葛风伟
- 作品数：30 被引量：156H指数：7
- 供职机构：新疆师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学医药卫生更多>>
- 解除独行菜种子低温萌发停滞的温度响应蛋白筛选及表达分析被引量：7
- 2016年
- 新疆北部早春短命植物独行菜(Lepidium apetalum Willd.)种子萌发对温度响应独特:低温层积可以促进种子的萌发并显著增加整齐度,但在4℃条件下存在低温萌发停滞现象,而经25℃处理45-55 min及更长时间后,种子则可以在4℃条件下萌发。这种短暂的高温诱导解除低温萌发停滞的机制尚不清楚。本研究对处于低温层积前、萌发停滞状态及25℃高温处理解除低温萌发停滞后的种子进行蛋白质差异分析,筛选出解除独行菜种子低温萌发停滞的温度响应蛋白,采用定量q RT-PCR技术对相应基因的表达进行了验证。结果表明:低温层积前、后独行菜种子之间差异蛋白不显著;25℃高温处理45 min解除低温萌发停滞的种子与前二者种子蛋白差异显著。从中筛选出37个差异蛋白,其中14个上调,23个下调。选择显著上调的6个蛋白进行LC/MS-MS鉴定,并在生物信息学分析基础上,进一步选择其中的Cdc48E、Hsp17.6和Per12进行q RT-PCR验证,结果表明:这三个蛋白的基因在解除低温萌发停滞的种子中表达量极显著增高;随25℃处理时间增加,三个基因表达均呈上升趋势,且处理在45~55 min时上调表达达到最高,之后维持这一水平表达,这与经25℃处理30~60 min能够解除低温萌发停滞进行萌发的种子比率显著增加的特性相一致。以上结果说明Cdc48E、Hsp17.6和Per12可能与解除独行菜种子低温萌发停滞有密切关系,此结果为植物温度信号响应的研究提供了新的线索。
- 李萍萍曾卫军周茜赵惠新李艳红葛风伟祝长青赵君洁卢函赵和平
- 关键词：独行菜种子萌发
- PEG胁迫对扭果花旗杆幼苗生理特性和染色体行为的影响被引量：4
- 2021年
- 扭果花旗杆(Dontostemon elegans Maxim)是新疆达坂城荒漠地区广泛分布的旱生植物,具有极强的抗旱性,在维持荒漠植被的稳定性中发挥重大作用。本研究采用不同浓度梯度的PEG-6000溶液模拟干旱胁迫处理扭果花旗杆幼苗,并测定其生理指标及细胞学特征,分析干旱胁迫对扭果花旗杆幼苗生理特性及根尖细胞染色体行为的影响。结果表明:(1)低浓度PEG(≤20%)处理扭果花旗杆幼苗,其超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性4 d之内呈现线性上升,之后下降;25%PEG处理时,3种酶活性在前3 d达到峰值,之后迅速下降;(2)游离脯氨酸(PRO)、可溶性蛋白(SP)、丙二醛(MDA)的含量均随着胁迫时间的增加呈现先上升后下降的趋势;(3)PEG胁迫处理抑制扭果花旗杆种子根尖细胞的有丝分裂,随PEG胁迫浓度的增加和时间的延长抑制作用更加明显;同时研究发现种子根尖细胞染色体畸变率、微核率与PEG浓度呈正相关。研究结果说明在干旱胁迫时扭果花旗杆经过一系列的生理生化变化来适应逆境,可为扭果花旗杆抗旱研究提供理论参考。
- 邹丽媛马薇葛风伟
- 关键词：干旱胁迫抗氧化酶染色体行为
- 干贮藏时间对刺叶锦鸡儿和草原锦鸡儿种子萌发的影响被引量：10
- 2015年
- 刺叶锦鸡儿(Caragana acanthophylla)和草原锦鸡儿(C.pumila)是乌鲁木齐周边荒漠植被的重要组成种,是荒漠地区植被恢复的潜在先锋种.对刺叶锦鸡儿和草原锦鸡儿室内干贮藏8年、6年、1年的种子进行萌发实验.结果显示:刺叶锦鸡儿贮藏8年、6年、1年及鲜种子的萌发率分别为70.4%、72.9%、59.4%、46.4%,可见贮藏6年和8年的种子比贮藏1年及鲜种子的萌发率高,可能是其种子的物理休眠在干贮藏期间得以解除.而草原锦鸡儿贮藏8年、6年、1年及鲜种子的萌发率分别为90.6%、96.5%、92.5%、93.2%,种子萌发不受贮藏时间的影响,也许是因为其种子不休眠,种子活力在干贮藏期间逐渐丧失.从萌发速度来看,刺叶锦鸡儿种子的萌发速度不受贮藏时间的影响,而草原锦鸡儿贮藏8年的种子萌发速度比贮藏6年的慢.该研究可为锦鸡儿属植物的种质资源保护以及干旱区植被恢复提供理论依据.
- 王姣赵晓英赵君洁葛风伟
- 关键词：贮藏时间萌发率种子活力休眠
- 新疆干果复合饮料的研制被引量：1
- 2007年
- 以杏干、酸梅、红枣和葡萄干为原材料,按照合适的比例浸泡,提取浸提液研制干果复合饮料。以40℃的温开水对干果进行浸泡,采用正交实验筛选最佳原材料进行配比及稳定剂和护色剂的最佳添加量。用手持式糖度计、酸度计、高效液相色谱分析仪以及原子吸收光谱仪,分别检测复合饮料中的糖度、酸度、Vc含量和微量元素的含量。实验结果表明:在400mL、40℃的温开水中浸泡25g杏干、20g酸梅、15g红枣和10g葡萄干为复合饮料最佳配方,浸泡时间为24h,添加的稳定剂为0.2%的羧甲基纤维素钠和0.03%的黄原胶,0.02%的柠檬酸,测得复合饮料中糖含量为5.3%,酸度为3.68,Vc的含量为2.469mg/100mL,锌的含量为0.386mg/100mL,铁的含量为0.678mg/100mL。
- 曾献春陆璐葛风伟
- 关键词：杏干酸梅红枣葡萄干复合饮料
- 小蓬NeMT2基因的克隆及其植物表达载体的构建被引量：1
- 2016年
- 该研究利用RACE（Rapid amplification of cDNA ends）技术从小蓬中成功分离编码金属硫蛋白（Metallothionein,MT）的cDNA序列,命名为NeMT2,在GenBank中登录号为KT835290。该基因全长590 bp,开放阅读框为237 bp,编码78个氨基酸,编码的氨基酸序列中含有14个半胱氨酸残基（Cys,C）,呈C-C,C-X-C,C-X-X-C排列,集中分布在肽链的N端和C端,基因编码蛋白的分子量为7.603 6 kD,等电点为4.71。系统发育分析表明,小蓬金属硫蛋白NeMT2与藜科的海蓬子（AEF01492）和盐穗木（AHI62953）同源性最高,其次是甜菜（XP_010667708.1）。生物信息学分析表明,金属硫蛋白NeMT2无信号肽结构,属于非跨膜亲水性蛋白;疏水性分析表明,NeMT2蛋白的35~45个氨基酸之间有较强的疏水性,其中第41位Asp具最强的疏水性（1.444）;结构预测分析该蛋白质二级结构的主要元件是无规则卷曲。通过RT-PCR对NeMT2基因的表达分析发现,NeMT2基因在铜矿区和非铜矿区的小蓬叶片中均有表达,但该基因在铜矿区小蓬叶片的表达量明显高于非铜矿区。将小蓬NeMT2基因定向克隆到植物表达载体pCAMBIA1300的35S启动子下游,构建该基因的植物超表达载体pCAMBIA1300＋NeMT2。该研究结果为进一步研究该基因的功能和小蓬响应重金属胁迫的分子机制提供了一定基础。
- 葛风伟曾卫军李艳红赵惠新
- 关键词：RACE植物表达载体
- 新疆石油污染土壤苯并(a)芘降解微生物多样性研究被引量：1
- 2016年
- 为研究新疆石油开采区污染土壤中苯并(a)芘降解微生物的群落结构特点,采集克拉玛依石油开采区受污染程度不同的土壤样品,以苯并(a)芘为唯一碳源、氮源的无机盐培养基五代富集培养,采用PCR-DGGE技术对第五代富集培养物的微生物群落结构开展研究,根据DGGE指纹图谱分析它们的遗传多样性。研究显示:三个不同污染样品微生物多样性指数(H)丰度(S)和均匀度(EH)均有所不同,重度污染土样降解苯并(a)芘的微生物类群最为丰富,其次是中度污染土样,最少的是轻度污染土样;并且三个样品微生物类群种类差异较大,菌落相似性低。对DGGE的优势条带序列分析,同源性最高的微生物分别属于变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes)。研究表明新疆石油开采区污染程度不同土壤中降解苯并(a)芘的微生物群落结构不同,提示污染严重的环境里可能蕴藏着高效降解苯并(a)芘的微生物资源。
- 曾献春郑李娟葛风伟安登第费莹莹
- 关键词：石油污染苯并(A)芘
- 扭果花旗杆组织培养与再生体系的建立
- 2024年
- 【目的】以扭果花旗杆(Dontostemon elegans)根和下胚轴为外植体,建立扭果花旗杆组织培养体系,为后续遗传转化体系的建立提供技术基础。【方法】以MS培养基为基础培养基,利用萘乙酸(NAA)探究根和下胚轴直接诱导不定芽情况,利用2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、NAA、苯基噻二唑基脲(TDZ)、吲哚丁酸(IBA)进行愈伤组织诱导及分化和不定芽生根试验,统计愈伤组织诱导及分化和不定芽生根情况,确定扭果花旗杆组培体系最佳培养基类型。【结果】(1)由根和下胚轴直接诱导不定芽的最适培养基分别为MS+0.3 mg/L NAA和MS+0.6 mg/L NAA,直接诱导不定芽的最佳外植体为根。(2)扭果花旗杆根和下胚轴都能诱导愈伤组织,其中根系诱导愈伤组织速度最快且状态最佳,其次为下胚轴。根系愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率可达100.00%;下胚轴愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.3 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA,诱导率可达100.00%。(3)根系和下胚轴的最佳愈伤组织分化培养基均为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,分化率分别为100.00%和86.66%。(4)最佳生根培养基为MS+0.5 mg/L IBA,生根率可达50%以上。(5)将组培苗移至土壤后,在光照培养室培养15 d,其存活率可达83.33%。【结论】建立的扭果花旗杆组培体系可获得与实生苗形态一致的组培苗,为扭果花旗杆遗传转化体系的建立奠定了技术基础。
- 胡尔西旦·吐尔逊刘欣欣谷玉风陈永坤葛风伟
- 关键词：愈伤组织植株再生
- 基于转录组测序分析扭果花旗杆抗旱的主要代谢途径被引量：4
- 2022年
- 扭果花旗杆(Dontostemon elegans Maxim)是新疆达坂城荒漠地区广泛分布的旱生植物,在维持荒漠植被的稳定性中发挥重大作用。为了揭示干旱胁迫下扭果花旗杆整个基因组水平的表达特性,对25%PEG胁迫处理12 h、72 h的扭果花旗杆幼苗进行了转录组测序分析。经拼接组装共获得64672 Unigene,平均长度为753 bp,N50长度为1527 bp。与七大数据库进行注释,共有48046条Unigene获得了基因注释,占总Unigene的74.29%。其中有29633条Unigene获得了GO注释。通过差异表达基因GO分析显示,608个差异基因主要涉及植物型细胞壁组织或生物发生、细胞壁组织结构成分等功能。KEGG pathway富集分析共有16742 Unigene参与了131个代谢通路,差异基因主要富集到了苯丙素生物合成,类胡萝卜素的生物合成,蜡质、角质的生物合成及二苯乙烯、二芳基庚烷和姜酚生物合成等代谢途径。从扭果花旗杆转录组筛选出来的上调基因多为植物细胞壁组成成分中木质素、纤维素、蜡质、角质、脱落酸等物质的生物合成相关基因。研究表明扭果花旗杆能够通过促进生物合成代谢途经和细胞壁构建途径提高干旱胁迫适应能力,本研究结果有助于揭示扭果花旗杆对干旱的应答机理,为下一步筛选和挖掘抗旱功能基因提供数据支持。
- 马薇邹丽媛赵惠新葛风伟
- 关键词：干旱胁迫转录组
- 《分子生物学实验》课程的问卷调查与改革探索
- 2016年
- 分子生物学是一门实践性很强的学科,广泛应用于生物学的各个领域,分子生物学实验是理论和实践相结合的典型课程。为了进一步提高分子生物学实验的教学质量,通过问卷调查的方式,了解学生的背景知识、学习动机以及对教学方式的评价等,从而为更好的调动学生对该课程的积极性,为分子生物学实验教学改革提供一定的参考依据。
- 葛风伟
- 关键词：教学改革
- 扭果花旗杆bHLH转录因子家族成员鉴定与表达分析
- 2024年
- 基于扭果花旗杆(Dontostemon elegans Maxim.)转录组数据,鉴定其bHLH转录因子家族成员,并通过生物信息学方法分析该转录因子家族成员的理化性质、保守基序及结构域、系统进化关系、组织表达模式及逆境胁迫表达模式。结果表明:从扭果花旗杆转录组数据库中共筛选出66个bHLH转录因子家族成员,其氨基酸残基数为63~668,理论等电点为pI 4.74至pI 10.17,理论相对分子质量为7396.56~73508.47,65个家族成员属于亲水蛋白,60个家族成员定位在细胞核中;所有家族成员含有motif1和(或)motif2,且都含有保守的bHLH_SF超家族结构域。扭果花旗杆bHLH转录因子家族成员可划分为13个亚家族,亚家族ⅩⅣ含有的扭果花旗杆bHLH家族成员最多(10个)。组织表达模式分析结果表明:扭果花旗杆bHLH基因在不同组织中的相对表达量有所差异,De11684.2214、De11684.23639和De11684.33169在叶中的相对表达量最高,De11684.2906和De11684.31669在茎中的相对表达量最高,De11684.7549在根中的相对表达量最高,De11684.7900在根和叶中的相对表达量接近且显著(P<0.05)高于茎。扭果花旗杆bHLH基因对不同逆境胁迫有不同程度的响应:在150 mmol·L^(-1)NaCl胁迫下,7个bHLH基因的相对表达量在不同时间均显著上调;在250 mmol·L^(-1)聚乙二醇(PEG)胁迫下,6个bHLH基因的相对表达量在2 h时显著下调;在4℃胁迫下,6个bHLH基因的相对表达量在8 h时显著上调。综合分析表明:扭果花旗杆bHLH转录因子家族成员具有bHLH转录因子家族的基本特征;bHLH基因具有组织表达特异性,bHLH家族成员可能参与盐胁迫和低温胁迫的调控过程。
- 胡尔西旦·吐尔逊谷玉风刘欣欣葛风伟
- 关键词：BHLH转录因子非生物胁迫
