陈赓
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：南通大学医学院人体解剖学系更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目江苏高校优势学科建设工程资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠海马去神经支配术后急性期内神经营养因子mRNA的表达变化
- 2015年
- 目的 :观察去神经损伤后海马中胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF-2),碱性成纤维细胞生长因子2(basic fibroblastic growth factor 2,FGF-2),神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)等神经营养因子在急性期内各时间点的基因表达变化。方法 :将28只SD大鼠随机分成双侧穹窿海马伞切割后0.5、1、2、6、12及24 h组和假手术组,在穹窿海马伞切割上述各时间点后,分别取各组大鼠海马组织,并提取总RNA,利用半定量逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)法分析切割穹窿海马伞后海马内IGF-2、FGF-2、NGF、CNTF的m RNA表达变化情况。结果:在切割大鼠穹窿海马伞后急性期的早期阶段,0.5 h组CNTF m RNA的表达量与假手术组相比明显增加(P<0.05);NGF m RNA的表达水平在12 h和24 h时与假手术组相比明显下降(P<0.05);IGF-2 m RNA的表达水平在24 h时与假手术组相比显著减少(P<0.05);FGF-2m RNA从海马伞切割后1、2、6、12和24 h均较假手术组下降(P<0.05)。结论 :切割穹窿海马伞后CNTF m RNA急性期极早期表达较假手术组上调,可能与急性期海马对应激性损伤的保护作用有关,这将为更深层次地研究海马在去神经支配损伤后神经再生与神经修复提供新的思路。
- 陈赓张新化金国华成翔张蕾卢晓慧郭静静王林美惠易
- 关键词：海马神经营养因子半定量逆转录-聚合酶链反应神经再生
- 靶向大鼠海马神经干细胞STAT3慢病毒shRNA干扰载体的构建与鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的:构建与鉴定靶向大鼠海马干细胞(neural stem cells,NSCs)信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription factor3,STAT3)shRNA慢病毒载体。方法:设计并合成4条靶向大鼠STAT3基因的shRNA干扰序列(shRNA1、2、3、4)及1条阴性对照序列(negative control,NC),将其分别重组于慢病毒载体,慢病毒包装后感染大鼠海马神经干细胞,荧光显微镜下通过观察绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)表达计算慢病毒感染效率;利用RT-PCR和Western Blot检测干扰后大鼠海马NSCs中STAT3的mRNA和蛋白质表达水平。结果:干扰序列测序结果正确;感染指数(multiply of index,MOI)为1∶20时感染效率最高为85.6±3.14%;感染大鼠海马NSCs 72 h后利用RT-PCR和Western Blot检测干扰效率发现shRNA1干扰效率最好,其基因水平干扰效率为81.3%±4.22%;蛋白水平干扰效率为72.3%±5.12%。结论:成功构建靶向大鼠海马干细胞STAT3慢病毒干扰载体,并通过筛选发现shRNA1能有效抑制NSCs的STAT3 mRNA和蛋白表达,为研究海马NSCs分化机制奠定了工作基础。
- 成翔金国华张新化张蕾陈赓秦建兵
- 关键词：STAT3海马NSCSHRNA慢病毒
