闫俊灵
- 作品数：7 被引量：53H指数：5
- 供职机构：武警总医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 体外扩增自体脂肪干细胞对空鼻综合征患者黏膜功能重建的临床研究被引量：9
- 2014年
- 目的分析、评估采用自体脂肪干细胞（ASCs）重建空鼻综合征（ENS）患者鼻黏膜功能的可行性和有效性。方法选取2013年8月-2014年2月武警总医院收治的ENS患者5例,每例患者抽取自体脂肪组织15～20ml,于体外进行脂肪干细胞的分离、培养,扩增至第3代时进行细胞免疫表型、分化情况及遗传稳定性鉴定。对有鼻甲残留的ENS患者（n=3）,在鼻黏膜受损处进行ASCs注射移植,隔10日1次,共4次;对无鼻甲残留的ENS患者（n=2）,在鼻黏膜受损处进行ASCs注射移植3次后,抽取其自体单纯脂肪颗粒1～5ml,与第3～6代ASCs混合后行鼻内下鼻甲或中鼻甲成形术。治疗前和治疗后3、6、9个月行鼻内镜检查前后对比,SNOT-20问卷调查、鼻声阻力和鼻黏膜纤毛清除功能所得数据进行统计学分析。结果 2例无鼻甲残留ENS患者行第3～6代ASCs注射移植及3例有鼻甲残留的ENS患者行ASCs联合脂肪颗粒移植后3、6、9个月,鼻内镜检查显示鼻甲成形无明显吸收,鼻腔黏膜明显改善,SNOT-20评分亦明显改善,差异有统计学意义（P〈0.05）。与治疗前比较,5例患者鼻甲成形术后鼻声阻力和鼻黏膜纤毛清除功能无明显变化（P〉0.05）。结论采用脂肪干细胞联合自体脂肪移植行鼻甲成形术重建黏膜功能,可明显改善ENS患者的症状,且效果稳定,是一种新的有助于ENS黏膜修复的治疗方法。
- 李梁贾德进闫俊灵陈冲丁红汤苏阳
- 关键词：空鼻综合征脂肪干细胞鼻黏膜
- 人脂肪来源间充质干细胞的制备及其质量检验方法被引量：4
- 2015年
- 目的研究人脂肪来源间充质干细胞(human adipose-derived stem cells,h ADSCs)的制备及其质量检验方法,为临床研究提供安全合格的干细胞。方法取50例人吸脂术抽取的脂肪,剪碎,用胰酶和胶原酶消化、分离、培养,并按照《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则》对其进行细胞形态、数量、活率、无菌、支原体、人源特定病毒及猪源病毒、内毒素、免疫抑制活性、分化能力、免疫表型等检测及染色体核型。结果 50例h ADSCs;细菌、内毒素检测阴性,无内外源致病菌;干细胞免疫表型检测CD90、CD105表达阳性,阳性率>95%,CD34、CD45和HLA-DR表达阴性,阳性率<2%;具有成骨、成脂分化潜能;能抑制异体淋巴细胞的增殖。间充质干细胞活性冻存前≥92%,冻存复苏后≥82%。结论按照本工艺及标准制备的h ADSCs符合质量控制标准,为同类干细胞制备及其检定过程标准化提供了试验依据。
- 陈冲闫俊灵李梁徐潇丁红汤苏阳
- 关键词：脂肪干细胞间充质干细胞免疫表型分化潜能染色体核型分析
- 体外诱导脂肪来源干细胞向黏膜上皮细胞分化的研究被引量：5
- 2015年
- 目的探讨在体外诱导脂肪来源干细胞(ADSCs)分化为黏膜上皮细胞的可能性。方法获取成年人皮下脂肪组织,进行ADSCs的分离、培养,扩增至第三代进行细胞免疫表型、分化情况及遗传稳定性鉴定。分别采用含10%胎牛血清、8μg/L表皮生长因子(EGF)、10%胎牛血清+8μg/L EGF、10%胎牛血清+8μg/L EGF+30%成纤维细胞培养基、10%胎牛血清+30%成纤维细胞培养基的DMEM培养液进行培养,于培养前及培养后7、14d观察各组细胞的光镜特征,采用免疫组织化学染色检测特异性细胞表面标记物的表达以及Western blotting方法检测诱导前后ADSCs中CK-7、CK-14的蛋白表达水平。结果与未加EGF诱导剂培养组比较,经EGF诱导14d后多数ADSCs细胞形态、排列方式发生改变。CK-19免疫组化染色显示呈强阳性。Western blotting检测结果提示诱导后的黏膜上皮细胞特异性蛋白CK7、CK14呈高表达。结论 ADSCs在一定诱导条件下可向黏膜上皮样细胞分化。
- 王程徐潇陈冲李梁闫俊灵汤苏阳
- 关键词：脂肪干细胞上皮样细胞细胞分化
- 体外扩增的自体脂肪干细胞介导自体脂肪移植的临床研究被引量：16
- 2013年
- 目的探讨并评估体外扩增的自体脂肪干细胞介导自体脂肪移植的治疗效果。 方法实验组50例患者经过自体脂肪干细胞分离、培养、体外扩增后，介导自体脂肪颗粒注射移植，充填面部塑形、隆胸，随访6~24个月。手术分为两期，第一期：取患者自体脂肪颗粒细胞15~20 ml，进行体外分离、培养、扩增，扩增至第3代，进行细胞免疫表型、分化潜能、遗传稳定性鉴定。第二期：20~25 d 后，抽取一定量的患者自体脂肪颗粒混合第5~6代自体脂肪干细胞移植，用于鼻部、颏部、额部及颞部等面部充填塑形和隆胸。对照组10例患者，单纯自体脂肪移植。 结果第3~6代自体脂肪干细胞具有典型的间充质干细胞特征，并保持了遗传稳定性。脂肪移植6~24个月后，回访无明显脂肪吸收现象，塑形效果良好。 结论自体脂肪干细胞介导的自体脂肪移植术具有微创、移植脂肪成活率高、成形效果好等优点，是具有发展前途的、值得推荐的再生医学技术。
- 汤苏阳李彦闫俊灵陈冲李梁丁红原理
- 关键词：免疫表型分型修复外科手术
- 脂肪干细胞介导的自体脂肪移植隆胸被引量：21
- 2013年
- 背景:脂肪干细胞具有多向分化潜能,在组织工程和再生医学领域具有广阔的应用前景。目的:随访评估脂肪干细胞在自体脂肪移植隆胸中的技术要点及治疗效果。方法:随访15例自体脂肪颗粒注射隆胸患者3-6个月。脂肪移植隆胸过程分为两期,一期用于脂肪干细胞的分离与扩增,抽出脂肪量为10-20mL。用胶原酶Ⅰ消化,贴壁培养获得脂肪干细胞,扩增至第2代达到1×108,并进行细胞免疫表型,分化及遗传稳定性鉴定。二期抽取脂肪量300-450mL,脂肪混合脂肪干细胞用于移植填充。结果与结论:第2代自体脂肪干细胞具有典型的间充质干细胞的特征,移植后3-6个月回访无明显脂肪吸收现象,无感染、疼痛、上肢活动受限等不良反应,隆胸效果良好。作者认为自体脂肪干细胞介导的自体脂肪注射隆胸是一种切实可行有效的方法。
- 闫俊灵狄国虎丁红张巍刘嘉琦汤苏阳
- 关键词：器官移植免疫表型分化潜能隆胸自体脂肪颗粒注射
- 人脂肪来源间充质干细胞库的初步建立
- 2016年
- 目的探讨建立生物学性状稳定的人脂肪来源间充质干细胞(h ADSCs)库的可行性,旨在为组织工程种子细胞提供更多来源。方法对分离得到的h ADSCs采用液氮低温冻存,并在一定时间复苏培养,以流式细胞仪检测其表面抗原,在诱导培养基中对其进行成脂和成骨诱导培养,光镜下观察细胞形态,免疫组织化学方法检测成骨诱导的特异标志物碱性磷酸酶(ALP)的表达,观察h ADSCs在复苏前后的分化能力。结果从脂肪组织中分离培养扩增获得数目稳定的h ADSCs,经冻存并复苏后的h ADSCs形态和表面抗原保持不变,可继续扩增10代以上,倍增时间为48h。复苏后第2、第6、第10代h ADSCs均保持了较强的成脂及成骨分化能力。结论初步建立h ADSCs库,可为再生医学修复重建组织工程提供较好的种子细胞。
- 徐潇张旭毅闫俊灵陈冲赵欣李明辉汤苏阳
- 关键词：干细胞库
- 自体脂肪源性干细胞联合无菌生物护创膜对慢性创面愈合的影响被引量：13
- 2016年
- 目的评估自体脂肪源性干细胞(ADSCs)联合无菌生物护创膜对慢性创面愈合的作用。方法选取武警总医院收治的60例慢性创面患者,随机分为凡士林油纱组(A组)、无菌生物护创膜组(B组)、ADSCs联合无菌生物护创膜组(C组),每组20例。观察3组创面愈合情况、愈合时间及治疗后7、21、40d时的创面愈合率,治疗前、治疗7d、治疗14d时创面上皮基底层细胞增殖情况及治疗后50d创面上皮化情况,计数治疗前和治疗后7d创面上皮基底层新生微小血管密度(MVD)。结果与A、B组创面愈合情况比较,C组创周炎性反应轻,肉芽组织形成好,创缘上皮爬行速度快,且B组创面愈合情况好于A组。创面愈合时间A组>B组>C组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。3组治疗后各时间点创面愈合率、创面上皮基底层增殖细胞数、新生微小血管密度比较均为C组优于B组优于A组,差异有统计学意义(P<0.05),治疗后50d创面上皮化情况亦为C组优于B组优于A组。结论自体ADSCs联合无菌生物护创膜可明显改善慢性创面修复细胞的增殖状态,促进创面血管再生,改善创面局部生长环境,加速创面愈合。
- 李明辉刘洋陈冲徐潇闫俊灵李梁王程赵欣丁红汤苏阳
- 关键词：慢性创面干细胞脂肪源性
