陈肖华
- 作品数：89 被引量：222H指数：8
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队医药卫生科研基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程哲学宗教更多>>
- 核与辐射恐怖袭击损伤伤员的三级医学救治
- ＜正＞ 核与辐射损伤伤员的医学救治是整个反核恐怖医学应急救援工作的重要组成部分,其主要任务是对受照射人员进行及时、正确地医学处理,最大限度地减少人员伤亡和远期危害,有效地保护公众的身体安全与心理健康。发生核与辐射恐怖袭击...
- 陈肖华毛秉智董波饶亚兰张军权王志东高荣莲
- 文献传递
- S100A4 siRNA对人胰腺癌BxPc-3细胞增殖、迁移及侵袭的影响被引量：1
- 2010年
- 目的观察利用小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)技术下调人胰腺癌BxPc-3细胞中钙结合蛋白S100A4表达后对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法设计合成针对S100A4的特异性siRNA,转染至人胰腺癌BxPc-3细胞,以Western印迹检测转染前后S100A4蛋白表达变化;克隆形成率实验检测转染前后BxPc-3细胞增殖能力;Transwell小室模型检测转染前后BxPc-3细胞迁移和侵袭能力变化。结果 Western印迹结果显示BxPc-3细胞转染S100A4siRNA48h后,S100A4蛋白表达明显下调;Transwell小室验证转染S100A4siRNA后细胞的迁移和侵袭能力明显降低。结论本研究结果表明,S100A4表达下调后可抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,提示S100A4可以作为一个潜在的肿瘤治疗靶标。
- 刘丽卉李峰生李娜董波周仕香陈肖华
- 关键词：胰腺肿瘤S100蛋白质类BXPC-3细胞
- 一种新的GFP/DNA双标记流式细胞技术被引量：3
- 2004年
- 目的 :为了检测细胞转染了带绿色荧光蛋白 (GFP)标记的融合基因后细胞周期的改变 ,以研究目的基因与细胞周期的关系 ,建立GFP/DNA双标记流式细胞技术。方法 :①以小鼠脾细胞为模型 ,以不同浓度的多聚甲醛(PFA)预固定细胞不同时间 ,再换用 70 %乙醇固定细胞 2 4h以上 ,观察不同固定方法对细胞周期检测的影响 ;②以Ad EGFP感染的Hep 2细胞为模型 ,观察不同固定方法对细胞周期、GFP阳性细胞检出率和GFP的荧光强度的影响 ;③用最佳固定方法观察转染p2 1/WAF1/CIP1 EGFP融合基因的 2 93细胞的细胞周期 ,以验证方法的可靠性。结果 :0 .5 %PFA预固定 6 0min ,再换用 70 %乙醇固定细胞 ,不影响细胞周期检测 ,而且GFP荧光强度和转染效率的检测最佳。以此方法固定细胞 ,GFP/DNA双标记流式细胞技术检测了转染 p2 1/WAF1/CIP1 EGFP融合基因的2 93细胞的细胞周期 ,可观察到p2 1表达阳性的细胞发生了G0 /G1期阻滞。结论 :优化的细胞固定方法可以有效地阻止GFP从细胞内流出 ,建立的GFP/NDA双标记流式细胞技术可以用于研究带GFP标签的基因表达蛋白与细胞周期的关系。
- 董波饶亚岚鲁茁壮王澜从玉文陈肖华张军权高荣莲王治东毛秉智
- 关键词：细胞周期流式细胞术绿色荧光蛋白基因表达转染
- 一种改进的用于测定细胞周期的细胞制备方法被引量：37
- 2002年
- 目的 :减少细胞的聚集数量 ,提高测试效率和结果的准确性。方法 :在用酒精固定细胞时分别加入终浓度为 0 % ,1.5 % ,3% ,6 %和 12 %的小牛血清 ,置 - 2 0℃分别固定细胞 1d ,3d和 7d。比较了不同浓度的血清和保存不同时间粘连细胞的数量及对细胞周期分析结果的影响。结果 :加入血清可明显减轻细胞的粘连 ,减少了细胞的聚集数量 ,尤以 3%小牛血清组最佳。样品可不必过滤 ,在上机测试时 ,进样针不堵塞 ,上样速度快 ,细胞周期分析更准确。随着保存时间的延长 ,聚集细胞的数量有增加的趋势。结论 :在制备用于测定细胞周期的样品时 ,固定细胞的过程中加入终浓度为 3%的小牛血清是一种简单的、能有效地保护细胞膜使细胞不易粘连的技术措施 ,且固定细胞的时间不宜超过 7d。
- 董波陈肖华张浩张军权罗庆良史莲萍毛秉智
- 关键词：细胞周期流式细胞术
- 急性放射性皮肤溃疡发生发展过程中TGF-β1及其受体TGF-βR1的表达水平:与单纯伤口愈合的定量对比研究被引量：3
- 2003年
- 为研究TGF-β1及其受体TGF-βR1在急性放射性皮肤溃疡组织中的表达水平及对溃疡形成、发展、愈合的影响,我们采用雌性Wistar大鼠,以60Coγ射线局部照射法建立急性放射性皮肤溃疡动物模型,并以手术法建立单纯皮肤伤口动物模型,观察病变55天,采用免疫组化、原位杂交和图像分析等方法检测单纯伤口及皮肤溃疡组织中TGF-β1及TGF-βR1的转录和表达水平。研究发现,照后14天照射野内开始出现皮肤溃疡,之后逐渐扩大、融合、加深。皮肤受照射区多种细胞,特别是溃疡床表皮细胞、成纤维细胞及血管内皮细胞中TGF-β1及TGF-βR1的转录和表达水平均较正常皮肤组织明显增强,与单纯伤口组比较,溃疡床的TGF-β1及TGF-βR1阳性细胞数量明显减少,阳性强度减弱不明显。表明放射性皮肤溃疡组织中TGF-β1及TGF-βR1的表达水平降低可能与溃疡发生、发展及难愈合的分子机制相关。
- 谷庆阳王德文杨志祥高亚兵刘杰陈肖华王利红崔玉芳王晓民
- 关键词：放射性皮肤溃疡TGF-Β1TGF-ΒR1伤口愈合
- MyD88干涉慢病毒颗粒的包装和鉴定
- 2010年
- 目的制备MyD88分子的慢病毒干涉颗粒,建立稳定下调MyD88的HEK293细胞系。方法将携带特异性干涉序列的DNA片段克隆入干涉质粒pSicoR中,并制备携带不同干涉序列的慢病毒颗粒。将慢病毒颗粒感染HEK293细胞,建立稳定细胞系,经RT-PCR和报告基因分析方法确定不同干涉序列对MyD88表达的下调及信号通路激活的阻断作用。结果成功制备携带干涉序列的慢病毒颗粒,并获得稳定感染慢病毒的HEK293细胞系,经鉴定发现感染912位序列的细胞MyD88mRNA表达水平下调为对照组的28%,对CBLB502的激活作用下降为对照组的24%。结论成功制备MyD88的慢病毒干涉颗粒,可用于建立MyD88稳定下调的细胞系。
- 周仕香王治东董波张学清韩春光高荣莲刘芬菊陈肖华
- 关键词：慢病毒RNA干涉细胞系质粒
- 小鼠IL-18基因的克隆及真核表达载体的构建
- 2000年
- 研究IL - 18是否具有对造血功能调控的作用。采用常规分子生物学技术 ,从小鼠骨髓细胞中克隆了含信号肽序列的IL - 18,构建了表达载体。经序列测定表明所克隆的IL - 18序列与文献报道的一致 ,构建的真核表达载体正确。
- 张浩毛秉智董波陈肖华张军权郭德煌
- 关键词：白细胞介素-18RT-PCR
- Hp/DNA双参数分析放射损伤小鼠骨髓细胞周期、凋亡和Hp被引量：3
- 2004年
- 目的 :建立结合珠蛋白 (Hp) DNA双参数流式细胞技术 ,以探讨放射损伤小鼠骨髓细胞中Hp含量与细胞周期和凋亡的关系。方法 :小鼠骨髓细胞经 70 %乙醇固定后 ,Triton_X 10 0破膜 ,间接免疫荧光技术标记Hp ,PI标记DNA ,上流式细胞仪测试。用ModFit软件设双门法分析Hp+ 和Hp_细胞的细胞周期和凋亡 ,CELLQuest软件分析Hp+ 细胞比例。结果 :γ射线照射后 6h小鼠骨髓有核细胞中Hp+ 细胞的比例明显高于未照射对照组 ,骨髓细胞的凋亡来自于Hp_细胞 ,Hp+ 细胞未见凋亡 ,Hp_细胞发生的G2 M阻滞比Hp+ 细胞严重。这些信息是单用Western印迹法或单纯DNA分析所不能提示的。结论 :Hp DNA双参数流式细胞技术可用于分析Hp与细胞周期和凋亡的关系 ,是一种快速、客观的分析方法。
- 董波陈肖华王治东饶亚岚张军权张燕毛秉智
- 关键词：细胞周期凋亡急性辐射损伤结合珠蛋白
- SSH方法分离大剂量照射后小鼠骨髓差异表达EST序列被引量：8
- 2003年
- 目的 为探讨骨髓辐射损伤的分子机理 ,研究了整体照射条件下 ,辐射前后骨髓基因表达的变化。方法 小鼠 7Gyγ射线照射后 4h提取骨髓总RNA为实验方 (tester) ,对照组动物骨髓总RNA为驱动方 (driver) ;实验方、驱动方总RNA由SMARTcDNA合成方法合成双链cDNA ,进而由抑制消减杂交 (SSH)方法获得消减杂交产物 ,消减杂交产物克隆到T载体建立消减文库 ;对部分克隆进行杂交筛选及序列比对。结果 消减杂交文库挑取 80 0个克隆进行PCR扩增 ,阳性率约为86 % ;部分克隆经两轮杂交筛选获得 1 4个差异片段 ;7个差异片段与鼠EST库已有序列高度相似 ,其余 7个差异片段可能是新的EST序列。
- 饶亚岚陈肖华张军权魏巍董波毛秉智
- 关键词：基因表达动物实验
- STAT3 siRNA引起U251细胞凋亡的研究
- 2008年
- 目的:观察利用siRNA技术下调人脑胶质母细胞瘤细胞(U251)STAT3表达后对细胞凋亡的影响。方法:分离培养并间接免疫荧光鉴定大鼠原代星形胶质细胞(NA),用STAT3干涉质粒载体(pSilence2.1-STAT3)及对照载体(pSilence2.1-GFP)转染U251细胞及NA细胞,用Hoechst 33258染色观察凋亡的形态学改变,用Annexin-V试剂盒定量检测凋亡。结果:分离培养了符合实验要求的NA细胞,转染pSilence2.1-STAT3后,U251细胞出现了明显的时间依赖性细胞凋亡,而NA细胞无显著凋亡发生。结论:pSilence2.1-STAT3能诱导U251细胞凋亡,而对正常细胞无显著影响。
- 李峰生高玲董波张军权饶亚岚丛悦毛秉智陈肖华
- 关键词：胶质母细胞瘤小干扰RNA转录激活因子3U251细胞细胞凋亡
