钱柯帆
- 作品数：12 被引量：4H指数：2
- 供职机构：南开大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 钙通道及钙通道阻断剂对白念珠菌生物膜的影响
- 白念珠菌在侵染宿主的过程中，能够在宿主内表面及植入的生物材料表面定殖并形成生物膜，这是白念珠菌深度侵染宿主并产生耐药性的重要原因.钙离子不仅参与胞内基础代谢，维持内质网、高尔基体等重要细胞器的生理功能，而且作为一种多功能...
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- 关键词：白念珠菌生物膜钙通道维拉帕米
- HACS调控因子Ecm7在白色念珠菌钙稳态维持,氧化压力应答及致病性方面的功能研究
- 钙离子作为一个重要的第二信使,在真核细胞应对外界环境压力方面发挥重要作用。在酵母细胞中,Cch1和Mid1作为高亲和性钙离子内流系统(HACS)的组成成分,在细胞应对外界刺激时迅速被激活,从而介导胞外钙离子的大最内流。最...
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- 关键词：白色念珠菌
- 白色念珠菌线粒体转运蛋白Mrs4在细胞生长、离子稳态和菌丝发育中的功能研究
- 白色念珠菌是一种重要的条件致病性真菌,其致病性与胞内离子代谢以及形态转换能力密切相关.本研究首次在白色念珠菌中鉴定出一种参与铁离子代谢的线粒体转运蛋白家族成员Mrs4.白色念珠菌Mrs4除含有线粒体转运蛋白家族所特有的三...
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- 关键词：白色念珠菌
- 几种白念珠菌高铁还原酶基因的功能研究
- 2014年
- 【目的】高铁还原酶在白念珠菌铁离子获得过程中发挥着重要作用。通过研究高铁还原酶基因的功能和表达调控,揭示其不同的环境应答策略。【方法】通过Northern杂交的方法分析不同低铁环境对高铁还原酶基因表达水平的影响。构建高铁还原酶基因缺失菌株,探究基因缺失后对细胞表面高铁还原酶活力和生长状况的影响。利用激光共聚焦显微镜观察Frp1蛋白的细胞学定位。【结果】酸性条件显著上调FRE10基因的表达水平,而碱性条件能显著提高FRE2基因的表达量。在酸性条件下,FRE10基因的缺失会显著地下调细胞表面高铁还原酶活力。在碱性条件下,fre2Δ/Δ缺失菌株表现出严重缺陷的生长能力和显著降低的表面高铁还原酶活力。细胞学定位实验发现Frp1蛋白位于液泡中。【结论】FRE2和FRE10基因的表达模式主要是酸碱依赖性的。Fre2是碱性条件下高铁还原酶活力的主要贡献者。Frp1蛋白位于液泡中,在液泡内储存铁的活化和转运过程中可能发挥重要作用。
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- 关键词：白色念珠菌
- 白念珠菌液泡钙通道Yvc1在白念珠菌形态发生及压力应答中的功能
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- 白念珠菌高铁还原酶CFL1基因功能研究
- 白念珠菌(Candida albicans)作为一种常见的临床条件性致病真菌，因其极高的感染率及复杂的致病机制受到国内外研究人员的广泛关注。铁离子是生命体必须的营养元素之一，具有氧化还原的特性在细胞代谢过程中发挥重要的作...
- 钱柯帆
- 关键词：白念珠菌基因功能致病机制
- 文献传递
- 白念珠菌铁通透酶基因CaFTH1的功能研究
- 2013年
- 【目的】白念珠菌CaFTH1是一种铁通透酶编码基因。为了研究CaFTH1对胞内铁代谢和液泡功能的影响,构建fth1/单基因缺失菌株和fth1/fet33/双基因缺失菌株。【方法】利用生物信息学软件对CaFTH1进行序列比对和分析;通过实时荧光定量PCR技术研究铁离子丰度对CaFTH1表达的影响;利用PCR介导的同源重组方法构建基因缺失菌株;利用原子吸收光谱方法测定基因缺失菌株胞内铁含量的变化,并对基因缺失菌株在缺铁条件和菌丝诱导条件下的生长状况进行研究;通过代谢转换实验,研究CaFTH1对细胞液泡功能的影响。【结果】序列比对结果表明白念珠菌CaFth1蛋白属于铁通透酶Ftr1超家族,与酿酒酵母液泡膜蛋白ScFth1具有最高的同源性。铁匮乏条件会诱导CaFTH1的表达,而富铁条件则会抑制其表达。白念珠菌CaFTH1的缺失会导致胞内铁含量的降低,fth1/突变菌株基础上CaFET33的缺失则会进一步降低胞内铁含量。在缺铁条件下,fth1/fet33/双基因缺失菌株在一定程度上表现出代谢转换能力的缺陷。另外,在某些固体菌丝诱导培养条件下,fth1/fet33/缺失菌株菌落表面形成褶皱能力显著增强;而在液体菌丝诱导条件下,则表现为增强的菌丝聚集能力。【结论】CaFTH1是一种低铁应答基因,在维持白念珠菌胞内铁离子稳态及液泡功能方面具有重要作用。CaFTH1和CaFET33基因的双缺失会对白念珠菌的菌落形态和菌丝聚集产生影响。
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- 关键词：白念珠菌铁代谢液泡菌落形态
- 分段DNA shuffling:一种大分子海藻糖合酶有效的定向进化方法被引量：2
- 2013年
- 【目的】红色亚栖热菌(Meiothermus ruber)海藻糖合酶(Trehalose synthase,M-TreS)将麦芽糖转化生成海藻糖只需一步反应,且具有很好的热稳定性及pH耐受性,是潜在的工业生产海藻糖的酶源。为了提高该酶的性能,有必要对其进行定向进化。【方法】M-TreS基因(M-treS)大小为2 889 bp。该蛋白质分子本身具有很大的进化空间,但是却不宜进行全长基因Shuffling。分段DNA shuffling是为大分子蛋白质(基因≥2 000 bp)的进化而设计的一种方法。该方法分为三步:(1)用两对引物分别扩增目的基因的上游片段和下游片段;(2)上下游片段各自进行Shuffling;(3)利用重叠延伸PCR连接上下游突变群,建立完整基因的突变文库。【结果】结合易错PCR,通过该方法经一轮进化获得一株酶活力是野生型1.6倍、催化效率是野生型2倍的突变株。序列分析表明,该突变株共有6个位点发生了氨基酸的替代,其中一个来自易错突变,2个来自同源重组,3个为随机突变。【结论】分段DNA shuffling是进化大分子蛋白质的有效方法。
- 刘艳超王宇凡钱柯帆张峻肖辰鹏邢来君李明春
- 关键词：海藻糖合酶定向进化易错PCRSHUFFLING
- 白念珠菌胞内铁离子存储转运系统的研究进展被引量：2
- 2014年
- 白念珠菌是一种常见的条件致病性真菌。为了在宿主体内复杂的铁离子微环境中定居、生长和繁殖,该菌在长期的进化过程中演化出一系列复杂的铁离子稳态调控网络,包括位于细胞膜表面的铁离子吸收系统和位于细胞内的铁离子储存、转运及利用系统。本文结合课题组研究工作,简要综述近几年关于铁离子吸收、储存及转运机制的研究进展,主要关注细胞内铁离子的储存、转运,尤其是线粒体在胞内铁离子代谢及稳态维持方面的作用。
- 钱柯帆董义杰徐宁喻其林邢来君李明春
- 关键词：白念珠菌线粒体
- 白色念珠菌高铁还原酶基因CaCFL1的功能研究
- 钱柯帆徐宁程欣欣喻其林丁晓慧张冰邢来君李明春
