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从重组融合蛋白包涵体中释放大环肽过程优化: 2016年; [目的]探索不同条件对包涵体复性的影响,优化重组融合蛋白包涵体中释放大环肽的工艺条件。[方法]对纯化后的包涵体进行不同变性液、透析方式及是否超声破碎处理的比较;并在此基础上探讨不同透析温度、谷胱甘肽浓度与L-Arg浓度对大环肽产量的影响。采用Tanon凝胶分析系统与紫外吸收法对大环肽的产量进行分析。[结果]使用8 mol/L的尿素溶解包涵体后,获得的上清液在25℃条件下,在含有1 mmol/L GSH、0.1 mmol/L GSSG、0.8mmol/L L-Arg的透析液中进行梯度透析,其得率为每克包涵体获得约1.4 mg大环肽。[结论]成功从包涵体中获得大环肽并优化工艺条件。; 张晓杰徐鸿涛陈启助罗利琼沈娟廖斌张军; 关键词：包涵体

补血方协同转染TCRVβ7.1 PBMC对肿瘤化疗造成骨髓抑制的缓解机制被引量：2: 2009年; 目的:探讨补血方协同转染TCRVβ7.1 PBMC对肿瘤化疗造成骨髓抑制的缓解机制。方法:采用体外细胞实验建立化疗损伤模型,利用MTT法测定肿瘤细胞的死亡率,利用ELISA法检测造血相关细胞因子的分泌情况。结果:与对照组相比补血方与转染TCRVβ7.1 PBMC组能够明显促进粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的分泌,并且加PBMC组与单纯化疗药组相比能够明显抑制肿瘤的生长。结论:补血方协同转TCRVβ7.1 PB-MC不仅能够对肿瘤细胞起到杀伤作用,且对化疗药所引起的骨髓抑制有一定的缓解作用。; 薄华本王璐王金全陈启助吴凤麟邵宏伟黄树林; 关键词：补血方骨髓抑制化疗

新型钌配合物通过内源性线粒体凋亡通路诱导Bel-7402细胞凋亡的机制被引量：1: 2016年; 目的研究钌配合物Ru-HMIP对肝癌细胞Bel-7402的抑制作用及其机制。方法 MTT法检测RuHMIP对Bel-7402细胞的杀伤作用;流式细胞术检测其诱导细胞凋亡情况;JC-1荧光探针检测线粒体膜电位;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS);Western blot检测细胞凋亡相关蛋白。结果 RuHMIP对Bel-7402细胞有较强的杀伤效果;其对细胞毒性作用是通过诱导细胞凋亡方式;Ru-HMIP在Bel-7402细胞中产生过量ROS,并且这种作用及其细胞毒性都可被还原剂乙酰半胱氨酸(NAC)所阻断。Ru-HMIP可以破坏Bel-7402细胞线粒体膜电位;上调Bax,下调Bcl-2,同时激活Caspase-9及Caspase-3。结论 Ru-HMIP可以在体外有效抑制Bel-7402细胞增殖,其作用机制是在细胞内诱发过量ROS,继而通过内源性线粒体凋亡通路诱导细胞凋亡。; 王金全薄华本陈启助; 关键词：钌配合物 BEL-7402细胞 ROS 凋亡通路

黄芪总提取物促进PBMC对肝癌细胞的体外杀伤作用被引量：6: 2016年; 目的观察黄芪总提取物(TAE)与人外周血单个核细胞(PBMC)联用对肝癌细胞株BEl-7402的体外杀伤作用。方法 MTT法及流式细胞术分别检测TAE与PBMC在单独、联合应用情况下对BEL-7402细胞的杀伤活性,Burgi修正公式评价药物联合应用对细胞杀伤效果是否具有协同作用,ELISA法检测TAE对PBMC分泌IFN-γ、TNF-α细胞因子的影响。结果 TAE与PBMC联用对肝癌细胞BEl-7402具有协同杀伤作用。TAE预先与PBMC孵育后两者协同杀伤作用明显增强。TAE可以刺激PBMC分泌IFN-γ、TNF-α细胞因子。结论 TAE可以促进PBMC对肝癌细胞的体外杀伤能力,二者联用具有协同杀伤作用,其作用机制可能是TAE刺激PBMC分泌IFN-γ和TNF-α以增强免疫杀伤能力。; 王金全陈启助黄树林薄华本; 关键词：PBMC 抗肿瘤活性免疫细胞治疗

当归补血汤调控骨髓造血机理及对造血微环境的影响被引量：39: 2013年; 目的探讨当归补血汤调控骨髓造血的机理。方法 50只ICR小鼠随机分为5组,每组10只。除正常组外其他组小鼠连续腹腔注射多柔比星4 mg·kg^(-1)·d^(-1),共3 d,正常组给予同等体积的生理盐水。注射多柔比星3 d后,当归补血汤低、中、高剂量组分别连续腹腔注射补血汤5、15、25 g·kg^(-1)·d^(-1),共7 d,正常组和模型组给予同等体积的生理盐水。给药结束制备骨髓单细胞悬液,体外培养观察骨髓基质细胞生长状态,流式细胞仪检测骨髓细胞增殖和黏附情况。结果当归补血汤组骨髓基质细胞生长状态好于正常组和模型组,骨髓细胞之间的聚集明显。模型组聚集细胞数占总细胞比例为(4.00±1.10)%,低于正常组[(3.07±2.35)%],但无显著差异(P>0.05)。当归补血汤低、中、高剂量组聚集细胞数目占总细胞数比例分别为(5.40±2.91)%、(7.36±2.32)%和(9.27±3.35)%,均高于模型组(P<0.05或P<0.01)。正常组G2期细胞比例高于其他四组(P<0.05),当归补血汤各剂量组G2/M期细胞比例与模型组比较无显著差异(P>0.05)。结论当归补血汤可能通过改善基质细胞的状态、增强骨髓细胞之间的黏附来改善骨髓造血微环境。; 薄华本陈启助沈晗吴凤麟邵宏伟黄树林; 关键词：当归补血汤骨髓造血干细胞细胞黏附造血微环境

当归补血汤的应用: 本发明公开了当归补血汤的应用，具体是在制备增强骨髓细胞聚集能力药物和/或在制备增加骨髓基质细胞贴壁能力药物方面的应用，本发明突破现有技术关于当归补血汤具有对骨髓基质细胞的增殖作用的技术偏见，提供了当归补血汤在增强骨髓细胞...; 薄华本黄树林陈俊王金全陈启助; 文献传递

肝癌特异性TCRVβ亚家族基因的药效研究: 黄树林肖兰凤邵红伟陈启助吴凤麟沈晗薄华本王金全张文峰张帆罗利琼林月霞; 该项目在前期通过基因优势取用分离到特异性识别杀伤肝癌细胞的TCRVβ基因的基础上，以荷肝癌SCID小鼠为模型，重点研究了TCRVβ基因转染人PBMC后的抗肝癌药效学作用，结果发现特异性TCRVβ基因转染的PBMC在肿瘤局...; 关键词：; 关键词：肝癌恶性肿瘤治疗

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陈启助