钟民涛
- 作品数:71 被引量:148H指数:7
- 供职机构:大连医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 医学微生物学设计性实验教学探索被引量:8
- 2013年
- 医学微生物实验教学是医学微生物学的重要的组成部分,其教学效果的好坏直接影响到医学生今后的实践能力。而设计性实验有助于提高学生的动手能力、独立分析解决问题的能力,使学生对知识的掌握更加坚实本文从更新教师教学理念,科学设计实验课程体系、优化实验教学内容、实验平台同步对接四个方面阐述了设计性实验在医学微生物实验教学中的应用。
- 李星云钟民涛刘欣王晓丽张伟杨淑凤邓国英黄敏
- 关键词:医学微生物学实验教学设计性实验
- 香菇C_(91-3)转录本Unigene8290基因结构域片段的克隆表达及其抗肿瘤活性初步研究
- 2016年
- 目的通过对香菇C91-3转录组进行筛选,并克隆表达含RCC1(染色体浓缩调控蛋白)和ANK(锚蛋白)结构域的Unigene8290基因,研究其抗肿瘤活性。方法从香菇C91-3菌丝体中提取总RNA,反转录合成cDNA,并利用Rapid Amplification of cDNA Ends(RACE)技术获得基因全长。生物信息学分析其结构域。设计特有引物,采用PCR技术扩增该结构域,将其克隆产物与pET-32a(+)载体连接,热转化至E.coil Rosetta-gami(DE3)中诱导表达,纯化、复性后,通过MTT法研究其抗肿瘤活性。结果生物信息学显示Unigene8290基因具有RCC1和ANK结构域,琼脂糖凝胶电泳与测序结果显示Unigene8290基因的结构域片段与pET-32a(+)载体重组成功,SDS-PAGE与Western blot结果显示Unigene8290蛋白成功表达,MTT结果显示该重组融合蛋白对HepG2细胞生长具有明显的抑制作用,并且其抑制作用存在一定的时间和浓度依赖性。结论成功诱导Unigene8290的RCC1和ANK结构域蛋白表达,并初步鉴定其具有抑制HepG2肿瘤细胞增殖活性的功能。
- 郭雪芳阮文静王晓丽沙丽李星云刘奔张伟高一凡曹婧宁安红黄敏钟民涛
- 关键词:生物信息学结构域
- 香菇C91-3菌丝发酵蛋白对H22肿瘤细胞体内外抗肿瘤机制的初探被引量:6
- 2011年
- 目的探讨香菇C91-3菌丝发酵蛋白(LFP91-3)对H22肿瘤细胞抑瘤作用及相关机制。方法应用不同剂量LFP91-3(50、100和150μg)对H22荷瘤小鼠腹水瘤模型和腋下实体瘤进行治疗,观察其生存期和体内抑瘤作用;并用MTT法(LFP91-3浓度5、10、15μg/mL)和流式细胞仪对经LFP作用的H22肿瘤细胞进行观察和检测。结果香菇C91-3菌丝发酵提取蛋白(LFP91-3)能延长H22荷瘤小鼠的生存期,对体外培养的H22有直接杀伤作用,抑瘤率出现对浓度和时间的依赖性。LFP91-3能将H22肿瘤细胞株细胞周期阻滞到S期并诱导出细胞凋亡。结论 LFP91-3在体内、外对H22肿瘤细胞有较好的抑瘤作用,主要是诱导其调亡。
- 钟民涛王晓丽李星云刘磊刘颖丽张伟黄敏
- 关键词:抗肿瘤细胞周期
- 香菇C_(91-3)转录本Unigene1245基因的克隆表达及其抗肿瘤活性
- 2017年
- 目的克隆香菇C_(91-3)转录本中Unigene1245基因并进行生物信息学分析,研究其编码蛋白的抗肿瘤活性。方法提取香菇C_(91-3)菌丝体总RNA,反转录合成cDNA,经RACE技术获得Unigene1245基因编码序列,通过NCBI对其进行生物信息学分析。设计特异性引物进行PCR扩增,将其克隆到载体pET-32a(+)上,将重组表达质粒热转化至E.coli Rosetta-gami(DE3)中,进行目的蛋白的诱导表达、纯化及复性,通过CCK-8法检测其抗肿瘤活性。结果香菇C_(91-3)转录本Unigene1245基因为YjgF/YER057c/UK114家族成员,成功诱导表达其编码蛋白,CCK-8法结果显示该蛋白对人肝癌HepG2细胞的增殖具有一定抑制作用,且具有一定的时间及浓度依赖性。结论成功克隆并诱导表达Unigene1245基因,并鉴定其具有抑制HepG2细胞增殖的能力,为后续探究抗肿瘤机制奠定了基础。
- 邵立群栾杭琪王钰张伟钟民涛王晓丽李星云沙丽黄敏
- 关键词:克隆抗肿瘤
- 铜绿假单胞菌分泌性蛋白的抗肿瘤效应被引量:1
- 2017年
- 目的探讨3株不同来源的铜绿假单胞菌分泌性蛋白的抗肿瘤活性。方法将3株不同来源的铜绿假单胞菌经LB培养基对其过夜静置培养,离心获得上清液,采用硫酸铵盐析沉淀蛋白质,再经PBS透析除盐。然后将蛋白作用于人肝癌细胞Hep-G2、宫颈癌细胞HeLa、肺癌细胞A549和人永生化表皮细胞HaCaT,CCK-8检测其对细胞的毒性作用,吉姆萨染色观察凋亡细胞形态变化。结果 SDS-PAGE证实成功获得不同分子量的分泌蛋白,CCK-8结果显示混合蛋白对3种不同肿瘤细胞的生长均有不同程度的抑制作用,且其抑制作用存在一定的时间和浓度依赖性,但对人正常细胞无明显抑制作用。吉姆萨染色初步显示细胞形态为凋亡状态。结论初步证实该3株铜绿假单胞菌产生的分泌性蛋白具有不同程度的抗肿瘤作用,为进一步分离纯化具有抗肿瘤活性的单一蛋白质及研究其抗肿瘤机制提供依据。
- 刘敏郭雪芳陈磊曹婧宁安红黄敏钟民涛
- 关键词:铜绿假单胞菌分泌蛋白抗肿瘤活性
- 从香菇C91-3菌株中提取抗氧化、抗肿瘤Latcripin-3基因片段的方法
- 本发明公开一种从香菇C91-3菌株中提取抗氧化、抗肿瘤<I>Latcripin</I>-3基因片段的方法,依次按如下步骤进行:提取香菇C91-3菌株的菌丝体总RNA;将菌丝体总RNA反转录合成CDNA;以所得到的cDNA...
- 黄敏安晓华钟民涛伦永志张伟王晓丽刘奔李星云曹婧宁安红
- 文献传递
- 长爪沙鼠速发型高脂血症模型的建立及与动脉粥样硬化相关性分析
- 本研究建立长爪沙鼠速发型高脂血症模型的方法,探讨其高脂血症的发生,发展及与动脉粥样硬化的相关性。
研究方法为高胆固醇组用含1﹪胆固醇高脂饲料分别饲养大、小鼠和沙鼠,检测其血清TC,HDL-C,LDL-C,TG;高脂...
- 钟民涛
- 关键词:高脂血症动脉粥样硬化脂肪肝动物模型
- 文献传递
- 香菇C91-3菌株的Latcripin-5基因片段、编码蛋白及制备方法
- 本发明公开一种香菇C91-3菌株的Latcripin-5基因片段、编码蛋白及制备方法,Latcripin-5基因片段,具有如SEQ ID NO:1 所示的核苷酸序列;编码蛋白具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。...
- 黄敏刘奔曹淑云钟民涛伦永志张伟李星云王晓丽曹婧宁安红
- 文献传递
- 抗肿瘤真菌蛋白的研究进展被引量:7
- 2007年
- 药用真菌具有明显的抗癌作用。以往认为多糖是真菌抗肿瘤活性的主要成分,但真菌中分离出的真菌免疫调节蛋白、凝集素、核糖核酸酶等蛋白质,具有提高机体免疫、抑制细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡等抗肿瘤活性。真菌蛋白质是另一种重要的生物活性物质,对其抗肿瘤活性和机制的研究有广大的开发空间和挖掘潜力。
- 李星云黄敏宁安红钟民涛
- 关键词:真菌抗肿瘤药
- 长爪沙鼠的高脂血症与动脉粥样硬化相关性分析被引量:7
- 2006年
- 目的探讨沙鼠高脂血症与动脉粥样硬化的相关性。方法用含1%胆固醇+10%猪油+10%蛋黄粉的高脂饲料饲养沙鼠120 d,检测血清总胆固醇(TC),高密度脂蛋白胆固醇(HDL_c),低密度脂蛋白胆固醇(LDL_c),血清甘油三酯(TG)的变化,在120 d时处死动物,取各组织作形态学观察。结果高脂组沙鼠的TC、HDL_c、LDL_c的值一直都明显高于对照组,以LDL_c升高为主,且出现了严重的脂肪肝,肝硬化,脾脏肿大和主动脉根部粥样硬化。结论加重高脂血症的程度能导致长爪沙鼠形成动脉粥样硬化的病理改变,沙鼠可能是一种适合研究脂肪肝的实验动物。
- 钟民涛王迎卢静黄敏王钜
- 关键词:长爪沙鼠高脂血症动脉硬化脂肪肝