陈伟
- 作品数:18 被引量:47H指数:5
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- 间充质干细胞联合NK细胞输注抑制DC减轻aGVHD被引量:2
- 2013年
- 【目的】观察骨髓MSC联合NK细胞输注对小鼠异基因骨髓移植后aGVHD的影响,初步探讨其作用机制。【方法】分离C57BL/6小鼠骨髓细胞,体外培养MSC;取C57BL/6小鼠脾脏细胞,磁珠分选NK细胞;建立C57BL/6→BALB/c小鼠异基因骨髓移植模型,接受移植小鼠随机分为4组,每组10只小鼠,MSC和NK细胞移植组,MSC移植组,NK细胞移植组和培养基对照组。根据aGVHD分值,肝、脾、小肠aGVHD病理损害和平均存活时间,评价aGVHD的程度。ELISA法检测小鼠血清中IFNγ和IL-12的含量。流式细胞术检测受鼠脾脏细胞CD11c和CD86的表达情况。【结果】根据GVHD分值,肝、脾、小肠aGVHD病理损害和平均存活时间综合评价,与培养基对照组比较,MSC联合NK细胞移植组,MSC移植组和NK细胞移植组,发生aGVHD的程度均减轻,以MSC联合NK细胞移植组减轻最为明显。IFNγ的含量,NK细胞组明显高于MSC联合NK细胞移植组,MSC移植组和培养基对照组。IL-12的含量,MSC联合NK细胞移植组低于NK细胞移植组和培养基对照组,MSC移植组低于培养基对照组。脾脏DC细胞的含量,MSC联合NK细胞移植组未成熟DC(CD11c+CD86-)和成熟DC(CD11c+CD86+)均低于MSC移植组,NK细胞组和培养基对照组。【结论】MSC联合NK细胞输注降低DC细胞数量,减轻aGVHD,延长小鼠生存时间。
- 赵一俏曹东林陈伟
- 关键词:间充质干细胞异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病
- SiRNA沉默NK细胞CD158b表达及对异体树突状细胞的杀伤作用
- 2008年
- 目的探讨特异性的SiRNA干扰人NK细胞CD158b基因表达对异体树突状细胞杀伤的影响。方法将特异性的CD158b-SiRNA导入人NK细胞后,qRT-PCR及流式检测NK细胞CD158b基因mRNA及其蛋白质的表达。LDH释放法检测RNA干扰NK细胞CD158b前后对异体DC细胞杀伤效果的影响。结果特异性siRNA片段能有效降低CD158b mRNA水平,最大干扰效率达72%;脂质体及阴性对照siRNA片段对NK细胞CD158b的表达无特异的干扰作用;流式细胞仪检测证明转染特异SiRNA-CD158b后CD158b蛋白表达明显下降。RNA干扰NK细胞CD158b的表达后能显著提高其杀伤异体DC的活性。结论特异性的CD158b-SiRNA可有效降低NK细胞中CD158b mRNA水平,明显下调CD158b蛋白表达。RNA干扰NK细胞CD158b后所产生的异源反应性NK细胞对异体DC细胞杀伤效果显著增加,证明通过人工改变NK细胞KIR基因的表达产生KIR-HLA错配的异反应性NK细胞有望应用于异基因骨髓移植中降低GVHD。
- 曹东林陈伟马文丽
- 关键词:SIRNANK细胞
- 慢性粒细胞白血病患者PBMCs中CD4^+CD25^+细胞体外增殖及对CD4^+CD25^-细胞增殖的影响被引量:1
- 2008年
- 目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血单个核细胞(PBMCs)来源的CD4+CD25+细胞体外增殖及对CD4+CD25-细胞增殖的影响。方法以免疫磁性分离方法(MACS)分选出CML患者外周血单个核细胞中的CD4+CD25+及CD4+CD25-细胞后,用流式细胞仪分析细胞的纯度及活力;再以小鼠抗人CD3单抗、小鼠抗人CD28单抗及rh IL-2作为刺激因子,CD4+CD25+细胞与CD4+CD25-细胞共培养,观察CD4+CD25+细胞对CD4+CD25-细胞增殖的抑制效应。结果(1)分选后健康对照组及CML患者PBMC中CD4+CD25+细胞纯度分别为(84.93±2.55)%、(86.32±2.40)%,两者相比,无显著差异(P>0.05);(2)经MACS分选后正常对照组与CML患者CD4+CD25+细胞活力分别为(98.12±0.68)%、(97.33±0.78)%,两者相比,无显著差异(P>0.05);(3)无论是健康对照还是CML患者的CD4+CD25+细胞均具有明显抑制效应性细胞如CD4+CD25-细胞的增殖,随着CD4+CD25+细胞数的增加,这种抑制增殖的能力也相应增加,当CD4+CD25+T∶CD4+CD25-T为1∶1时,抑制率最大。结论MACS分选法能够分选出高纯度及高活力的CD4+CD25+细胞,分选后CD4+CD25+细胞在体外均能抑制CD4+CD25-细胞增殖,且这种抑制效应呈一定效靶比关系。
- 陈伟曹东林王玲
- 关键词:慢性粒细胞白血病细胞增殖
- 减低预处理剂量的异基因造血干细胞移植治疗难治性急性白血病
- 2006年
- 目的 探讨减低预处理剂量的异基因造血干细胞移植在难治性急性白血病治疗中的安全性和疗效.方法 6例难治性急性白血病,其中5例耐药复发,1例继发性白血病,经常规化疗2~11个疗程未能达到完全缓解.预处理方案为减低预处理剂量的BuCy方案.结果 除1例死于肠道Ⅳ度急性GVHD外,其余5例均获得造血重建,各脏器预处理相关毒性(RRT)大多数为Ⅰ~Ⅱ级,未发生严重预处理相关并发症.移植后11~24 d均有经DNA检测证实的完全供者嵌合.发生急性GVHD 4例,2例为Ⅳ度肠道GVHD,分别于+18 d和+64d死亡.1例为Ⅰ度皮肤GVHD治愈,1例先后出现Ⅳ度皮肤aGVHD和肝脏cGVHD经治疗得到良好控制,无白血病生存.3例移植后发生髓外软组织肿瘤(EMD),采用联合化疗+放疗、供者淋巴细胞输注(DLI),2例进行了二次移植,2例无病生存,1例带瘤生存.结论 减低预处理剂量的BuCy方案治疗难治复发性急性白血病,有较好的耐受性,可取得完全型供者细胞植入及血液学缓解,但有可能增加髓外复发的风险.
- 欧瑞明王玲郑丽玲陈伟杜苑苑谭友平
- 关键词:预处理异基因造血干细胞移植难治性急性白血病
- 姜黄素提高白血病KG1a细胞对同种异体NK细胞杀伤的敏感性及其分子机制探讨被引量:5
- 2011年
- 目的:研究姜黄素作用前后白血病KG1a细胞对同种异体自然杀伤(NK)细胞杀伤的敏感性变化,并初步探讨其分子机制。方法:以对同种异体NK细胞杀伤高度敏感的白血病K562细胞为对照,乳酸脱氢酶释放法检测KG1a细胞对同种异体NK细胞杀伤的敏感性,流式细胞仪检测细胞表面NKG2D配体(MICA/B、ULBP1、ULBP2、ULBP3)和HLA-Ⅰ类分子蛋白表达,逆转录PCR法检测细胞表面NKG2D配体和HLA-Ⅰ基因mRNA的表达水平。CCK-8法检测姜黄素对KG1a细胞半数抑制量(IC50),以此含量作用KG1a细胞,再次乳酸脱氢酶释放法检测姜黄素作用后的KG1a对同种异体NK细胞杀伤的敏感性,流式细胞仪检测姜黄素作用后的KG1a细胞表面NKG2D配体和HLA-Ⅰ类分子蛋白表达水平。结果:与K562细胞比较,KG1a细胞对同种异体NK细胞杀伤呈低度敏感,KG1a细胞表面NKG2D各配体蛋白表达阳性率均明显低于K562细胞(P<0.01),HLA-Ⅰ蛋白表达阳性率则明显高于K562细胞(P<0.01);在mRNA水平两种白血病细胞表面均有NKG2D配体和HLA-Ⅰ基因表达。当效靶比为5∶1、10∶1、20∶1时,姜黄素作用后NK细胞对KG1a细胞杀伤率明显高于作用前(P<0.01);作用后KG1a细胞各NKG2D配体表达率均明显升高(P<0.05或0.01),HLA-Ⅰ类分子无明显变化(P>0.05)。结论:姜黄素能提高KG1a细胞对同种异体NK细胞杀伤的敏感性,其机制可能与姜黄素提高KG1a细胞表面NKG2D配体的表达有关。
- 陈伟刘玉莹杜苑苑王玲
- 关键词:姜黄素白血病K562细胞自然杀伤细胞NKG2D配体细胞毒性实验
- 双氢青蒿素人对急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的诱导作用被引量:5
- 2011年
- 目的探讨双氢青蒿素诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的作用和机制。方法用二甲氧唑黄细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测双氢青蒿素对HL-60细胞生长的抑制作用,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞内线粒体膜电位变化,分光光度法检测细胞Caspase-3活性变化。结果双氢青蒿素对HL-60细胞生长有抑制作用,呈剂量依赖性,并能诱导HL-60细胞凋亡,使线粒体膜去极化,增强Caspase-3活性。结论双氢青蒿素能抑制人急性髓系白血病HL-60细胞生长,并诱导细胞凋亡,可能与线粒体凋亡通路有关。
- 陈伟王玲杜苑苑曹东林胡亮杉
- 关键词:双氢青蒿素线粒体途径凋亡
- 脐带源间充质干细胞可增强自然杀伤细胞对树突状细胞的杀伤活性被引量:5
- 2013年
- 目的观察脐带源间充质干细胞对自然杀伤细胞杀伤树突状细胞的影响,初步探讨其作用机制。方法胶原酶消化整个脐带组织,体外培养间充质干细胞;分离健康人外周血单个核细胞,磁珠分选树突状细胞。在白介素-4和粒单-集落刺激因子共同作用下获得大量未成熟树突状细胞,将脐带源间充质干细胞与未成熟树突状细胞共培养2 d,同时加入肿瘤坏死因子α,诱导树突状细胞成熟。流式细胞术检测诱导后树突状细胞CD11c和CD86的表达,ELISA法检测培养液中白介素-12的含量,乳酸脱氢酶释放法检测自然杀伤细胞对树突状细胞的杀伤活性,流式细胞术检测树突状细胞表面自然杀伤细胞活化性受体的配体(MICA/B和ULBP1-3)的表达。结果与单纯细胞因子诱导比较,脐带源间充质干细胞诱导后树突状细胞CD11c的表达无明显差异,但CD86的表达降低,IL-12的分泌量降低。自然杀伤细胞对脐带源间充质干细胞诱导后的树突状细胞的杀伤效率明显高于单纯细胞因子诱导后的树突状细胞。与单纯细胞因子诱导比较,脐带源间充质干细胞诱导后的树突状细胞活化性受体的配体(MICA和MICB)的表达增高。结论脐带源间充质干细胞能增强自然杀伤细胞对树突状细胞的杀伤活性,这可能与脐带源间充质干细胞抑制树突状细胞成熟,上调树突状细胞表面自然杀伤细胞活化性受体的配体有关。
- 赵一俏曹东林陈伟
- 关键词:脐带源间充质干细胞自然杀伤细胞树突状细胞杀伤
- 和厚朴酚提高人非霍奇金淋巴瘤Raji细胞对NK细胞杀伤敏感性的研究被引量:2
- 2012年
- 目的:探讨和厚朴酚(honokiol,HNK)作用前后人非霍奇金淋巴瘤Raji细胞对NK细胞杀伤敏感性的变化及其可能机制。方法:MTT法检测和厚朴酚对Raji细胞的增殖抑制作用。乳酸脱氢酶释放法检测HNK作用前后Raji细胞对NK细胞的杀伤敏感性。流式细胞仪检测HNK作用前后Raji细胞表面NKG2D配体(MICAB、ULBP1、ULBP2、ULBP3)和HLA-Ⅰ类分子的表达以及细胞周期变化。结果:HNK对Raji细胞的生长具有明显抑制作用。HNK作用后,Raji细胞对NK细胞的杀伤敏感性较HNK作用前显著增强(P<0.05)。HNK作用后,Raji细胞表面MICAB、ULBP2、ULBP3表达显著升高(P<0.05),ULBP1和HLA-Ⅰ类分子无明显变化(P>0.05),同时,细胞周期检测显示Raji细胞被阻滞在G0/G1期。结论:HNK能提高Raji细胞NKG2D配体(MICAB、ULBP1、ULBP3)的表达,从而使Raji细胞对NK细胞的杀伤敏感性增强,以达到杀伤肿瘤细胞的能力。
- 陈伟孙茂本谭友平
- 关键词:非霍奇金淋巴瘤和厚朴酚RAJI细胞NK细胞
- 坚持适宜医疗的举措与成效
- 2012年
- 通过提升技术服务能力、优化治疗方案的选择、加强应急医疗建设、制定完善与适宜医疗相支撑的配套制度等一系列举措,坚持开展适宜医疗,取得提高卫生资源使用效率、促进医院改革、推进行风建设、和谐医患关系、推进持续发展的可喜成效。
- 黄位耀田军章赵一俏陈伟刘玉莹
- 在线式不间断电源设备安全监控系统设计
- 2023年
- 为有效解决医疗机构不间断电源系统(UPS)电压过冲和爆燃事故,采用大功率变流技术、数字控制技术、并联冗余技术、有源功率因数校正技术、散热技术、智能监控技术、大功率产品制造技术等关键技术,并结合安全链条安全用电数字化终端体系,根据医疗机构的场景特点和需求,设计在线式不间断电源设备安全监控系统。
- 杨卫国蔡伟陈伟
- 关键词:不间断电源安全管理