郭慧
- 作品数：12 被引量：26H指数：3
- 供职机构：四川大学华西第二医院更多>>
- 发文基金：四川省科技厅科技支撑计划项目国家自然科学基金四川省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 大鼠大脑皮层星形胶质细胞体外培养改良方法的研究被引量：3
- 2014年
- 目的改进大鼠大脑皮质星形胶质细胞(astrocyte,AS)的体外培养方法,为进一步研究奠定基础。方法选取生后3d的Sprague-Dawley大鼠的大脑皮层,常规分离纯化AS,低密度种植,培养箱中孵育1h后换瓶,24h后换液,细胞融合成单层后传代,传代后维持在含10%胎牛血清DMEM培养基中培养,并在长时期内不给予更换或补加培养液。采用GFAP/DAPI免疫荧光法鉴定AS细胞。结果体外培养的纯化大鼠大脑皮层AS,表现为细胞突起细长、胞体明显缩小、形态多样的纤维型AS,最后细胞突起之间相互连接形成AS网络。GFAP/DAPI免疫荧光染色结果示GFAP阳性细胞达98%以上。结论大鼠大脑皮质AS的体外培养改良方法培养的AS体外形态、发育特点均与在体内AS基本一致,且纯度较高,为进一步进行AS的研究创造了条件。
- 郭慧毛萌俞丹周晖童煜
- 关键词：星形胶质细胞神经胶质原纤维酸性蛋白
- 胶质细胞源性递质介导的神经元与胶质细胞间的对话被引量：1
- 2010年
- 郭慧毛萌
- 关键词：胶质细胞源性细胞间介导递质营养作用血管形成
- 新生大鼠海马神经元细胞体外培养方法改良研究被引量：10
- 2016年
- 目的探讨改良的新生大鼠海马神经元细胞体外培养方法,为新生儿缺血性脑损伤模型等海马神经元相关疾病研究奠定基础。方法采用本研究自行设计的改良新生大鼠海马神经元细胞的体外培养方法,进行新生大鼠海马神经元细胞的体外培养。判断新生大鼠原代海马神经元细胞体外培养成功的标准为:荧光显微镜下,可见微管相关蛋白(MAP)2在海马神经元细胞体和树突中表达。该改良方法具体为:1以L-多聚赖氨酸和鼠尾胶原作为神经元细胞体外培养的生长基质,分离出生24h内新生SD大鼠海马结构。将其运用单一胰蛋白酶水浴振荡消化后,吹打成细胞悬液,将海马神经元细胞以适当的密度种植于含10%胎牛血清DMEM培养基中,贴壁培养4h后,更换为Neurobasal维持培养基继续培养,以后每3d更换1/2培养液。2采用抗MAP2-5-异硫氰酸荧光素(anti-MAP2-FITC)免疫荧光法,对所获得的海马神经元细胞进行鉴定。结果 1新生大鼠海马神经元细胞的体外培养结果显示,新生大鼠海马神经元细胞于培养30min时,大部分细胞贴壁生长,培养2h后,细胞贴壁明显,少数细胞开始长出突起。于培养5d后,神经元突起进一步增多,并形成神经细胞网络,培养7d后,神经元细胞分化更加成熟,神经元细胞之间的突起联系更加紧密,可见密集的神经细胞网络。海马神经元细胞体外培养至第21天后,神经元细胞开始退化、变性,细胞体皱缩,残留细胞体痕迹,周围光晕消失,折光性减弱,突起融合而粗大杂乱,神经细胞网络粗大老化。2anti-MAP2-FITC免疫荧光法对所获得的海马神经元细胞进行鉴定的结果显示,在所有细胞中,免疫荧光染色MAP2阳性新生大鼠海马神经元细胞纯度达96.3%。结论通过上述改良方法培养获得的新生大鼠海马神经元细胞生长状态良好,并具有较高的纯度,可为进一步进行新生儿缺血性脑损伤模型等海马神经元相�
- 郭慧俞丹周晖童煜王峥
- 关键词：形态学特征荧光免疫测定
- GM_1在缺氧缺血性脑病中的神经保护作用被引量：3
- 2009年
- 缺氧缺血性脑病(hypoxic ischemic encephalopathy,HIE)是一种新生儿常见疾病,也是造成新生儿死亡和儿童伤残的主要原因之一。单唾液酸四己糖神经节苷脂(monosialotetrahexosylganglioside,GM1)是一种神经保护剂,因其具有多重脑保护作用而成为近年来国内外HIE研究的一个热点。GM1可通过保护神经细胞膜结构和功能、拮抗兴奋性氨基酸神经毒性、抑制一氧化氮合成、改善脑血流、抑制细胞凋亡、保证神经营养和促进神经修复等途径在HIE的治疗中发挥重要的神经保护作用。
- 郭慧屈艺毛萌
- 关键词：缺氧缺血性脑病单唾液酸四己糖神经节苷脂神经保护
- 三种方法建立神经元与星形胶质细胞共培养模型的对比研究被引量：3
- 2010年
- 目的比较神经元和星形胶质细胞共培养的3种不同方法,旨在获得高纯度的神经元。方法采用新生大鼠作为神经元和星形胶质细胞体外培养的细胞来源,用混合培养、Banker共培养方法和插入式培养皿的方法建立神经元和星形胶质细胞共培养模型。结果混合培养的神经元和星形胶质细胞同时生长在一个盖玻片上,不易控制胶质细胞的生长速度,神经元纯度不高;Banker共培养方法和插入式培养皿的方法均可获得高纯度的神经元,但Banker程序复杂;插入式培养皿的方法简化了Banker共培养程序。结论利用插入式培养皿建立神经元和星形胶质细胞共培养体系,是一种值得推广的可用于体外细胞共培养相关研究工作的有效方法。
- 郭慧马娇童煜屈艺母得志毛萌
- 关键词：共培养神经元星形胶质细胞新生大鼠
- P2Y1受体拮抗剂减轻OGD诱导的星形胶质细胞损伤
- ：探讨缺血缺氧刺激时,星形胶质细胞源性递质ATP及谷氨酸浓度改变与钙信号变化的关系,揭示阻断星形胶质细胞钙信号通路对星形胶质细胞缺血缺氧性损伤的影响.方法：取SD大鼠皮层培养星形胶质细胞,建立星形胶质细胞缺血缺氧(OGD...
- 郭慧毛萌俞丹周晖
- 关键词：星形胶质细胞损伤疗效评价
- 提高儿童腹膜透析置管成功率的临床经验总结
- 郭慧
- 浅谈改良TBL教学模式在儿科临床教学中的应用被引量：4
- 2019年
- 目的:探索儿科临床教学改革的新思路,进一步提高教学质量。方法:以2013和2012级七年制学生为实验组和对照组,分别采用改良TBL教学和传统教学法进行教学,比较两种方法的效果。结果:改良TBL教学组在考试成绩及发现、分析和解决问题的能力,临床思维培养等方面均优于对照组。结论:改良TBL教学模式有助于提高学习主观能动性,促进临床思维多元化能力的培养,提高了教学质量,值得推广。
- 郭慧高晓玲陶于洪
- 关键词：TBL教学模式儿科临床教学教学改革
- MRS2179减轻P2Y1受体介导的缺血缺氧性星形胶质细胞损伤
- 目的探讨缺血缺氧刺激时,星形胶质细胞源性递质ATP及谷氨酸浓度改变与钙信号变化的关系,揭示阻断星形胶质细胞钙信号通路对星形胶质细胞谷氨酸释放和缺血缺氧性损伤的影响。方法培养并纯化海马星形胶质细胞,检测星形胶质细胞培养中正...
- 郭慧俞丹唐艺玮王铮毛萌
- 新生大鼠海马神经元体外氧-糖剥夺再灌注模型的建立被引量：4
- 2016年
- 目的体外培养新生大鼠海马神经元,建立神经元氧-糖剥夺再灌注(OGD/R)模型,为临床进一步研究新生儿缺氧缺血性脑损伤奠定基础。方法以L-多聚赖氨酸和鼠尾胶原作为海马神经元体外培养的生长基质,分离24h内新生SD大鼠海马,胰蛋白酶水浴振荡消化获得单个细胞,采用Neurobasal维持培养基更继续培养。培养7d后将神经元细胞培养基更换为无糖缺血液,置于95%高纯度氮气(N2)三气培养箱内缺氧处理2h。将其取出更换为正常培养基继续培养24h,构建神经元OGD/R模型。然后,采用抗微管相关蛋白2-5-异硫氰酸荧光素(anti-MAP2-FITC)标记神经元,于荧光显微镜下观察建模前与建模后神经元的形态学改变,采用细胞活性检测试剂盒(CCK-8)检测微管相关蛋白(MAP)2阳性细胞存活率,对OGD/R模型进行评价。结果荧光显微镜下观察到正常情况下神经元细胞形态结构完整,树突及轴突舒展,交织成网状。建模后,神经元突触回缩,细胞崩解,网状结构被破坏。CCK-8检测结果显示,建模后神经元细胞存活率降低。结论此方法体外培养神经元细胞纯度在95%以上;使用无糖神经元细胞缺血液联合高纯度N2培养2h,再更换为正常培养基培养的方法,可成功建立神经元细胞的OGD/R模型。
- 郭慧俞丹周晖童煜陶于洪
- 关键词：海马神经元原代培养体外
