薛越强
- 作品数：14 被引量：18H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金美国中华医学基金国家攀登计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 转人载脂蛋白Eε4和突变淀粉前体蛋白基因小鼠的建立
- 2005年
- 将人载脂蛋白 (ApoEε4 )转基因鼠和突变前体蛋白 (APP)转基因小鼠交配 ,以建立h ApoEε4 /突变APP双转基因小鼠。共产出仔鼠 2 3只 ,经PCR初步筛选 ,并用Southern杂交对阳性小鼠基因组DNA作进一步鉴定 ,得到 3只双转基因小鼠。该双转基因鼠的建立为进一步阐明ApoEε4的致病作用以及对AD的研究提供了理想的研究模型。
- 杨鹏薛越强廖峥嵘屠亚军琦祖和
- 关键词：突变转基因小鼠前体蛋白转基因鼠仔鼠SOUTHERN杂交
- cDNA微阵列分析人apoE_4转基因鼠肾脏基因表达谱的变化被引量：1
- 2005年
- 目的研究人apoE4转基因鼠肾脏的基因表达谱变化。方法分别提取人apoE4转基因鼠和正常C57BL/6J小鼠的肾脏总RNA,经逆转录合成cDNA探针后分别与鼠cDNA表达点阵杂交,再用ESTblot软件进行分析,并用Northern印迹证明基因表达的改变。结果人apoE4转基因鼠肾脏中有38个基因的mRNA表达升高,22个基因的mRNA表达降低。其中血浆谷胱甘肽过氧化物酶前体、视黄酸γ受体和白介素5受体等基因的表达明显增加。B-raf原癌基因、促红细胞生成素受体、整联蛋白α4的基因表达显著降低。Northern杂交证明转基因鼠肾脏的c-Jun基因表达升高。结论人apoE4转基因鼠肾脏的c-Jun、血浆谷胱甘肽过氧化物酶前体、白介素5受体等基因的表达增加;促红细胞生成素受体、整联蛋白α4等基因的表达减少。
- 周厚清薛越强杨鹏李卓成琦祖和
- 关键词：微阵列分析载脂蛋白E类基因表达
- 氢化可的松对内毒素致急性肺损伤大鼠多形核白细胞氧自由基释放的影响被引量：4
- 2004年
- 目的 观察氢化可的松 (6mg/kg)对内毒素致急性肺损伤 (ALI)大鼠多形核白细胞(PMN)释放氧自由基 (OFR)及肺部病理改变的影响 ,探讨激素在ALI中发挥作用的可能机制。方法复制大鼠ALI模型 ,随机分为空白组、内毒素组 (LPS组 )、氢化可的松组 (HC组 ) ,空白组于注药后 6h、LPS组和HC组分别于注药后 2、4、6h抽血检测OFR释放 ,同时比较各组间肺组织病理改变。结果 (1)LPS组大鼠肺病理符合ALI表现。 (2 )OFR释放 3组比较有差异显著意义 (P <0 0 1) ,LPS组较空白组明显增强 (P <0 0 5 ) ,并在观察时间内 (2～ 6h)不断升高。HC组在各时点较LPS组均明显降低(P <0 0 5 ) ,在 4h抑制作用最明显 ,达 98 2 %。 (3)肺病理半定量评分 ,3组间差异有显著意义 (P <0 0 1)。与空白组相比 ,LPS组与HC组评分均显著升高 (P <0 0 5 )。而与LPS组相比 ,HC组病理评分显著降低 (P <0 0 5 )。结论 在LPS诱导ALI大鼠模型中 ,OFR大量释放在ALI发病中起了重要作用 ,6mg/kgHC可使肺损伤改善 ,同时对OFR释放可产生明显、持续的抑制 ,提示HC对ALI起保护作用 。
- 张莉申昆玲周涛薛越强杨鹏
- 关键词：ALILPS内毒素多形核白细胞急性肺损伤目的观
- 人载脂蛋白E7转基因小鼠肾脏cDNA削减文库与cDNA文库
- 2002年
- 目的 以人apoE7基因制备的高脂血症转基因小鼠模型已建成 ,要用于探查这一突变基因致病的分子机制 ,首先揭示人apoE7在小鼠体内诱发了那些基因的表达异常 ,是重要的环节之一。cDNA削减文库是寻找异常高表达的已知和未知基因有效的手段 ,而cDNA文库更是获取全长基因所必须。方法 自正常小鼠与转基因小鼠肾脏同时提取总RNA ,再分离mRNA ,逆转录制备cDNA后 ,用两次分子杂交削除转基因鼠cDNA中与正常小鼠相同的部分 ,再用PCR与择需PCR法扩增转基因鼠特异的基因 ,克隆入pGEM T载体后 ,制备削减文库。未经削减的转基因小鼠cDNA克隆入λgt11载体 ,制备基因表达文库。结果和结论 自高脂血症转基因小鼠肾脏构建的削减文库得到约 4 0 0个削减克隆 ,测定了部分克隆的序列 ,并进行同源性比较。λgt11 cDNA文库滴度 1 7× 10 7pfu ml,随机测定的克隆其插入片段长约 5 0 0bp以上。
- 田增遂琦祖和薛越强
- 关键词：转基因小鼠肾脏CDNA文库
- 一种快速提取小鼠基因组DNA的方法
- 1998年
- 本文建立一套简易、快速从小鼠肝（肾）组织中提取高分子量ＤＮＡ的方法，此法产率高，比较经济，其纯度可直接应用于ＰＣＲ进行小鼠遗传监测。
- 沈洁孟雁薛越强刘亮赵晓娟史燕燕陈彤刘金毅方芳
- 关键词：小鼠基因组DNA快速提取方法PCR实验动物
- 一氧化氮与Alzheimer病(综述)被引量：4
- 2005年
- 目的 概述了在Alzheimer病(AD)脑内一氧化氮(NO)可能介导胶质细胞激活后对神经元的损伤,参与炎性变化的毒性机制。诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在AD脑的胶质细胞和微血管内高表达,同时又在神经元内出现。而反应性胶质细胞内既有 iNOS的激活又有神经元型NOS(nNOS)激活,共同产生过量的、具有神经毒性的NO。
- 张世仪薛越强
- 关键词：一氧化氮一氧化氮合酶Β-淀粉样肽ALZHEIMER病
- h载脂蛋白E_4/h淀粉样前体蛋白转基因鼠自发变换行为的研究被引量：1
- 2006年
- 目的建立h载脂蛋白E_4(h-apo E_4)/h淀粉样前体蛋白(h-APP)双转基因鼠模型,探讨人apo E_4及人突变APP基因在脂质代谢及早老痴呆疾病(AD)中的作用。方法将h-apo E_4转基因鼠及h-APP转基因鼠交配,建立h-apo E_4/h-APP双转基因鼠。通过酶法检测鼠血清胆固醇。Y迷宫检测鼠自发变换行为。结果经聚合酶链反应初选,Southern杂交进一步鉴定,获得h-apoE_4/APP双转基因鼠(10只)。h-apo E_4/h-APP转基因鼠血清胆固醇水平[9月龄(2.76±0.75)mmol/L,12月龄(3.35±1.23)mmol/L]明显高于同龄对照组鼠(10只)[9月龄(2.03±0.30)mmol/L,12月龄(2.16±0.50)mmol/L](P＜0.05),分别是同龄对照组鼠的1.3倍和1.2倍。12月龄h-APP转基因鼠和h-apo E_4转基因鼠血清胆固醇水平[h-APP鼠(2.38±0.37)mmol/L,h-apo E_4鼠(2.67±0.59) mmol/L]均明显高于同龄对照组鼠[(2.16±0.5)mmol/L](P＜0.05)。转基因鼠自发变换行为[h-apo E_4/h-APP(0.74±0.03)%,h-APP(0.80±0.05)%,h-apo E_4(0.72±0.07)%]与对照组鼠[(0.95±0.06)%]的差异有统计学意义(P＜0.01或＜0.05)。结论h-apo E_4基因与血清胆固醇水平有关,h-apo E_4基因及h-APP基因的异常表达对实验鼠的空间记忆能力有影响。
- 廖峥嵘李英敏琦祖和薛越强杨鹏
- 关键词：载脂蛋白E类淀粉样Β蛋白前体
- hApoE7转基因小鼠纯合子的培育和鉴定
- 载脂蛋白E(apoE)是血浆中参与脂质代谢的重要蛋白质并且与迟发型早老性痴呆相关.为从整体水平研究人突变ApoE基因的功能,我室已育成C57BL/6-hApoE7转基因小鼠.为获得纯合子小鼠,将经Southern杂交鉴定...
- 薛越强蒋效松杨鹏琦祖和
- 文献传递
- stNI同功酶限制修饰系统基因的表达检测和定位分析被引量：2
- 1999年
- 鉴定了Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１和ＪＭ１１０的部分遗传标记，作为受体菌分别用于ＢｓｔＮＩ同功酶限制－修饰系统中限制性内切酶（Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｅｎｄｏｎｕｃｌｅａｓｅ，简称Ｒ）基因和甲基化酶（Ｍｅｔｈｙｌａｓｅ，简称Ｍ）基因表达的检测。用外切酶ＩＩ单向删切含ＲＭ基因的ＤＮＡ片段，获得２３个缺失突变亚克隆。通过检测各亚克隆表达的Ｒ酶和Ｍ酶活性，将Ｒ和Ｍ基因分别定位在距克隆位点ＰｓｔＩ的０２→１４ｋｂ和１５→３．３ｋｂ范围内。分析表明：该系统属于Ｉ类限制修饰系统，两个基因受控于不同的启动子；该系统与Ｅ．ｃｏｌｉ染色体编码的胞嘧啶ＤＮＡ甲基转移酶（Ｄｃｍ）的识别序列相同，后者的甲基化作用也能阻止Ｒ酶的切割。Ｒ＋Ｍ－的重组质粒对Ｄｃｍ＋和Ｄｃｍ－的宿主都是致死性的，这说明在进化过程中。
- 刘金毅薛越强孟雁孟雁赵晓娟
- 关键词：缺失突变基因表达基因定位
- apoE_4近交系转基因鼠的高脂血症表现和自发变换行为损害被引量：6
- 2002年
- 建立相关疾病的动物模型 ,研究apoE4在脂质代谢和早老性痴呆等疾病中的作用 .通过显微注射法建立人apoE4近交系转基因鼠 .经Southern和Northern印迹杂交 ,鉴定apoE4基因的整合与表达 .98只新生鼠中鉴定出 2只首建鼠 ,定名为TgN(apoE4) 1QiL和TgN(apoE4) 2QiL .外源基因整合的拷贝数分别为 1和 2 .F1代杂合鼠的脑 ,肾脏 ,心脏和肝脏中均有人apoE4基因的表达 .血清脂质水平通过酶法检测 ,自发变换行为经Y迷宫试验检测 .转基因鼠的血清胆固醇和甘油三酯明显升高 ,自发变换行为受到损害 .结果表明 ,近交系转基因鼠过量表达人apoE4基因可导致血清脂质升高 ,并对其空间记忆能力造成损害 .
- 薛越强屠亚军杨鹏蒋效松廖峥嵘琦祖和
- 关键词：APOE4高脂血症
