阎浩林
- 作品数：32 被引量：144H指数：8
- 供职机构：沈阳药科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金微生物药物技术创新与新药创制产学研联盟更多>>
- 相关领域：化学工程生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 阿维菌素产生菌的生物技术改造研究进展被引量：5
- 2005年
- 目的综述近年来运用基因工程技术对阿维菌素产生菌改良的研究进展。方法在查阅国内外文献近100篇的基础上,介绍了阿维菌素的生物合成途径,产生多组分的3个关键酶及阿维菌素产生菌改良的研究进展,包括选择性生产有效组分,产生新抗生素、杂合抗生素,改进生产工艺以及提高菌种产抗生素量。结果目前国内外均已经构建了只产生B组分及寡霉素基因缺失或失活的工程菌。分别运用突变结合理性化筛选和特定基因重组提高活性高的组分的产量,并且通过基因改造产生多种阿维菌素的衍生物;将透明颤菌的血红蛋白基因引入阿维菌素产生菌,改进氧的供应,阿维菌素的产量不断提高。阿维菌素生物合成调控机制和组合生物学改造聚酮合成酶等方面仍需深入研究。结论利用生物技术改造阿维菌素产生菌在组分改造、结构修饰、产品收率、生产工艺改进等方面已取得显著进展。对阿维菌素和其他聚酮体药物产生菌的生物合成、基因改造起着重要作用,使生产简化,成本降低,药物应用更广泛。
- 刘婷婷蔡苏兰阎浩林
- 关键词：阿维菌素阿维链霉菌菌种改良生物技术
- 温和气单孢菌YH311硫酸软骨素裂解酶的分离纯化与固定化被引量：3
- 2004年
- 通过硫酸铵沉淀、QAE SephadexA5 0柱层析及SephadexG 1 5 0凝胶过滤等纯化步骤 ,对源自温和气单孢菌YH31 1的ChSase进行了分离纯化。结果表明 ,ChSase经上述纯化步骤后被纯化了 5 5倍 ,其最终纯度可达 95 %以上 ,比活为 31 86u mg。经SDS PAGE及IFE测定可知该酶的分子量约为 80kD ,等电点为 4 3～ 4 8。将纯化后的ChSase用海藻酸钠或纤维素固定化后 ,ChSase的热稳定性及贮存稳定性均可得到大幅度的提高 :固定化酶用 80℃水浴处理 1 2 0min或于 4℃冰箱放置 30d后仍可保留 5 0 %以上的相对活力 ;但固定化酶的收率较低 ,仅为 1 8 5 6 %和1 8 86 %。
- 蔡苏兰阎浩林何汉洲
- 关键词：分离纯化固定化酶海藻酸钠纤维素
- 利用稻瘟霉分生孢子筛选有生物活性的菌株被引量：16
- 1998年
- 从广西、贵州等地土壤中分出４１７株真菌．以稻瘟霉分生孢子及菌丝生长异常或抑制为指标，从４１７株真菌中初筛出７４株活性菌株．经多次反复筛选从中得到１３株活性较好且稳定的菌株．其中７株能引起稻种幼根肥大，但不抑制细菌生长．对其中变形活性最好的３８号菌株进行紫外照射诱变处理，使活性由 ６３ μｌ·ｍＬ－１提高到１６ μｌ·ｍＬ－１，其遗传稳定性和热稳定性良好．对其中抑制活性最好的１９０１和 ７４号菌株进行抗真菌实验也显示了较好的活性．
- 杨君邵刚姚新生齐秀兰阎浩林马莉朱跃芳
- 关键词：真菌活性稻瘟霉分生孢子
- 酵母SOD分离纯化及其酶学性质的研究被引量：14
- 2005年
- 目的发酵培养Y12 酵母菌分离制备酵母SOD并研究其部分酶学性质。方法用已筛选出的一株Y12 酵母菌对其在优化培养条件下发酵培养得到湿菌体 ,破壁抽提得SOD粗酶液 ,采用硫铵盐析、丙酮沉淀、SephadexG 10 0凝胶过滤和QAE SephadexA 5 0离子交换柱层析 ,分离得到酵母SOD并测定其部分酶学性质。结果Y12 酵母菌SOD产量达 12 6 3u·g-1湿菌体 ,分离得到酵母SOD ,该酶属Cu、Zn SOD ,比活力为 10 73 5u·mg-1,活力回收率为 5 4 1% ,紫外吸收峰在2 5 7 2nm ,分子质量为 32 4 5 6u ,亚基分子质量为 16 2 2 7u。结论此酵母SOD与文献中报道的动物血红细胞Cu、Zn SOD基本相近。
- 苏昕阎浩林梁丽莉
- 关键词：分离纯化酶学性质
- 大孔树脂D380固定化硫酸软骨素裂解酶被引量：3
- 2010年
- 目的以大孔树脂D380为载体,戊二醛为交联剂,进行硫酸软骨素裂解酶(ChSase)的固定化,并考察固定化酶的酶学性质。方法分别考察加酶量、吸附温度、吸附时间、吸附pH值、戊二醛交联浓度、交联时间及交联温度对ChSase固定化效果的影响,并分析该固定化酶的最适反应温度、最适反应pH值、米氏常数(Km)及其操作稳定性。结果ChSase的最佳固定化条件为:加酶量150U/g树脂,吸附温度15℃,吸附时间6h,吸附pH值7.0,戊二醛交联浓度0.01%,交联时间3h,交联温度4℃。以此条件制备的固定化酶,其酶结合效率可达79.1%。该固定化ChSase的最适反应温度为45℃;最适反应pH值为7.0;Km达1.46×10-1g/L,较游离酶高;具有较好的操作稳定性。结论以大孔树脂D380为载体固定化ChSase是可行的,所得固定化酶有较高的使用效率和稳定性,适合于工业化生产。
- 牛海滨蔡苏兰阎浩林刘婷婷
- 关键词：固定化
- 蠕虫NADH-延胡索酸还原酶模型优化及沃特曼内酯F的活性评价被引量：1
- 2012年
- 目的优化蠕虫NADH-延胡索酸还原酶及哺乳动物NADH氧化酶的高通量筛选模型,评价沃特曼内酯F的活性及选择性。方法提取猪蛔虫和猪心线粒体,对温度、pH、NADH浓度和线粒体浓度等参数进行优化,确定最适宜反应条件。在最佳反应条件下测定沃特曼内酯F对猪蛔虫NADH-延胡索酸还原酶和猪心NADH氧化酶的抑制活性。结果猪蛔虫NADH-延胡索酸还原酶最佳反应条件为37℃,pH 6.5,NADH浓度为0.18 mmol/L,线粒体浓度为0.025 g/L。沃特曼内酯F的IC_(50)为5.0 nmol/L:对于猪心NADH氧化酶的IC_(50)大于6.2μmol/L。结论沃特曼内酯F是一种选择性猪蛔虫NADH-延胡索酸还原酶的抑制剂,抑制活性达到了nmol/L级,具有成为新型抗蠕虫药物的潜力。
- 李原刘文财孙文龙董悦生阎浩林
- 关键词：抗蠕虫药
- Streptomyces griseochromogenes菌株milbemycin生物合成基因簇的筛选被引量：2
- 2001年
- 经BamHI酶切的柯氏质粒pku4 0 3与MboⅠ部分消化并经碱性磷酸酶处理的Streptomycesgriseochromogenes染色体DNA片段相连接 ,体外包装后 ,转化大肠杆菌E .coliJM1 0 8,挑取转化子1 1 5 2个 ,构建Streptomycesgriseochromogenes的基因文库。分别以avermectin聚酮体合成酶 (PKS)的酰基转移酶基因 (AT)、酮基合成酶基因 (KS)及参与avermectin生物合成的内酯化酶基因(aveE)、C5 O 甲基转移酶基因 (aveD)为探针 ,利用菌落原位杂交、核酸杂交和以烯酰基还原酶基因(ER)引物的PCR扩增等手段 ,从文库中筛选出 2 4个阳性克隆。根据克隆DNA之间的重叠关系 ,将阳性克隆分为 7组 ,这
- 阎浩林IKEDA HaruoMURA Satoshi
- 关键词：基因文库核酸杂交链霉菌
- 酵母菌中超氧化物歧化酶的研究被引量：3
- 1999年
- 通过对9株酵母菌SOD含量的测定比较，选出1株Y12酵母菌其生物量及酶含量均较高。同时对此菌产SOD酶的营养，培养条件及破壁提取方法进行初步研究，结果表明它们对该菌株SOD酶含量及菌体生物量影响较大，并进一步确定出最佳生理条件，找到了种较优的破壁提取法：冻融──酶解法，使SOD活力得以大大提高。
- 苏昕阎浩林刘恕
- 关键词：生理条件SOD
- 白桦酯酸及其衍生物的研究概况被引量：13
- 2005年
- 目的总结白桦酯酸及其衍生物的各种药理活性及制备方面的研究概况,进一步提出对这类天然产物的研究开发方向。方法检索查阅了国内外近10年来的30多篇有关文献和专利。结果与结论白桦酯酸及其衍生物具有显著的抗肿瘤、抗HIV和抗茵等活性,目前尚处于临床前的研究阶段,具有可预见的开发前景。
- 周映霞王振国马莉阎浩林
- 关键词：抗肿瘤抗HIV抗菌药理活性
- 还原型谷胱甘肽发酵及分离纯化条件的优化被引量：3
- 2013年
- 旨在通过优化还原型谷胱甘肽的发酵及分离纯化条件,为GSH大规模的工厂化生产提供理论基础。首先通过筛选获得一株GSH高产菌酿酒酵母Y18,其胞内GSH含量为9.05 mg/g干菌体。进一步研究表明,在培养基中添加L-半胱氨酸和缬氨酸,以及发酵过程中补加葡萄糖可使GSH的总产量分别提高62.0%和146.1%。此外,对GSH在水溶液中稳定性的研究发现偏酸性环境(pH4.5)和氮气保护可显著降低GSH的损失率。最终通过对大孔树脂D001×7和Sephadex G-10的分离纯化条件的优化,获得纯度为98.1%的GSH,收率为73.2%。
- 王硕谢跃武张惠文阎浩林徐明恺
- 关键词：酿酒酵母还原型谷胱甘肽发酵分离纯化
