高倩
- 作品数：69 被引量：177H指数：7
- 供职机构：昆明医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金云南省教育厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 个旧矿粉诱导的支气管上皮转化细胞cDNA消减文库的构建
- 2009年
- 目的构建永生化人支气管上皮细胞BEAS-2B与其受个旧矿粉体外诱导的恶性转化细胞之间差异表达的cDNA消减文库。方法以BEAS-2B为对照组，以采自个旧井下作业面的矿粉为染毒物在体外成功诱导的恶性转化细胞为实验组，分别提取总RNA；应用SMARTcDNA合成技术，获得充足的dscDNA；应用抑制性消减杂交（SSH）技术分离BEAS-2B与其恶性转化细胞之间差异表达的基因片段；再通过T／A克隆和蓝白筛选实验，克隆BEAS-2B与其恶性转化细胞之间差异表达的基因片段，构建二者之间差异表达的cDNA消减文库。结果通过SSH和T／A克隆等技术成功构建了具有较高消减效率的BEAS-2B与其恶性转化细胞之间差异表达的cDNA消减文库，文库经扩增后得到107个白色克隆和41个蓝色克隆。结论应用SSH技术成功构建了具有较高消减效率的BEAS-2B与其恶性转化细胞之间差异表达的cDNA消减文库，为进一步研究个旧矿粉致肺癌发生的分子生物学机制奠定了基础。
- 梁锐金克炜王志强高倩阮永华王芳
- 关键词：抑制性消减杂交支气管上皮细胞恶性转化
- 云锡矿工非小细胞肺癌形态计量和DNA定量检测研究被引量：5
- 1997年
- 对云南锡矿矿工（Ｍ组）、其它地区非矿工（ＮＭ组）非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）不同病变阶段及正常对照（Ｃ组）细胞进行形态计量和ＤＮＡ定量测定比较研究，采用ＣＭＩＡＳ－００７型多功能真彩色病理图像分析仪，选择１６项几何学参数，结合ＤＮＡ含量五项指标对Ｍ、ＮＭ组进行动态观察。结果表明：１云锡矿工和其它地区非矿工ＩＮＳＣＬＣ尽管致癌因素不尽相同，但其形态计量和ＤＮＡ含量测定具有相似变化，ＤＮＡ含量变化与组织学类型也无明显关系。２ＤＮＡ含量的检测是鉴别不典型增生支气管粘膜上皮与肺癌的手段之一。３肺鳞癌癌周有活跃的Ⅱ型肺泡上皮增生，ＤＮＡ定量检测表明其核酸代谢活跃，染色体增殖能力增强，故其可能也是肺鳞癌的组织起源之一。４对有Ⅱ型肺泡上皮增生的患者临床上应严密监测，以利早期预防、早期诊断、早期治疗。５应用多功能真彩色图像分析仪将形态参数和ＤＮＡ定量测定结合起来，配以多因素统计学方法，对于非小细胞肺癌发生发展过程中各个病变阶段的诊断和鉴别诊断有较高的可重复性、可靠性和客观性。
- 金克炜张志勇王芳王芳王芳章宗籍魏永丽
- 关键词：云锡矿工肺癌DNA
- 云锡矿工肺癌中FHIT基因外显子缺失及其蛋白表达被引量：11
- 2007年
- 背景与目的:云南锡矿工人肺癌发生率极高。已有研究表明,脆性组氨酸三联体基因(fragile histidine triad,FHIT)异常与肺癌的发生、发展密切相关。本研究旨在探讨云锡矿工肺癌中FHIT外显子3、4、5、8缺失及其蛋白表达异常。方法:采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测30例云锡矿工肺癌组织、云锡矿工肺癌细胞株YTMCC及22例其他地区非矿工肺癌组织中FHIT外显子3、4、5、8的缺失。用免疫组化法检测90例人肺癌组织FHIT蛋白表达,并对43例云锡矿粉诱发的不同阶段F344大鼠肺癌肺组织进行FHIT蛋白检测。结果:FHIT基因异常在YTMLC细胞表现为FHIT基因3和8两个外显子的缺失,而矿工和非矿工肺癌组织可出现3、4、5、8中1个或几个外显子的杂合性缺失,云锡矿工肺鳞癌中FHIT基因外显子缺失及蛋白失表达率分别为68.2%及70.6%,矿工肺鳞癌和腺癌、非矿工肺鳞癌和腺癌FHIT基因杂合性缺失与正常肺组织相比差异均有显著性(P<0.01)。矿粉诱发F344大鼠肺癌变早期即有FHIT的失表达,在8例鳞状上皮非典型增生、原位癌及早期肺鳞癌FHIT蛋白失表达率达100%。结论:在矿工及非矿工肺癌中,FHIT基因外显子缺失及其蛋白表达异常均常见。肺癌早期及癌前病变即有很高的FHIT失表达率,对FHIT检测分析有可能作为肺癌早期筛查的指标之一。
- 阮永华高倩张林华海蓉程锦霖金克炜
- 关键词：脆性组氨酸三联体基因F344大鼠
- P14ARF和E2F1在结直肠肿瘤中的表达及意义被引量：4
- 2009年
- 目的:观察P14ARF、E2F1蛋白在结直肠肿瘤的表达,明确其对肿瘤发生及侵袭发展的影响。方法:应用免疫组化方法检测尸检正常结直肠组织6例,结肠腺瘤30例,不伴淋巴结转移(无LNM)结直肠癌35例,伴有淋巴结转移(有LNM)结直肠癌30例,后者再分为手术切缘组织、结直肠癌组织、淋巴结转移癌组织,共6组的P14ARF、E2F1蛋白表达情况,采用半定量和图像分析定量测定含量。结果:①结直肠正常黏膜组织、腺瘤组织、癌组织P14ARF、E2F1的表达阳性率逐渐减少,差异存在统计学意义(P<0.05)。②P14ARF、E2F1在伴有淋巴结转移、肝转移的癌组织内表达阳性率与不伴转移的癌组织之间差异无统计学意义(P>0.05)。③P14ARF、E2F1蛋白表达在不同临床病理特征的关系之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:①P14ARF、E2F1具有抑制癌发生作用,蛋白异常仅是结直肠癌癌变早期事件,与淋巴结、远处器官转移等侵袭活动无关,与临床病理特征无关。②P14ARF、E2F1相互协同抑制细胞生长和诱导凋亡,因而可以作为治疗结直肠癌的新靶点。
- 沈勤陈德滇高倩周晓军王芳
- 关键词：结直肠肿瘤P14ARFE2F1
- MEK/ERK对HT-29结肠癌细胞分化、侵袭迁移及NDRG1基因表达的影响被引量：4
- 2012年
- 目的探讨MEK/ERK在结肠癌细胞NDRG1基因表达调控和体外侵袭、迁移中的作用;分析ERK通路、NDRG1基因、肿瘤侵袭及迁移三者间的潜在联系。方法将MEK/ERK抑制剂与HT-29结肠癌细胞共培养,光学显微镜下观察细胞形态变化;透射电子显微镜观察细胞超微结构变化;24孔-小室法检测癌细胞体外侵袭、迁移能力的改变;免疫细胞化学染色、Western blot检测NDRG1基因表达情况。结果与抑制剂共培养后,HT-29结肠癌细胞及胞核形态、大小趋于一致,排列多呈腺样结构。细胞表面微绒毛、高尔基复合体、线粒体增多,粗面内质网丰富,胞质内微腺腔常见,同时可见凋亡细胞。与对照组相比,加抑制剂组在侵袭迁移实验中穿过微孔膜的细胞数减少,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫细胞化学结果显示,HT-29组与DMSO组NDRG1表达较少,加抑制剂组表达显著增多;Western blot结果显示,加抑制剂各组均出现NDRG1蛋白表达条带,而HT-29组与DMSO组则未见有NDRG1蛋白的表达。结论阻断ERK通路可诱导HT-29结肠癌细胞发生分化且促进细胞凋亡,同时可抑制其体外侵袭及迁移能力并明显上调其NDRG1蛋白的表达。
- 季语祝王芳高倩宋精玲
- 关键词：HT-29MAPKNDRG1
- 云锡矿粉离体诱导永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞RLE-6TN恶性转化被引量：4
- 2011年
- 目的建立本实验云锡矿粉(无氡)诱导永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞RLE-6TN恶性转化模型,观察在诱导过程中不同阶段的细胞形态、超微结构和某些相关蛋白改变。方法高、低2个剂量(200和50 mg/L)矿粉对RLE-6TN细胞进行72 h染毒,隔代染毒至第10代,常规传代直至软琼脂克隆形成实验阳性;通过透射电镜、流式细胞术、免疫印迹技术及免疫细胞化学观察实验细胞的改变。结果染毒24 h细胞内见大量矿粉,板层小体变性减少,出现细胞凋亡;第25代高剂量组及第30代高低剂量组的细胞均可在软琼脂上形成细胞集落,空白对照组克隆形成实验阴性(P<0.01);第30代高剂量组细胞增殖指数(PI)高于空白对照组;高剂量组转化细胞p53(+)、MDM2(+)、FHIT(-);空白对照组p53(-)、MDM2(+)、FHIT(+)。结论云锡矿粉可引起离体培养的RLE-6TN细胞发生恶性转化。p53阳性表达及FHIT失表达可作为RLE-6TN细胞转化的参考指标。
- 孟庆印阮永华金克炜唐莹高倩边莉
- 关键词：恶性转化
- MAGE-A4在人大肠肿瘤中的表达及其与淋巴结转移的关系被引量：7
- 2006年
- 目的研究MAGE-A4在人大肠肿瘤组织中的表达,并探讨其与大肠腺癌侵袭和转移的关系。方法采用免疫组织化学技术SP法,观察38例正常大肠黏膜、31例大肠腺瘤、83例大肠腺癌组织中MAGE-A4蛋白的表达特点。结果MAGE-A4蛋白的表达定位于胞质及胞核。在正常大肠黏膜组织、大肠腺瘤、大肠腺癌组织中的阳性表达率分别为5.26%、38.71%及38.55%。正常大肠黏膜组织中的阳性表达率与在大肠腺瘤、大肠腺癌组织中的阳性表达率相比较,有非常显著性差异(P<0.01);而在大肠腺瘤中的表达强度与在大肠腺癌中的相比,无显著性差异(P>0.05);在不同组织学类型的大肠腺瘤中的表达也无显著性差异(P>0.05);不同性别、不同年龄、不同侵袭深度、有肝转移与无肝转移的大肠腺癌患者,其大肠肿瘤组织中MAGE-A4蛋白的表达均无显著性差异(P>0.05);但有淋巴结转移与无淋巴结转移的大肠癌患者,其MAGE-A4蛋白的表达有显著性差异,且呈正相关关系(P<0.01,γs=0.312)。结论MAGE-A4蛋白在大肠肿瘤的发生中有一定作用,且与大肠腺癌患者有无淋巴结转移有正相关关系。
- 梁锐王芳高倩王志强金克炜
- 关键词：大肠肿瘤肿瘤转移
- 432例肺癌的临床病理分析被引量：1
- 1997年
- 应用石蜡大、小切片方法，从临床病理特点方面，着重对男、女性肺癌进行对比研究。
- 黄增祗李保刚缪华英高倩高倩刘崇智杨西敏肖正清刘崇智刘光贤刘耕耘肖正清韩丹晁福重松信昭刘光贤
- 关键词：肺肿瘤病理石蜡切片
- 生精助育汤治疗心理性勃起功能障碍180例临床观察被引量：7
- 2002年
- 生精助育汤具有滋阴补肾、益气养血、健脾生精之功效,治疗男性不育症效果显著。为了探讨其对心理性勃起功能障碍的治疗效果,进行了临床研究。共设治疗组180例,正常对照组30例。分别进行阴茎硬度(Rigiscan)指标测试、双核素阴茎海绵体血液动力学动态检查(Penogram)、国际勃起功能评分-5(IIEF—5)的筛选及治疗后的疗效评价。治疗组每日口服生精助育汤1剂,连续服用1个月后复查。结果治疗后IIEF—5及Rigiscan指标明显改善,表明生精助育汤对心理性勃起功能障碍有确切的治疗效果。
- 李金昆沈明徐晓林于建红覃云凌赵永平高倩赵世伟周正莲
- 关键词：中医药疗法性功能障碍生精助育汤心理性勃起功能障碍
- 输尿管镜气压弹道碎石病人护理
- 总结输尿管镜下气压弹道碎石治疗输尿管结石60例的护理经验,认为加强术前心理护理,术前检查,术后生命体征、排尿、排石情况观察,保持引流通畅,预防感染等重要护理措施对治疗成功
- 高倩
- 文献传递
