郝淑美
- 作品数：10 被引量：22H指数：2
- 供职机构：长春理工大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- DNA疫苗的安全性分析
- 2007年
- 近年来,DNA疫苗的研究已引起了国内外学者的广泛关注,并取得了迅速发展。在这种新型疫苗进入临床研究前,必须对其安全性作出评价。本文对该疫苗接种后能否整合入宿主细胞基因组中、能否导致原癌基因激活或抑癌基因的抑制等安全隐患、DNA疫苗的标准化及接种DNA疫苗风险与效率比等作了比较全面的分析。
- 郝淑美
- 关键词：DNA疫苗安全性
- 大肠杆菌表达SARS-S1大片段与SARS敏感细胞的结合
- 2005年
- 目的研究大肠杆菌表达的SARS-S1大片段和SARS敏感细胞的可能相互作用。方法使用纯化的S1蛋白和制备的抗S1抗体对不同的细胞进行免疫荧光染色,并用FACS进行分析。结果不同细胞和S1蛋白孵育后,对抗S1抗体介导的荧光染色呈现不同的反应。结论制备的S1蛋白片段可以和SARS敏感的VERO细胞发生特异性结合。
- 郝淑美王宣军吉海滨张秀霞王志武迟春萍
- 关键词：SARS-COV免疫荧光
- 犬瘟热病毒荧光抗体的制备及其鉴定被引量：1
- 2008年
- 采用常规方法建立杂交瘤细胞株并制备抗犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)(Onderstepoort株)核蛋白单克隆抗体(MAb);小鼠腹腔注射阳性克隆生产腹水;以G蛋白亲和层析法进行纯化;用透析法对单抗进行FITC(异硫氰酸荧光素)标记;Sephadex G-25去除游离荧光素;测定F/P值及荧光抗体工作浓度;以吸收、阻断、抗原交叉试验对荧光抗体进行特异性鉴定。结果表明,获得6株能稳定分泌CDV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,选取抗CDV核蛋白的CE3单抗成功地制备了质量较高的荧光抗体。
- 郝淑美岳妙姝苏建青杨松涛夏咸柱李牧
- 关键词：犬瘟热病毒单克隆抗体荧光抗体
- 蛋白质复性研究进展
- 蛋白质复性是一个过程,存在中间阶段,此阶段的各种相互作用力决定了蛋白质能否复性。蛋白质复性要求有一定的条件,如pH、温度、离子强度、蛋白质浓度等。另外多种添加剂能促进蛋白质复性,其中包括表面活性剂、低浓度变性剂、分子伴侣...
- 李群夏咸柱郝淑美王承宇王化磊孙培录张钰
- 关键词：影响因素
- 文献传递
- H5N1亚型禽流感病毒血凝素蛋白单链抗体基因的克隆及表达
- 2009年
- 构建并表达H5N1亚型禽流感病毒血凝素蛋白单链抗体,为禽流感靶向治疗药物的研制制备靶向载体。从分泌血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞株中提取mRNA,采用RT-PCR法扩增出重链和轻链可变区基因,通过SOE-PCR法将重链和轻链通过Linker连接起来构建单链抗体基因,将获得的单链抗体基因装入原核表达载体pET28a(+)中,构建重组质粒并表达,以Western blot鉴定单链抗体的特异性。结果成功构建了单链抗体基因,全长714bp,经原核表达,所构建的单链抗体可与H5亚型禽流感病毒HA蛋白特异结合,为禽流感的靶向治疗奠定了基础。
- 郝淑美李群王承宇王化磊杨松涛夏咸柱
- 关键词：禽流感病毒血凝素蛋白单链抗体克隆
- 重组人干扰素α2b栓剂稳定性研究
- 2007年
- 研究重组人干扰素α2b栓剂的稳定性。方法将重组人干扰素α2b栓在不同温度下保存不同时间，分别检验干扰素生物学活性、溶出度试验、融变时限、pH和微生物限度及外观的稳定性。结果重组人干扰素α2b栓在4～8℃条件下放置当时和放置48个月后的IFN生物学活性基本一致，未见下降；在20-25℃条件下放置24个月后IFN生物学活性未见下降，放置32个月后活性下降32％，36个月后IFN生物学活性下降55％；37℃条件下放置4个月后IFN生物学活性未见下降。结论重组人干扰素α2b栓剂的生物学活性及理化性质的稳定性好。
- 郝淑美郭桥王晓波肖艳玲郑辉鲁文艳韩俊海
- 关键词：重组人干扰素Α2B栓剂生物学活性稳定性
- 乙型肝炎病毒表面抗原基因在人参细胞中的高效表达被引量：2
- 2008年
- 目的提高乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）在人参愈伤组织细胞中的表达。方法构建一种植物细胞表达载体pBIBeo,该载体携带CaMV 35S双增强启动子和TMV（U1株）翻译增强子。用pBIBeo转化的农杆菌LBA4404与人参愈伤组织细胞共培养,经G418筛选获得新生抗性细胞团PBIBeo,连续继代培养选育出用于植物源口服乙肝疫苗生产的高产细胞株。提取基因组DNA和mRNA,进行PCR和RT-PCR鉴定,Western blot鉴定HBsAg的特异性,电镜下观察纯化抗原颗粒大小,并以ELISA检测HBsAg的表达水平。结果转化的人参细胞基因组DNA进行PCR反应,得到约700 bp的启动子基因片段。提取mRNA进行RT-PCR反应,得到约700 bp的HBsAg基因片段。Western blot分析可见相对分子质量为24 000的特异性条带。亲和层析纯化细胞表达的HBsAg抗原,电镜观察可见平均直径为32 nm的颗粒。ELISA检测结果表明pBIBeo转化细胞株HBsAg表达量比pBIBSa转化细胞株提高1~2倍。结论人参细胞基因组已经整合了目的基因并稳定高效表达。
- 高正伦盛军刘丹刘晓宇李娟郝淑美吉海滨刘建华
- 关键词：乙型肝炎病毒表面抗原
- 脂质体流感疫苗制备及体液免疫应答的研究被引量：7
- 2007年
- 目的：制备脂质体流感疫苗并对其体液免疫效果和保护效率进行研究.方法：采用薄膜法与冷冻干燥法相结合的方法制得多层脂质体;用制得的脂质体流感疫苗和普通疫苗分别免疫小鼠,用血凝抑制实验（HI）和酶联免疫吸附试验（ELISA）对免后2～13周的小鼠血清的抗体水平进行检测,HI检测其特异性抗体,ELISA检测IgG抗体水平并对小鼠的保护效率进行检测.结果：实验中,脂质体流感疫苗在2μg/mouse组和4μg/mouse两个剂量组中,不同免疫时间内其HI值可分别较非脂质体疫苗组高出2～3和4倍,产生抗体的水平经ELISA实验得出较非脂质体疫苗组高出1倍左右,故可激发更高的体液免疫;保护效力为4/6.结论：脂质体流感疫苗能够刺激机体产生更高的体液免疫和更高的保护效力.
- 郝淑美王亚军戚凤春李洪广
- 关键词：流感疫苗脂质体体液免疫血凝抑制试验
- 在无血清无蛋白培养基中培养Vero细胞
- 2007年
- 目的开发在无血清无蛋白培养基(PF)中培养Vero细胞的技术。方法在DMEM/F12培养基中添加酵母提取物和大豆水解物,配制成无血清无蛋白培养基。使用配制好的无血清无蛋白培养基,分别在玻璃、聚乙烯醇缩丁醛(PVB)和聚苯乙烯(PS-TC)培养面上培养Vero细胞,观察细胞生长情况,并绘制细胞生长曲线,以含血清培养基BM为对照。结果与BM培养基比较,在玻璃培养面上,PF培养基不支持Vero细胞生长和分裂;在PVB培养面上,PF培养基支持Vero细胞生长,但不支持分裂;在PS-TC培养面上,PF培养基支持Vero细胞的生长和分裂。结论在PS-TC培养面上,PF培养基适合培养Vero细胞。
- 高正伦张宪平盛军郝淑美
- 关键词：VERO细胞
- 用乳糖作为诱导剂进行重组蛋白的表达被引量：12
- 2005年
- 目的研究用乳糖替代IPTG作为诱导剂进行重组蛋白的表达。方法以表达SARS刺突蛋白片段的工程菌BL21(DE3)/S为模型菌株,采用葡萄糖、甘油作为碳源,不同浓度的乳糖和异乳糖作为诱导剂,在摇瓶中进行表达实验。在40L发酵罐中进行验证。结果在摇瓶实验中,乳糖浓度大于0.5mmol/L即可以很好地诱导目的蛋白的表达,表达量与IPTG诱导时相当;葡萄糖的存在可以抑制乳糖,但不能抑制异乳糖的诱导作用;使用甘油作为碳源,既不抑制乳糖,也不抑制异乳糖的诱导作用。在发酵罐实验中,诱导初始阶段葡糖糖的存在抑制乳糖的诱导作用。结论在以乳糖操纵子为调控手段的工程菌表达系统中,可以使用乳糖作为诱导剂,诱导阶段应采用非葡萄糖碳源。
- 郝淑美王宣军张秀霞方勇关晓峰盛军
- 关键词：乳糖操纵子重组蛋白诱导剂乳糖目的蛋白IPTG
