蒋姗姗
- 作品数：26 被引量：73H指数：6
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：陕西省卫生厅科学研究基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PTD介导蛋白通过血脑屏障及其在脑组织中的分布被引量：7
- 2003年
- 目的 :探讨HIV - 1TAT的蛋白转导结构域 (proteintransductiondomain ,PTD)介导的大分子蛋白通过血脑屏障 (blood -brainbarrier,BBB)的作用及其在脑组织中的分布。方法 :将纯化的PTD -BCR/ABL融合蛋白及伊文思蓝经尾静脉注入小鼠体内 ,制备全脑组织恒冷箱连续切片 ,用免疫组织化学染色法检测PTD -BCR/ABL融合蛋白在脑组织中的分布 ,用伊文思蓝作为指示剂检测PTD对BBB开放的影响。结果 :将其注射到小鼠体内后 ,在全脑组织细胞中均检测到PTD -BCR/ABL融合蛋白 ,呈非特异性组织分布 ;全脑组织除无BBB区域外 ,余脑区均无伊文思蓝渗入 ,PTD不引起BBB的开放。结论 :PTD可在体内特异性介导大分子蛋白通过血脑屏障 ,并在全脑组织细胞中分布 ,为肽类或蛋白类大分子药物通过BBB进入中枢神经系统 (cen tralnervousystern ,CNS)开辟了一条新的途径。
- 刘强梁英民郑瑾邝芳蒋姗姗陈任安吴绒丽
- 关键词：蛋白转导血脑屏障通透性小鼠
- 蛋白转导结构域-bcr/abl融合基因的构建和表达被引量：11
- 2002年
- 目的 构建含蛋白转导结构域 (PTD)与慢性粒细胞白血病 (CML)bcr/abl融合基因片段的质粒 ,并在大肠杆菌中表达。方法 PCR扩增的CMLbcr/abl基因片段 ,经DNA测序后 ,与合成编码PTD的DNA片段一起插入质粒pET 16b ,构建表达载体pEPb ,转化大肠杆菌并进行了PTD bcr/abl蛋白的诱导表达和纯化。结果 跨越bcr/abl断裂点的 5 2 3bp的目的片段被有效地扩增。DNA序列分析表明所构建的含PTD bcr/abl融合基因的质粒与设计相同。PTD bcr/abl融合蛋白在转化大肠杆菌获得了高效表达并纯化。结论 成功地获得了PTD bcr/abl融合蛋白片段的基因表达产物 。
- 梁英民孙强蒋姗姗王冀姝吴绒丽陈萍刘利韩骅
- 关键词：BCR/ABL融合基因白血病慢性基因表达大肠杆菌
- 蛋白转导域介导BCR/ABL抗原对CML患者T细胞的活化作用被引量：3
- 2003年
- 目的 :研究蛋白转导域 (PTD)介导的BCR/ABL抗原对慢性髓细胞白血病 (CML)患者T细胞的特异性活化作用。方法 :利用基因工程技术 ,将PTD基因与CMLb3a2bcr/abl基因融合并原核表达。将纯化的PTD BCR/ABL融合蛋白与CML患者外周血单个核细胞 (PBMC)体外共孵育 ,用流式细胞仪分别检测CD4 + 、CD8+ T细胞上活化抗原CD2 5的表达。结果 :终浓度为 10 0mg/L的PTD BCR/ABL抗原体外刺激 4d后 ,10例CML患者中 ,5例表现为CD8+ T细胞活化 ,2例表现为CD4 + T细胞活化 ,其中有 1例CD8+ 和CD4 + T细胞同时活化 ;而作为对照的BCR/ABL抗原刺激组无一例表现为CD8+ 或CD4 + T细胞活化。结论 :PTD能将外源性BCR/ABL抗原转导入抗原呈递细胞内 ,加工呈递后激活抗原特异性CD8+ 及CD4 + T细胞 ,为CML特异性CD8+ 、CD4 +
- 刘强梁英民郑瑾李学义陈任安蒋姗姗吴绒丽
- 关键词：蛋白转导CD25抗原
- 格列卫联合非清髓造血干细胞移植治疗加速期、急变期CML的临床研究
- ＜正＞目的探讨非清髓造血干细胞移植联合格列卫在治疗慢性粒细胞性白血病（CML）中的作用。方法 7例CML患者（4例为AP,3例为BP）,移植前、后口服格列卫（400～1500mg／日）治疗,预处理方案为福达华,环磷酰胺和...
- 刘利梁英民刘强郝淼旺陈任安蒋姗姗张继良王黎红何华吴绒丽杜娟叶盛开尹单单韩骅
- 文献传递
- PTD-BCR/ABL SH3融合蛋白在K562细胞内的含量变化
- 2004年
- 蒋姗姗梁英民王作军韩骅
- 关键词：蛋白转导域BCR/ABL融合蛋白白血病
- 非清髓单倍体造血干细胞移植联合格列卫治疗慢性粒细胞性白血病
- ＜正＞目的探讨格列卫联合非清髓性单倍体造血干细胞移植在治疗加速、急变期慢性粒细胞性白血病中的作用。方法 4例慢性粒细胞性白血病患者,采用移植前、后口服格列卫,以环磷酰胺、阿糖胞苷、抗淋巴细胞球蛋白、赛尼派、环胞霉素A等作...
- 刘利梁英民刘强郝森旺陈任安蒋姗姗张继良王黎红何华吴绒丽杜娟叶盛开尹单单韩骅
- 文献传递
- 非清髓异基因造血干细胞移植联合伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病的临床研究被引量：2
- 2005年
- 目的 探讨非清髓造血干细胞移植联合伊马替尼(格列卫、STI571)在治疗慢性粒细胞白血病(CML)中的作用。方法 10例CML患者中3例为慢性期,4例为加速期,3例为急变期。移植前、后口服格列卫(400～1500mg/d)治疗,预处理方案为福达拉宾,环磷酰胺和阿糖胞苷联合抗胸腺细胞球蛋白或CD3单抗。供者HLA配型4例完全相合,2例1个位点不相合,1例2个位点不相合的同胞,1例3个位点不相合的同胞及2例半匹配的母亲供者。干细胞来源为重组人类粒细胞集落刺激因子(rhG- CSF,格拉诺赛特)动员的外周血造血干细胞(PBSC),移植物抗宿主病(GVHD)的预防以环孢菌素A和霉酚酸酯(骁悉)为主,部分病例加用甲氨蝶呤、CD3单抗及CD25单抗(塞尼派)。结果 10例患者均获得不同程度的嵌合状态,3例获得完全嵌合(>95%),7例获得44%～95%的混合嵌合。7例混合嵌合状态的患者经调整免疫抑制剂、供者淋巴细胞/PBSC输注,格列卫治疗,6例患者在移植后1 5～10个月转变为完全嵌合。移植后中性粒细胞>0. 5×109/L所需天数为16d(10～21d);血小板大于20×109/L所需天数为10d(4～15d)。移植期间1例患者移植后45d因肠道感染,颅内出血死亡。另1例患者移植后27d因多脏器衰竭死亡。8例患者随访7～23个月,6例发生Ⅰ～Ⅱ度GVHD,2例发生Ⅲ～Ⅳ度GVHD,除1例因慢性GVHD死?
- 刘利刘强郝淼旺陈任安张继良王黎红何华蒋姗姗梁英民
- 关键词：慢性粒细胞白血病非清髓异基因造血干细胞移植非清髓造血干细胞移植移植物抗白血病效应抗胸腺细胞球蛋白CD3单抗
- PTD-BCR/ABL SH3融合蛋白对肝癌细胞系HHCC的体外杀伤活性的研究被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨 PTD- BCR/ ABL SH3融合蛋白对肝癌细胞系 HHCC的体外杀伤活性。方法 通过将 PTD- BCR/ABL SH3融合蛋白与 HHCC细胞共培养 ,用免疫组织化学染色的方法观察和检测 PTD- BCR/ ABL SH3融合蛋白进入细胞后的定位 ,MTT法检测蛋白对肝癌细胞的杀伤活性 ,电镜观察 HHCC肝癌细与 PTD- BCR/ ABL SH3融合蛋白共培养后超微结构变化。结果 PTD- BCR/ ABL SH3融合蛋白与肿瘤细胞共培养后 ,免疫组织化学染色表明蛋白进入肝癌细胞后主要分布在细胞核 ,胞浆少量分布。MTT检测发现与同期空白对照相比 ,实验组细胞数量显著减少 ,提示蛋白可抑制细胞生长。电镜观察显示肝癌细胞在 PTD- BCR/ ABL SH3融合蛋白的作用下呈现明显的凋亡细胞特征。结论 PTD- BCR/ ABL SH3融合蛋白可以引发肝癌细胞凋亡从杀伤肿瘤细胞 。
- 阴继凯马庆久梁英民蒋姗姗赖大年武永忠李金茂
- 关键词：BCR/ABL肝癌细胞杀伤蛋白转导结构域
- PTD-bcr/abl融合癌蛋白片段的表达及其跨膜转运被引量：12
- 2001年
- 目的探讨蛋白转导结构域(PTD)介导的转导bcr/abl癌蛋白片段的方法，为进行免疫治疗提供实验依据。方法合成编码PTD的基因片段，并与PCR扩增的慢性粒细胞白血病癌蛋白bcr/abl基因片段融合,在大肠杆菌中表达。将纯化的融合蛋白PTD-bcr/abl与HL-60 细胞共孵育，用Western blot分析融合蛋白的跨膜转运。结果PTD基序可介导bcr/abl蛋白由细胞外跨膜转导进入细胞内。结论这一结果可能为应用外源蛋白负载(loading)抗原提呈细胞(APC)提供新的途径。
- 梁英民孙强蒋姗姗陈萍王冀姝刘利韩骅
- 关键词：蛋白转导BCR/ABL慢性粒细胞白血病基因表达
- BCR/ABL癌蛋白片段的表达、纯化及其抗血清的制备被引量：3
- 2001年
- 目的 克隆并表达 bcr/ abl融合基因片段 ,并制备其抗血清 .方法 PCR扩增包含蛋白融合点的 bcr/ abl癌基因片段 ,序列测定后克隆入带有 His标签的原核表达载体 p ET-16 b,转化宿主菌 BL2 1,IPTG诱导表达 ,SDS- PAGE分析表达结果 ,Ni- NTA树脂亲和纯化 ,皮下多点注射免疫小鼠 ,EL ISA确认抗血清的滴度 .结果 PCR扩增得到大小约 5 2 3bp的目的片段 ,序列测定表明与发表序列完全一致 ;得到了一种新的癌基因 bcr/ abl片段的原核表达载体 p ET- 16 b- bcr/abl,在 BL 2 1中表达可见于 Mr 2 1× 10 3处有一蛋白新生带 ,表达的 BCR/ ABL蛋白免疫小鼠后 ,EL ESA确认抗血清的滴度 >1∶ 2 0 0 0 .结论 成功的克隆、表达了 bcr/ abl融合基因片段 ,并制备了相应的抗血清 .
- 梁英民蒋姗姗孙强吴绒丽陈萍李荣周鹏王键韩骅
- 关键词：BCR/ABL融合蛋白抗血清慢性粒细胞白血病
