公共文化服务平台

共 8 条记录，以下是 1-8

全选清除导出

排序方式：

核转录因子激活蛋白-1对PPARδ表达的调控作用被引量：4: 2005年; 目的研究在过氧化物酶体增长因子活化受体δ(PPARδ)表达中的相关调控因子.方法用RT-PCR扩增人类PPARδ启动子序列,通过Deletion及重组将不同长短的PPARδ启动子序列转化到PGL3-basic载体中,转染LOVO细胞,通过观测各重组体转染活性,确定PPARδ启动子活性区域.再通过电泳迁移率变更分析(EMSA)、突变等方法确定核转录因子激活蛋白-1(AP1)对PPARδ表达的作用.结果 Deletion及重组转染后发现PPARδ启动子活性区域在序列3361～3464之间,EMSA、突变发现AP1因子结合位点突变后转染活性明显降低.结论 AP1因子结合位点突变后转染活性明显降低,提示AP1是PPARδ的一个增强子.; 蒋晓刚毛泽斌孟照俊吕晓凤俞小瑞; 关键词：突变转染

AP1与NF-κB对PPARδ基因的转录调控作用被引量：2: 2012年; 目的研究在过氧化物酶体增长因子活化受体δ(PPARδ)表达中的相关调控因子。方法用RT-PCR扩增人类PPARδ启动子序列,通过Deletion及观测各重组体转染活性,通过电泳迁移率变更分析(EMSA)、突变等方法确定核转录因子激活蛋白1(AP1)及NF-κB对PPARδ表达的作用。结果 Deletion及重组转染后发现AP1及NF-κB因子各自结合位点突变后转染活性明显降低,同时突变其转染活性无明显变化。结论 AP1及NF-κB均可以增强PPARδ的表达活性。; 蒋晓刚韩燕杨旭东毛泽斌; 关键词：NF-ΚB

痰液脱落细胞FHIT基因检测在肺癌早期诊断中的评价被引量：5: 2009年; 目的通过检测痰液脱落细胞FHIT基因微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI)和杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH),评价FHIT基因检测在肺癌早期诊断中的敏感性,探讨肺癌筛查的有效方法。方法以液基细胞学为基础,采集并分离高危人群痰液脱落细胞,提取DNA,检测FHIT基因MSI和LOH。结果在肺癌患者中出现MSI或LOH异常的阳性率在41.6%～49.5%之间,以D3S1300最高,达到49.5%,3个位点中至少1个位点出现微卫星异常为72.3%(n=73),至少2个位点出现微卫星异常为45.5%(n=46)。统计学分析表明,FHIT基因出现MSI或LOH在肺癌和非肺癌患者中的差异有统计学意义(P<0.05)。结论以液基细胞学为基础,检测痰液脱落细胞FHIT基因的MSI和LOH可以作为肺癌早期诊断的新途径。不同微卫星位点出现异常表现的具体形式有所不同,多位点联合检测可以提高诊断的敏感性和特异性。; 庄鹏晖蒋晓刚潘承恩尚东; 关键词：痰液标本微卫星不稳定性杂合性缺失

口服消炎痛引发严重哮喘1例被引量：2: 2001年; 蒋晓刚; 关键词：消炎痛哮喘病例报告

G蛋白偶联的内整流型钾通道在哮喘模型大鼠肺组织的表达: 2015年; 目的检测G蛋白偶联的内整流钾通道（G protein-coupled inwardly rectifying potassium channels,GIRK）在哮喘模型中的表达改变,并寻找调节其表达变化的因素。方法用卵清蛋白和铝佐剂致敏E3大鼠14d后,用卵清蛋白进行攻击以诱导哮喘模型,用磷酸盐缓冲液致敏并攻击的大鼠作为对照,通过观察肺组织病变、总IgE水平的改变等手段评价哮喘模型。用RT-PCR检测GIRK亚基1-4的mRNA水平,用Western blot等手段检测大鼠肺组织中GIRK1和GIRK3的蛋白水平,并用免疫组化确定肺组织中GIRK表达的解剖部位。根据免疫组化的结果,选用A549细胞株作为模型,用IL-4刺激,用PCR、Western blot等手段检测IL-4对GIRK表达的影响。结果与对照组相比,哮喘模型组肺组织中GIRK的mRNA水平下降,哮喘模型组肺组织中GIRK蛋白水平也下降。免疫组化结果显示,GIRK在大鼠主要表达于气道上皮。随IL-4浓度的升高,在A549细胞中GIRK的所有的亚基的表达均呈剂量依赖性下降趋势;选择50ng/mL IL-4刺激A549细胞,GIRK的所有的亚基的表达均呈刺激时间依赖性的下降。结论在E3大鼠哮喘模型中,IL-4下调气道上皮中GIRK的表达。; 杨旭东宁启兰蒋晓刚孙青竹刘莉韩燕张富军王慧莲; 关键词：哮喘 IL-4

衰老细胞中调控胰岛素样生长因子结合蛋白-3的表达: 2009年; 目的:研究在衰老细胞中调控胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)表达增加的影响因素。方法:用Northernblot的方法显示IGFBP-3基因的表达在年轻和衰老的2BS细胞中存在差异;PCR扩增出人类IGFBP-3上游包括5′-UTR区的2kb的序列并用酶切得到4组不同长短的IGFBP-3启动子片段;将各片段用Effectene Transfection Reagent试剂盒转染到年轻和衰老细胞中,测出几组构建基因片段的启动活性,确定可调控转录活性的区域;通过重叠寡核苷酸凝胶阻滞实验确定在该活性区域中的增强子元件。结果:与年轻的2BS细胞相比,衰老的2BS细胞中IGFBP-3基因的表达升高;在IG-FBP-3启动子+59到-58序列之间存在着蛋白结合位点;5′-ccagcctgccaagcagcgtgccccggttgc-3′是IGFBP-3的增强子元件。结论:在衰老的2BS细胞中IGFBP-3基因上游-37到-8的30bp序列存在一个新的增强子元件IEE(IGFBP-3enhancerelement),对IGFBP-3的表达起到调控作用。; 任文君王群义吕小凤毛泽斌蒋晓刚; 关键词：胰岛素样生长因子结合蛋白-3 2BS细胞

胰岛素样生长因子结合蛋白3增强子元件(IEE)的生物学特征被引量：1: 2009年; 背景:在细胞水平,胰岛素样生长因子结合蛋白3竞争性地与胰岛素样生长因子结合阻止了胰岛素样生长因子与其受体结合,从而抑制了胰岛素样生长因子的活性。目的:观察衰老细胞中调节性蛋白质胰岛素样生长因子结合蛋白3的生物学特征。设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-09/2007-09在西安交通大学生物医学信息工程教育部重点实验室完成。材料:人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)购于中国生物制品研究所。方法:用Northern的方法显示胰岛素样生长因子结合蛋白3基因的表达在年轻和衰老的2BS细胞中存在差异;聚合酶链反应扩增出人类胰岛素样生长因子结合蛋白3上游包括5'-UTR区的2kb的序列,并用酶切得到4组不同长短的胰岛素样生长因子结合蛋白3启动子片段并确定可调控转录活性的区域;通过重叠寡核苷酸凝胶阻滞实验确定在该活性区域中的增强子元件-IEE(IGFBP-3enhancer element)及其与蛋白结合的碱基序列等;用DNase I Footprinting法确定了IEE中与蛋白结合的核心序列。主要观察指标:①胰岛素样生长因子结合蛋白3基因在年轻和衰老细胞中的表达差异。②通过重叠寡核苷酸确定增强子元件。③通过凝胶阻滞试验证实该复合物结合活性与衰老相关的。④通过凝胶阻滞试验确定IEE与蛋白结合的碱基序列。⑤用DNase I Footprinting法确定IEE中与蛋白结合的核心序列。⑥判断与IEE结合蛋白的相对分子质量。结果:与年轻的2BS细胞相比,衰老的2BS细胞中胰岛素样生长因子结合蛋白3基因的表达升高;5'-cca gcc tgc caa gca gcg tgc ccc ggt tgc-3'是胰岛素样生长因子结合蛋白3的增强子元件;该元件与蛋白结合的核心序列是CTG CCA和GCG TGC CCC G,而且这种结合是与衰老相关的;结合蛋白的相对分子质量大约在27000。结论:在2BS细胞中发现了一个新的转录增强子,它与蛋白结合的核心序列是CTG CCA和GCG T; 任文君王群义吕小凤毛泽斌蒋晓刚; 关键词：胰岛素样生长因子结合蛋白3 ENHANCER 2BS细胞

程序性细胞死亡因子4是替代活化巨噬细胞的新分子标志物: 2015年; 背景:程序性细胞死亡因子4的表达水平与经典活化的巨噬细胞的表型负相关,但是程序性细胞死亡因子4的表达水平与巨噬细胞替代活化的关系仍不明确。目的:观察替代活化的巨噬细胞中程序性细胞死亡因子4的表达水平改变,及其对替代活化的影响。方法:用白细胞介素4、地塞米松单独刺激或联合刺激诱导NR 8383细胞的替代活化;采用qP CR检测巨噬细胞替代活化的分子标志物的表达水平,确定诱导巨噬细胞替代活化的最适条件;采用qP CR和Western blot检测替代活化的巨噬细胞模型中程序性细胞死亡因子4表达的改变;分别用大鼠程序性细胞死亡因子4高表达质粒和程序性细胞死亡因子4干扰质粒转染NR 8383细胞株,采用荧光倒置显微镜观察转染的效率,并检测程序性细胞死亡因子4的表达水平;分别检测程序性细胞死亡因子4高表达和程序性细胞死亡因子4敲低后NR 8383细胞株中巨噬细胞经典活化和替代活化的分子标志。结果与结论:(1)白细胞介素4和地塞米松联合刺激比白细胞介素4或地塞米松单独刺激可更有效的诱导巨噬细胞的替代活化;10μg/L白细胞介素4+50 nmol/L地塞米松刺激24 h可有效诱导巨噬细胞的替代活化。(2)在替代活化的巨噬细胞中程序性细胞死亡因子4的表达水平显著升高,是替代活化的分子标志。(3)程序性细胞死亡因子4高表达上调替代活化的分子标志的表达(P<0.05);而敲低程序性细胞死亡因子4可下调CD206的表达(P<0.05),并显著上调经典活化的分子标志诱导型一氧化氮合酶的表达(P<0.05)。结果表明程序性细胞死亡因子4上调是替代活化巨噬细胞的一个重要分子标志物。; 田稼蒋晓刚李海燕钟波张富军宁启兰韩燕杨旭东; 关键词：巨噬细胞白细胞介素4 地塞米松国家自然科学基金

全选清除导出

共1页<1>

蒋晓刚

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

蒋晓刚

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈