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乙型肝炎病毒分离株复制型质粒的构建方法: 本发明公开了一种乙型肝炎病毒分离株复制型质粒的构建方法，包括(1)HBV全长基因组的抽提、PCR扩增和克隆构建；(2)重组过渡载体的构建；(3)重组过渡载体的酶切与去磷酸化；(4)复制型质粒的构建，所述重组过渡载体由三个...; 张欣欣于德敏张东华陈立邓俊姜节洪

核苷（酸）类耐药患者中乙型肝炎病毒逆转录酶区基因变异类型及其特点被引量：16: 2009年; 目的了解核苷（酸）类药物治疗慢性乙型肝炎过程中HBV耐药变异模式特点以及是否有新的变异位点产生。方法对2005年9月-2007年6月送检的227份慢性乙型肝炎患者血清标本，应用Trugene试剂盒抽提、扩增HBV基因组聚合酶逆转录酶区，PCR产物经过CLIP反应后加到MicroCe1500电泳胶板中电泳，应用GeneObjects软件获得样本的序列，分析其突变，并应用SPSS15．0软件进行统计分析。结果在227份标本中有111份（48．9％）发现已知耐药位点（M204V／I，L180M，V173L，V207I，N236T，A181V／T等）变异，其中有明确用药史的共75例。在拉米夫定和阿德福韦序贯治疗的患者中出现多重耐药变异的概率较高，为25．0％（4／16），而在先用拉米夫定后联合阿德福韦治疗的16例患者中未发现后续阿德福韦耐药变异。在其他位点的变异中，以A222T、L229V和S256C频率较高。数据采用SPSS15．0软件分析，组间比较用Kruskal-Wallis和SNK方法检验。结论在核苷（酸）类药物治疗慢性乙型肝炎过程中，出现的变异模式复杂，对拉米夫定耐药的患者，换用阿德福韦可导致多重耐药变异。; 邓俊张东华于德敏陈立张欣欣; 关键词：突变核苷(酸)类药物

乙型肝炎病毒P基因反转录酶区I233V变异对阿德福韦酯耐药的实验研究被引量：2: 2011年; 目的构建含有HBVP基因反转录酶区1233V（rt1233V）突变的HBV复制型质粒，并分析此突变对阿德福韦（ADV）酯耐药性的影响。方法利用定点突变技术构建带有rtA181V、rt1233V和rtN236T突变的HBV重组质粒，分别转染肝细胞系Huh7，加入含有不同浓度ADV的培养液，培养3d后收集细胞DNA，用Southern印迹法检测HBV复制中间体。根据Southern印迹法得到的图像，用QUANTITIY ONE软件对其进行分析，应用Table Curve2D软件，通过公式拟合药物浓度-病毒复制率曲线。计算出ADV对各个重组质粒的半数抑制浓度（IC50）值后，以其对野生株质粒的IC50值为标准，分别计算各重组质粒的耐药倍数。结果ADV对带有rt1233V突变的重组质粒的IC50值为（1．69±0．52）μmol／L，耐药倍数是野生株的6．5倍。结论rt1233V变异能导致HBV对ADV轻度耐药。; 邓俊于德敏陈立刘锋张东华张欣欣; 关键词：乙型腺嘌呤点突变

核苷(酸)类耐药患者中乙型肝炎病毒逆转录酶区基因变异类型及其特点: 目的：了解核苷(酸)类药物治疗慢性乙型肝炎过程中HBV耐药变异模式特点以及是否有新的变异位点产生. 方法：对2005年9月-2007年6月送检的227份慢性乙型肝炎患者血清标本,应用Trugene试剂盒抽提、...; 邓俊张东华于德敏陈立张欣欣; 关键词：乙型肝炎病毒拉米夫定阿德福韦; 文献传递

乙型肝炎病毒分离株复制型质粒的构建方法: 本发明公开了一种乙型肝炎病毒分离株复制型质粒的构建方法，包括(1)HBV全长基因组的抽提、PCR扩增和克隆构建；(2)重组过渡载体的构建；(3)重组过渡载体的酶切与去磷酸化；(4)复制型质粒的构建，所述重组过渡载体由三个...; 张欣欣于德敏张东华陈立邓俊姜节洪; 文献传递

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邓俊