBD),马立克氏病(MD)、禽白血病(AL)等重要禽病毒性免疫抑制病严重威胁养禽业的健康发展。禽免疫抑制病常呈混合感染,IBD民间俗称鸡的“艾滋病”,MD是禽类最重要的肿瘤病,AL同时还是重要的种源性遗传病,在我国广泛流行,导致大型种禽场倒闭,给我国养禽业造成严重危害,同时也严重威胁我国家禽品种安全,是国家指定优先防治的重要禽病。
- 王笑梅高玉龙高玉龙祁小乐刘长军高宏雷祁小乐王牟平张艳萍张连祥高宏雷
- 关键词：病毒性免疫抑制病家禽传染性法氏囊病马立克氏病养禽业
- 马立克氏病病毒弱毒疫苗814株的反向遗传操作系统及其在病毒拯救中的应用
- 本发明公开了一种马立克氏病病毒弱毒疫苗814株的反向遗传操作系统及其在病毒拯救中的应用。本发明通过将马立克氏病病毒弱毒疫苗814株的基因组剪切后分段克隆入Fosmid粘粒载体pCC1Fos，构建了814疫苗株基因组Fos...
- 李凯刘长军王笑梅张艳萍高玉龙崔红玉高立
- 文献传递
- 传染性法氏囊病病毒超强毒株HLJ-0504全基因组克隆及其新特征分析被引量：11
- 2010年
- 为了解传染性法氏囊病病毒(IBDV)HLJ-0504株的分子生物学特征,本研究利用融合PCR技术获得HLJ-0504株全基因组序列。核苷酸和推导氨基酸序列遗传演化分析发现,HLJ-0504A节段位于IBDV超强毒的分枝上,而B节段则介于超强毒株和减毒株之间,形成一个独立分枝,属于一株新的自然重组病毒。VP2抗原性预测分析表明,HLJ-0504株VP2第Ⅰ亲水区中的氨基酸发生突变(D212N),该突变可能导致了HLJ-0504株抗原性发生漂变。本实验结果为深入研究IBDV的分子特征奠定了基础。
- 高立祁小乐高玉龙高宏雷秦立廷邓小芸宇文延青王笑梅
- 关键词：全基因组
