陈景波
- 作品数：9 被引量：26H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 腹腔镜辅助下全结直肠切除术治疗结直肠多发性疾病被引量：13
- 2006年
- 目的：探讨腹腔镜辅助下全结直肠切除术治疗结直肠多发疾病的可行性与安全性。方法：回顾性分析11例在腹腔镜辅助下进行的全结肠切除术患者的临床资料，其中家族性腺瘤性息肉病（FAP）2例，息肉癌变2例，结直肠多发癌3例，慢性溃疡性结直肠炎2例，慢性顽固性便秘2例。结果：11例腹腔镜辅助下全结肠切除术均成功，手术时间约（348±47）min，术中出血量约（187±68）ml，术后胃肠功能恢复时间（65±18）h，辅助切口3～5cm，术后无腹腔出血、感染、吻合口瘘等并发症；随访6～24月，大便5～12次／d；无肿瘤复发、转移。结论：在熟练掌握腹腔镜操作技术和开腹大肠切除技巧的前提下，完成腹腔镜辅助下全结直肠切除术是安全可行的。
- 陶凯雄王国斌张波陈道达蔡开琳舒晓刚卢晓明龙跃平陈景波
- 关键词：腹腔镜全结直肠切除术结直肠疾病
- 小鼠巨结肠模型的建立及其生物学特性研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨小鼠巨结肠模型的建立及其生物学特性。方法90只雄性昆明小鼠随机分为3组，实验组以0．1％Benzalkonium chloride（BAC）处理降结肠15min，对照组以生理盐水代替。术后分别于第2、7、14、21、28天通过大体观察，组织学、免疫组织化学及逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测观察该模型相关生物学特性。结果自术后第7天开始，实验组HE及免疫组织化学染色可见肌层神经节细胞明显减少至完全消失，平滑肌细胞及黏膜层无明显变化，RT-PCR显示NF舢、ACHE、GFAP表达下调。对照组无明显变化。结论运用0．1％Benzalkonium Chloride（SAC）可以成功构建小鼠巨结肠模型，该模型与先天性巨结肠具有相似的病理特征，为下一步的神经干细胞抑制奠定实验基础。
- 舒晓刚陈景波王国斌陶凯雄孙念峰张景辉
- 关键词：巨结肠动物苯扎氯铵
- 大鼠胶质细胞源性营养因子及内皮素B受体基因共重组腺病毒的构建及表达被引量：1
- 2006年
- 目的构建胶质细胞源性营养因子(GDNF)及内皮素B受体基因(EDNRB)共表达腺病毒并观察其在神经干细胞(NSC)中的表达。方法利用AdEasy腺病毒表达系统构建GDNF及EDNRB基因共表达腺病毒Ad-GE,体外感染NSC后通过观察绿色荧光蛋白表达及RT-PCR、流式细胞仪法鉴定外源基因的表达。结果NSC经Ad-GE感染后24h可观察到绿色荧光蛋白(GFP)表达,RT-PCR、流式细胞仪法证实外源性GDNF及EDNRB基因均可在NSC中表达。结论成功构建GDNF及EDNRB基因共表达重组腺病毒,证实了其在NSC的表达,为先天性巨结肠的联合基因治疗打下基础。
- 孙念峰舒晓刚张景辉陈景波王国斌
- 关键词：干细胞腺病毒
- 结肠癌组织中抗凋亡基因bag-1和bcl-2的表达及意义被引量：7
- 2006年
- 目的研究抗凋亡基因bag1和bcl2在结肠癌组织中的表达及意义,并探讨二者之间的关系。方法应用免疫组织化学SABC法对64例结肠癌组织及10例正常结肠组织中bag1和bcl2基因的表达进行检测。结果结肠癌组织中bag1和bcl2蛋白阳性表达率分别为64.1%和70.3%,显著高于结肠正常组织10.0%(P<0.05);bag1和bcl2在结肠癌中的表达与结肠癌病理类型无关,但bag1与病理分级密切相关(P<0.05),而bcl2与病理分级无明显相关性(P>0.05);抗凋亡基因bag1和bcl2在结肠癌的发生发展过程中呈正相关,r=0.475。结论结肠癌组织中有不同水平的bag1和bcl2蛋白的高表达,两者相互作用并通过调节细胞凋亡而参与结肠癌的发生、发展,它们可以作为结肠癌早期筛选的一项指标,并对疾病的预后有着重要意义。
- 孙念峰王国斌陈景波
- 关键词：结肠癌BAG-1BCL-2细胞凋亡
- 胶质细胞源性营养因子及内皮素B受体基因共转染小鼠神经干细胞(英文)
- 2009年
- 背景:胶质细胞源性神经营养因子与内皮素B受体基因的缺失将导致肠神经系统发育异常。神经干细胞移植不仅可以从解剖和功能上修复神经系统,还可以作为基因转染的载体。目的:拟将携带胶质细胞源性神经营养因子和内皮素B受体基因的重组腺病毒转染至小鼠神经干细胞,并观察目的基因的表达。设计:细胞-基因学观察。材料:新生昆明小鼠由华中科技大学同济医学院动物实验中心提供。jetPEI转染试剂为PolyPlus公司产品;携带绿色荧光蛋白的胶质细胞源性神经营养因子、内皮素B受体基因共表达腺病毒由本室孙念峰博士和张景辉博士构建并惠赠。方法:无菌条件下取新生小鼠脑组织,制备单细胞悬液。取携带绿色荧光蛋白的胶质细胞源性神经营养因子和内皮素B受体基因共表达腺病毒,溶解于NaCl中制备JetPEI/DNA复合体。用DMEM/F12完全培养基调整次代神经干细胞密度为5×108L-1,向24孔板中每孔加入400μL细胞悬液、100μLJetPEI/DNA复合体,置37℃、体积分数为5%的CO2培养箱中,分别于转染24,48,72h后收集神经干细胞。主要观察指标:采用荧光显微镜、流式细胞仪检测转染效率,RT-PCR检测目的基因在神经干细胞内的表达。结果:转染24h后即可在荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白的表达,转染24,48,72h后绿色荧光蛋白阳性率分别为15.36%,24.67%,25.73%。各转染时间点神经干细胞均表达胶质细胞源性神经营养因子及内皮素B受体基因,转染24h条带亮度较低,72h时外源基因表达水平最高。结论:运用jetPEI试剂成功将目的基因转染至小鼠神经干细胞内,且胶质细胞源性神经营养因子和内皮素B受体基因在靶细胞中得到有效转录和表达。
- 陈景波王国斌孙念峰陶凯雄舒晓刚张景辉
- 关键词：神经干细胞胶质细胞源性神经营养因子转染
- 克隆大鼠内皮素B受体基因重组腺病毒穿梭质粒的构建及鉴定
- 2007年
- 目的克隆大鼠内皮素B受体(EDNRB)基因,构建含有EDNRB基因的重组腺病毒载体,为转染神经干细胞和基因治疗先天性巨结肠(HD)奠定基础。方法从大鼠心脏组织中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出约1580bp的片段,并将该片段克隆到载体pAdtrack-CMV中,进行酶切鉴定和序列分析。结果证实成功构建了含有EDNRB基因的重组腺病毒质粒。结论克隆到正确的大鼠EDNRB基因,并构建出重组质粒pAd-EDNRB,为下一步重组腺病毒颗粒和基因治疗打下基础。
- 孙念峰陈景波张景辉王国斌
- 关键词：EDNRB腺病毒载体
- 神经干细胞移植治疗结肠去神经节小鼠被引量：2
- 2009年
- 目的观察神经干细胞在去神经节小鼠结肠壁内的存活分化，探讨神经干细胞移植治疗结肠无神经节细胞症的可行性。方法0．5％苯扎氯铵（BAC）处理8周龄昆明小鼠结肠浆膜层选择性去除结肠壁神经节制作巨结肠模型，原代培养新生小鼠大脑皮质来源神经干细胞，Hoechst33342标记传代纯化后神经干细胞。运用微量注射器将标记后的神经干细胞移植人模型鼠病变肠段，分别于术后1、2、3、4周行大体观察，苏木素-伊红（HE）染色，免疫组织荧光检测小鼠生物学特性和神经干细胞存活分化情况。结果原代培养神经干细胞Nestin表达阳性，体外培养可分化为神经元和神经胶质细胞；BAC处理后，HE染色及免疫组织化学染色显示小鼠结肠肌间及黏膜下神经节消失；神经干细胞移植后各观测时间点可见荧光标记细胞，免疫组织荧光检测显示术后1周结肠壁存在巢蛋白（Nestin）表达阳性细胞，3周后可见神经元特异性烯醇化酶（NSE）及胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达阳性细胞，对照组未观察到阳性表达。结论神经干细胞可以在去神经节小鼠结肠壁内存活并分化为神经元及胶质细胞，部分恢复肠道神经的调节作用。
- 舒晓刚陈景波王智勇王国斌
- 关键词：神经干细胞巨结肠
- 胶质细胞源性营养因子及内皮素B受体基因共转染神经干细胞实验研究
- 2009年
- 目的探讨神经干细胞转染的新方法,并观察转染后目的基因的表达情况。方法原代培养神经干细胞,运用jetPEI转染试剂将目的基因胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和内皮素B受体基因(EDNRB基因)共转染至神经干细胞内,免疫荧光显微镜观察、流式细胞仪检测绿色荧光蛋白(GFP)表达情况,测定转染效率,RT-PCR检测目的基因表达情况。结果成功培养出可用于基因转染的神经干细胞,转染后24h即可在免疫荧光显微镜下观察到GFP表达,流式细胞仪显示24、48和72h转染效率分别为15.36%、24.67%和25.73%。RT-PCR显示目的基因在神经干细胞内成功表达。结论运用jetPEI成功将目的基因转染至神经干细胞内,为相关神经变性疾病的基因治疗打下了实验基础。
- 陈景波王国斌孙念峰陶凯雄舒晓刚张景辉
- 关键词：GDNF基因神经干细胞细胞转染
- 抗凋亡基因Bag-1和Bcl-2在结肠癌组织中的表达及其相互关系(英文)被引量：2
- 2007年
- 目的研究抗凋亡基因Bag-1和Bcl-2在结肠癌组织中的表达及其意义,并探讨两者间的关系。方法应用免疫组织化学SABC法(链霉亲合素-生物素-过氧化物酶复合物法)对64例结肠癌组织及10例正常结肠组织中Bag-1和Bcl-2基因的表达进行检测。结果Bag-1和Bcl-2在结肠癌中的表达与结肠癌病理类型、肿瘤直径、浸润深度及有无淋巴结转移无关,但Bag-1与病理分级、远处转移、Dukes分期及预后密切相关(P<0.05),而Bcl-2与这几项临床病理因素无明显相关性(P>0.05);Bag-1和Bcl-2在结肠癌的发生发展过程中呈正相关(r=0.475)。结论结肠癌组织中有不同水平的Bag-1和Bcl-2蛋白的高表达,它们可以作为结肠癌早期筛选的一项指标,并对疾病的预后有着重要意义。
- 孙念峰陈景波王国斌
- 关键词：大肠癌BAG-1BCL-2细胞凋亡
