金红君
- 作品数：6 被引量：23H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学检验医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金留学人员科技活动项目择优资助经费更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 干扰PML对人髓系白血病THP-1细胞增殖和凋亡的影响及机制探讨被引量：1
- 2016年
- 早幼粒白血病(promyelocytic leukemia,PML)基因与维甲酸受体α(retinoic acid receptorα,RARα)基因形成PML-RARα融合基因是急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)发生的分子基础,而PML在除APL外的其他髓系白血病亚型中的作用研究少见报道。为探讨PML在非APL的髓系白血病恶性表型中的调控作用及潜在机制,该文首先通过q PCR和Western blot检测了5株非APL来源的髓系白血病细胞中PML的表达水平。接着将靶向PML基因的sh RNA慢病毒(sh PML group)感染高表达PML的THP-1细胞;同时,设立未处理对照组(Mock group)和阴性对照组(Scramble group),嘌呤霉素筛选稳定表达sh PML的细胞株。q PCR和Western blot检测sh RNA干扰效率;CCK-8检测细胞体外增殖活性,克隆形成实验检测细胞体外克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白质Bcl-2、Bax水平和AKT及下游靶分子Foxo3a磷酸化蛋白质水平的改变。结果显示,5株髓系白血病细胞中PML m RNA和蛋白质水平不同,其中以THP-1细胞中的PML表达水平较高。靶向PML基因的sh RNA慢病毒感染THP-1细胞后,PML m RNA和蛋白质水平均明显下降,提示成功构建稳定表达sh PML的THP-1细胞株。与Mock组和Scramble组相比,sh PML组的细胞增殖能力显著增强(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05);同时,抗凋亡蛋白Bcl-2水平升高、促凋亡蛋白Bax水平降低;此外,干扰PML表达可增加p AKT(S473)及下游靶分子p Foxo3a(S253)的蛋白质水平,而总AKT和Foxo3a的蛋白质水平未见明显变化。该研究的结果提示,PML基因可能通过调控AKT/Foxo3a信号通路活性抑制白血病的恶性表型,表明PML在不同白血病型别中发挥着不同的作用。
- 邹琴张帅帅鲜敬荣金红君杨丽媛高芃张伶
- 关键词：髓系白血病增殖凋亡AKT
- 敲低TRAF6对白血病K562细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制被引量：1
- 2015年
- 该文探讨了干扰肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)表达对人白血病K562细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制。将靶向TRAF6基因的sh RNA慢病毒载体感染K562细胞,利用荧光显微镜观察感染效率;Western blot方法检测TRAF6蛋白表达的改变;CCK-8法检测体外细胞增殖活性;流式细胞术分析细胞凋亡率;Western blot方法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达和AKT磷酸化水平的变化。结果显示,TRAF6-sh RNA慢病毒载体成功感染K562细胞,TRAF6蛋白表达水平明显下降。与空白对照组和TRAF6-NC组相比较,TRAF6-sh RNA组细胞增殖能力明显受抑(P<0.05),而细胞凋亡率增加(P<0.05);同时,促凋亡蛋白Bax表达升高、抗凋亡蛋白Bcl-2表达下降。此外,干扰TRAF6可下调K562细胞p-AKT(T308)和p-AKT(S473)活性,而总AKT水平未见明显变化。该研究表明,干扰TRAF6表达可抑制K562细胞增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能与下调AKT活性有关,提示TRAF6可作为白血病治疗的一个潜在靶点。
- 张帅帅鲜敬荣邹琴全静金红君高芃叶晟张伶
- 关键词：TRAF6白血病RNA干扰增殖凋亡AKT
- 胱抑素C在过敏性紫癜早期肾损伤中应用价值探讨被引量：2
- 2014年
- 目的探讨血清中胱抑素C(Cys C)对过敏性紫癜(HSP)患者早期肾损害的临床诊断中的价值。方法采用颗粒增强透射免疫比浊法检测29例HSP患者(观察组)和20例健康体检儿童(对照组)血清Cys C,同时收集临床指标24h尿蛋白(UTP/24h)和血清肌酐(Scr)。结果 HSP患儿血清Cys C水平[(2.00±0.54)mg/L]高于健康对照组[(0.84±0.30)mg/L],且患者中血清Cys C随着尿蛋白水平的升高而升高,各组之间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组、A组及B组之间血肌酐水平两两比较,差异无统计学意义(P>0.05);C组血肌酐水平与其他各组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。血清Cys C水平与Scr水平呈正相关(r=0.63,P<0.01)。结论血清Cys C的测定对HSP早期肾损伤的诊断具有良好的临床价值。
- 廖翠玲金红君
- 关键词：胱抑素C过敏性紫癜肾损伤
- 血清胱抑素C联合β_2-MG检测对糖尿病肾病早期诊断的价值被引量：14
- 2015年
- 目的:探讨血清胱抑素C(Cys C)联合β2微球蛋白(β2-MG)检测在糖尿病肾病(DN)早期诊断中的价值。方法:以尿微量白蛋白/尿肌酐比值(MAlb/Cr)为依据将73例糖尿病患者分为单纯糖尿病组、DN早期组及DN组,设健康对照组;比较各组血清Cys C、β2-MG、尿素(Urea)及肌酐(Scr)的变化及在各组中阳性率,分析血清Cys C、β2-MG、尿MAlb/Cr三者间的相关性。结果:DN早期组Cys C、β2-MG含量较单纯糖尿病组升高,差异有统计学意义(P﹤0.05,P﹤0.01);阳性率仅在DN早期组血清Cys C、β2-MG明显高于Urea、Scr阳性率,差异有统计学意义(P﹤0.05);血清Cys C与β2-MG、MAlb/Cr间呈正相关(r=0.951、0.804,P<0.05),β2-MG与MAlb/Cr间仍呈正相关(r=0.741,P﹤0.05)。结论:联合检测血清Cys C和β2-MG对DN有较好的早期诊断价值。
- 胡贵贤金红君
- 关键词：血清胱抑素CΒ2微球蛋白糖尿病糖尿病肾病
- 过表达TRAF6对人急性髓系白血病细胞自噬活性的影响被引量：2
- 2020年
- 该文旨在探讨过表达肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptorassociated factor 6,TRAF6)对人急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞自噬活性的影响。利用基因表达数据库GEO分析TRAF6在AML患者白血病细胞中的mRNA表达水平。通过癌症基因组图谱TCGA分析TRAF6表达与AML患者临床预后的关系。将TRAF6重组质粒载体转染人AML细胞系(KG-1a和THP-1),采用自噬激活剂雷帕霉素(Rapamycin)和自噬相关抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)、巴弗洛霉素A1(bafilomycin A1,Baf-A1)分别处理AML细胞。荧光定量PCR、蛋白免疫印迹技术检测过表达TRAF6后白血病细胞自噬标志物(LC3和p62)mRNA和蛋白水平;免疫荧光方法检测LC3绿色荧光斑点结构(puncta);流式细胞术检测细胞凋亡率;CCK-8实验检测AML细胞的体外增殖能力。结果显示,AML患者白血病细胞高表达TRAF6(P<0.01);TRAF6高表达的白血病患者总体生存率和无事件生存率均较TRAF6低表达组显著降低(P=0.01)。TRAF6重组质粒转染能够显著增加两株AML细胞系中TRAF6的mRNA和蛋白水平(P<0.05)。Rapamycin处理能够激活AML细胞系自噬水平,过表达TRAF6后AML细胞LC3 mRNA和LC3II蛋白水平表达上调(P<0.05)、p62 mRNA和蛋白水平下调(P<0.05)以及LC3 puncta聚集增多。用Baf-A1处理以阻断过表达TRAF6的白血病细胞系中的自噬流后,LC3II蛋白表达水平显著提高(P<0.05)。3-MA处理过表达TRAF6的白血病细胞后,LC3II蛋白表达减少、p62蛋白表达增加(P<0.05)。此外,过表达TRAF6降低白血病细胞凋亡率和促进细胞的体外增殖(P<0.001),而过表达TRAF6后联合3-MA处理则可逆转TRAF6对白血病细胞的抗凋亡和促增殖作用(P<0.001)。以上研究结果提示,过表达TRAF6能够增强AML细胞的自噬活性,促进AML细胞的生长。
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- 关键词：肿瘤坏死因子受体相关因子6急性髓系白血病自噬
- 过表达INPP4B对人急性髓系白血病THP-1细胞增殖和凋亡的影响及其潜在机制被引量：3
- 2019年
- 目的:探讨二型磷脂酰肌醇4磷酸酶(inositol polyphosphate 4-phosphatase typeⅡ,INPP4B)对人急性髓系白血病THP-1细胞体外增殖和凋亡的影响及潜在机制。方法:将携带INPP4B的重组质粒载体p EAK-Flag/INPP4B转染人THP-1细胞系(Flag-INPP4B组),同时设立未处理组为对照(Mock组)。采用qRT-PCR和Western blot分别检测实验组和对照组细胞INPP4B mRNA和蛋白的表达水平;CCK-8实验检测细胞体外增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2(Bcl-2-associated X/B-cell lymphoma-2,Bax/Bcl-2)以及磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinositide-3 kinase,PI3K)下游信号分子蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)和血清糖皮质激素调节激酶-3(serum and glucocorticoid regulated kinase-3,SGK3)蛋白的磷酸化水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞内PI(3,4)P2和PI(3)P的水平。结果:INPP4B重组质粒载体转染THP-1细胞后,INPP4B的mRNA和蛋白水平均明显上升(mRNA:t=9.724,P=0.000;蛋白:t=19.520,P=0.000),提示在THP-1细胞中成功过表达INPP4B。与Mock组相比,Flag-INPP4B组细胞体外增殖能力明显增强(F=31.870,P=0.000)。同时,过表达INPP4B可明显降低细胞凋亡率(t=6.999,P=0.002);使促凋亡蛋白Bax的表达水平下降(t=24.710,P=0.000)、抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白表达水平增加(t=6.398,P=0.003)。此外,过表达INPP4B可增强THP-1细胞SGK3蛋白的磷酸化水平(t=10.470,P=0.000),而对AKT蛋白的磷酸化水平无明显影响(t=0.285,P=0.790)。最后,过表达INPP4B还可明显降低THP-1细胞中PI(3,4)P2的水平(t=4.515,P=0.011),同时明显升高PI(3)P的水平(t=5.681,P=0.005)。结论:本研究结果表明过表达INPP4B可促进人急性髓系白血病THP-1细胞的体外增殖并抵抗凋亡,其机制可能与INPP4B介导激活PI3K/SGK3信号通路有关,这提示INPP4B可作为急性髓系白血病治疗的一个潜在靶点。
- 金红君杨丽媛汪路唐雨婷陶瑶黄圣博敬一佩杨再林张伶
- 关键词：PI3K信号通路
