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新型Hsp90抑制剂-SNX-2112治疗人慢性髓细胞白血病机制研究: SNX-2112是近几年筛选出的一种新型Hsp90抑制剂,它可以特异性与Hsp90家族ATPpocket结合,抑制Hsp90活性,诱导Hsp90受体蛋白降解,最终导致肿瘤细胞的凋亡,是一种具有开发前景的抗肿瘤药物,但SN...; 金琳; 关键词：K562细胞转录组蛋白质组线粒体功能损伤; 文献传递网络资源链接

Nm23-H1基因沉默后K562细胞中肿瘤相关基因的差异表达: 2010年; 目的:应用基因芯片技术,检测nm23-H1基因沉默后K562细胞中与肿瘤相关基因的差异表达情况,探讨nm23-H1基因沉默对K562细胞生物学行为变化的分子作用机制。方法:采用Trizol一步法抽提K562-siNM23细胞和K562-siNC细胞总RNA;用RNA扩增试剂盒进行双链cDNA的合成及荧光标记cRNA的合成,并纯化cRNA。与功能分类基因芯片杂交反应后,用计算机分析比较2种细胞中与肿瘤相关基因的差异性表达。结果:共筛选出表达差异性基因14个,其中表达上调基因9个(ratio>2);表达下调基因5个(ratio<0.5)。结论:nm23-H1基因沉默后,引起显著变化的基因与细胞周期调控和抗凋亡信号转导等生物学功能相关。; 刘慧金琳张传海熊盛刘秋英王一飞; 关键词：NM23-H1基因

RNA干扰建立的nm23-H1基因沉默K562细胞模型及其生物学特点: ＜正＞引言:nm23-H1基因的高表达与肿瘤转移呈负相关性;相反,在恶性血液病中,nm23-H1的高表达则提示病情的恶化。目前尚未见国内外关于 nm23-H1基因与 K562细胞分化机制的报道。为了探索二者的关系,我们通...; 金琳刘格张传海熊盛张美英刘秋英钱垂文王一飞; 文献传递

K562细胞nm23-H1基因沉默对其向巨核细胞分化的影响被引量：1: 2008年; 目的探讨nm23-H1沉默对K562细胞向巨核细胞分化的影响。方法采用Lipo-fectamine2000将靶向nm23-H1基因的RNA干扰质粒pSilencer^TM 4．1-CMV-sinm23及空质粒转染K562细胞，经G418筛选建立该基因稳定下调的K562细胞（K562-sinm23细胞）及空质粒转染K562细胞（K562-siNC细胞），实时定量PCR、免疫组织化学、蛋白印迹反应等方法证实了nm23基因沉默细胞构建成功。NBT还原比色试验检测细胞分化能力。流式细胞术检测在诱导剂佛波酯作用下K562-sinm23细胞表面巨核细胞分化抗原GPⅡb-Ⅲa（CD41）的表达。蛋白印迹法检测细胞在佛波酯诱导后ERK1／2磷酸化活性。结果与K562细胞和K562-siNC细胞比较，pSilencer^TM 4．1-CMV-sinm23能够沉默内源性nm23-H1 mRNA的表达，基因水平和蛋白水平的沉默效率分别达到75％和70％。经佛波酯诱导，与K562-siNC细胞比较K562-sinm细胞的分化能力明显增强（NBT还原能力A值分别为0．23±0．05和0．31±0．07）。nm23-H1基因调控K562细胞向巨核细胞分化与ERK1／2磷酸化活性增强有关。结论成功构建了nm23-H1基因稳定下调表达的K562细胞株，并且证明nm23-H1参与了K562细胞向巨核细胞系的分化。; 金琳刘格张传海熊盛张美英刘秋英钱垂文王一飞; 关键词：基因 NM23-H1 K562细胞细胞分化 RNA干扰

小檗碱对K562细胞分化及凋亡的影响被引量：7: 2009年; 目的:研究小檗碱对K562细胞是否具有抑制增殖、促进分化、诱导凋亡的作用,为临床应用黄连治疗慢性粒细胞白血病提供理论依据。方法:MTT比色法、克隆形成实验检测小檗碱对K562细胞增殖的影响;瑞氏-吉姆萨染色观察细胞凋亡的形态改变;DNA琼脂糖凝胶电泳检测晚期细胞凋亡;流式细胞术分析细胞周期分布,细胞表面分化抗原表型检测分析细胞分化。结果:小檗碱对K562细胞的生长有抑制作用;小檗碱与Ara-C联用存在一定的协同效应;小檗碱处理K562细胞48h后能明显促进其向红系、粒系、巨核系分化,随着作用时间的延长小檗碱诱导K562细胞发生凋亡的百分比逐渐增加。结论:小檗碱能有效地抑制K562细胞的增殖,其作用可能是通过诱导K562细胞发生G0/G1期和(或)G2期阻滞并进一步诱导其凋亡和分化实现的。; 金琳廖红娟张美英刘秋英王一飞; 关键词：小檗碱 K562细胞增殖分化凋亡

nm23-H1基因实时荧光定量PCR标准质粒的构建: 2007年; 目的:制备用于nm23-H1基因mRNA实时荧光定量PCR检测的质粒标准品。方法:通过PCR扩增出目的片断,纯化后T-A连接至pMD18-T载体,转化宿主菌E.coliDH5α,获得阳性克隆;通过PCR扩增、双酶切鉴定和测序分析,确认重组质粒完整正确;大量抽提重组质粒,测定其拷贝浓度,10倍稀释成梯度标准品,并进行荧光定量PCR检测分析。结果:nm23-H1基因目的片段成功重组至pMD18-T载体上,获得的重组质粒保持了目的片段的特异性和序列完整性。梯度浓度标准质粒的荧光定量PCR结果显示,循环阈值(C t)与起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系。结论:成功构建了nm23-H1基因实时荧光定量PCR质粒标准品。; 张传海刘秋英金琳刘格郭朝万张美英王一飞; 关键词：实时荧光定量PCR 重组质粒标准品

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金琳