葛晓娜
- 作品数：20 被引量：49H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 热电厂锅炉灰粉尘对大鼠肺组织的早期毒效应
- 2002年
- [目的 ]探讨某热电厂锅炉灰粉对染尘早期大鼠肺组织的毒性作用及其机制。 [方法 ]分别对石英组、灰粉尘组及对照组Wistar大鼠一次性气管内注入浓度为 5 0mg/ml的石英尘、锅炉灰粉悬浮液及生理盐水各 1ml ,染尘后 10d ,用 2 ,4 二硝基苯肼比色法、Folin 酚试剂法和钼蓝法测定支气管肺泡灌洗液 (BALF)中乳酸脱氢酶活性及总蛋白和磷酯含量 ,免疫组织化学染色法直接检测肺组织中的肿瘤坏死因子 α(TNF α)和转化生长因子 α(TGF α)的表达。 [结果 ]与生理盐水组相比 ,石英组和锅炉灰粉组大鼠BALF乳酸脱氢酶活性增高和总蛋白明显增加 (P <0 0 1) ,且石英组大于锅炉灰粉组 (P <0 0 1) ;锅炉灰粉组磷脂含量未见增高 (P >0 0 5 ) ,且明显低于石英组。生理盐水组未见TNF α表达 ,石英组和锅炉灰粉组均引起TNF α阳性表达 [(4 1 2 4± 3 2 6) %、(16 97± 1 85 ) % ] (P <0 0 1)。生理盐水组和锅炉灰粉组偶见肺泡上皮细胞表达TGF α[(2 19± 0 2 2 ) % ,(2 75± 0 2 7) % ] ,而石英组TGF α呈表达增多 (79 5 7± 5 0 9) % (P <0 0 1)。 [结论 ]染尘大鼠早期 ,锅炉灰粉能够引起大鼠肺组织损害 ,但毒性明显弱于石英尘。
- 祁元明郑惠良李永欣金寒葛晓娜王柏生
- 关键词：热电厂粉尘肺组织支气管肺泡灌洗液总蛋白转化生长因子-Α
- 香烟提取物和脂多糖对人胚肺成纤维细胞TGF-β_1 mRNA及蛋白表达的影响被引量：4
- 2003年
- 目的 :探讨香烟提取物 (CSE)和脂多糖 (LPS)对体外培养的人胚肺成纤维细胞 (HELF)转化生长因子- β1(TGF - β1)mRNA及其蛋白表达的影响。方法 :应用不同浓度的CSE(1∶5 0、1∶2 5和 1∶10 )、LPS(0 1mg/L、1mg/L和 10mg/L)及CSE(1∶2 5 )与LPS(1mg/L)联合作用于HELF ,37℃作用 2 4h后 ,提取细胞总RNA ,应用逆转录 -多聚酶链反应 (RT -PCR)及免疫细胞化学技术检测TGF - β1mRNA和蛋白表达的变化。结果 :CSE低浓度 (1∶5 0和 1∶2 5 )时可增加HELFTGF - β1mRNA及蛋白的表达 (P <0 0 5 ) ,高浓度 (1∶10 )时未引起TGF - β1mRNA及蛋白表达增强 (P >0 0 5 )。不同浓度的LPS均引起HELFTGF - β1mRNA及蛋白表达增强 (P <0 0 5 )。CSE与LPS联合作用也可增加HELFTGF - β1mRNA及蛋白的表达 (P <0 0 5 )。结论 :一定浓度的CSE和LPS可上调肺成纤维细胞TGF - β1mRNA及蛋白表达。
- 葛晓娜熊密黄召
- 关键词：香烟提取物脂多糖类人胚肺成纤维细胞转化生长因子Β
- 香烟烟雾提取物对肺泡上皮细胞增殖及P21^(WAF1)表达的影响被引量：2
- 2006年
- 目的探讨香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对人类肺泡Ⅱ型上皮细胞来源的A549细胞增殖的影响及其与P21WAF1表达的关系。方法噻唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度CSE(5%,10%和20%)作用于细胞24,48和72h后对细胞增殖活力的影响;Hoechst33258染色和电镜观察细胞的形态变化;流式细胞术检测细胞周期动力学变化;运用反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术和免疫印迹法检测不同浓度CSE作用48h后P21WAF1在mRNA和蛋白质水平的变化。结果CSE对A549细胞增殖的抑制呈时间和剂量依赖性。Hoechst33258染色和电镜观察结果为核染色质的浓缩和边集,甚至于核碎裂。细胞周期动力学表现为CSE作用48h时随着药物浓度的增高G1期和亚G1期的细胞呈递增趋势,10%CSE作用不同时间后,随着作用时间的延长处于G1期和亚G1期的细胞亦呈递增趋势;且随着CSE浓度的增高P21WAF1在mRNA和蛋白质水平表达水平呈递增趋势。与对照组比较差异有显著性。结论CSE能够引起肺泡Ⅱ型上皮细胞的生长抑制并使细胞周期阻滞在G1期,P21WAF1在细胞内的高表达可能是CSE导致肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖抑制的机制之一。
- 焦宗宪葛晓娜熊密
- 关键词：香烟烟雾提取物肺泡上皮细胞细胞增殖P21^WAF1
- Myocardin在低氧诱导肺血管内皮向平滑肌样细胞转分化中的作用
- 目的探讨低氧条件下肺动脉内皮细胞（PAECs）向平滑肌样细胞的转分化及 myocardin在其转分化过程中的作用。方法经免疫磁珠法（用血小板内皮细胞粘附分子PECAM-1 做免疫分选标记）纯化分离的原代肺动脉内皮细胞,用...
- 何惠华黄磊卢玮朱朋成葛晓娜杜惠杨敖启林
- 关键词：MYOCARDIN平滑肌样细胞转分化低氧
- 文献传递
- 西地那非抑制低氧肺血管内皮向平滑肌样细胞的转分化及其机制被引量：1
- 2007年
- 目的探讨低氧条件下肺动脉内皮细胞(PAECs)向平滑肌样细胞的转分化及西地那非(sildenafil)对其的作用和可能机制。方法经免疫磁珠法(用血小板内皮细胞粘附分子PECAM-1做免疫分选标记)纯化分离的原代肺动脉内皮细胞,分为常氧组(含21%O2,5%CO2和74%N2)、低氧组(含1%O2,5%CO2,94%N2)、常氧+sildenafil组和低氧+sildenafil组。分别培养1d和7d。免疫荧光检测平滑肌特异性标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)的表达,结合形态学鉴定平滑肌样细胞的转分化;用逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测myocardin mRNA的表达。结果(1)免疫荧光结果显示低氧7d组PAECs中α-SM-actin阳性率(2.07‰±0.06)(P<0.05)明显增高,阳性细胞呈梭形或多角形,而常氧组和低氧1d组均未见α-SM-actin的阳性表达;(2)RT-PCR显示myocardin mRNA的表达在低氧7d组(0.23±0.03)(P<0.05)明显增高,常氧各组和低氧1d组均未检测出其表达。(3)用sildenafil后,平滑肌样细胞的转分化率明显低于对应低氧7d组(1.02‰±0.05;P<0.05);Myocardin mRNA水平也明显降低(0.09±0.02)(P<0.05)。结论低氧可促进PAECs向平滑肌样细胞的转分化,sildenafil在一定程度上可抑制其转分化,其可能机制是通过抑制myocardin基因的表达而实现的。
- 何惠华黄磊卢玮朱朋成葛晓娜杜惠扬敖启林
- 关键词：MYOCARDIN平滑肌样细胞转分化低氧西地那非
- 肌动蛋白和转化生长因子-β_1在大鼠试验性肺气肿发生中的作用被引量：1
- 2003年
- 目的 观察大鼠小气道上皮细胞肌动蛋白和转化生长因子 (TGF) β1在呼吸道上皮损伤修复及肺气肿发生中的作用。方法 将Wistar大鼠随机分为 2组 :吸烟加肺炎克雷伯杆菌感染组 (SI组 )和对照组 (C组 )。SI组应用吸烟加反复肺炎克雷伯杆菌感染法建立大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型 ,C组动物不吸烟不染菌。透射电镜和光镜观察肺组织病理学改变。对各组动物进行动脉血氧分压 (PaO2 )、动脉血二氧化碳分压 (PaCO2 )和右心室收缩压 (RVSP)测定。免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白 过氧化物酶 (SP)法检测各组大鼠小气道上皮细胞肌动蛋白和TGF β1表达的变化。结果 第 16周SI组大鼠与C组比较 ,小气道炎症反应明显 ,细支气管壁明显增厚 (P <0 0 5 ) ,内径与外径比明显降低 (P <0 0 5 ) ,并于 16周形成明显的肺气肿 ,肺腺泡内小动脉肌化明显 (P <0 0 5 )。SI组动物第 8周和第 16周PaO2 比C组明显降低 (P <0 0 5 ) ,而RVSP比C组明显升高 (P <0 0 5 )。C组大鼠小气道上皮细胞肌动蛋白表达较弱 [吸光度值 (A值 )为 0 0 9± 0 0 3],第 4周和第 8周 ,SI组小气道上皮细胞肌动蛋白阳性表达明显增强 (A值分别为 0 2 4± 0 0 6和 0 2 5± 0 0 5 ,P <0 0 5 )。C组大鼠肺组织TGF β1为阴性 ,SI组大鼠第 2、4。
- 葛晓娜熊密郝春荣
- 关键词：肌动蛋白转化生长因子-Β1
- TGF-β1在低氧诱导肺血管内皮向平滑肌样细胞转分化中的作用
- 目的研究低氧条件下肺动脉内皮细胞（PAEC）向平滑肌样细胞的转分化及转化生长因子β1（TGFβ1）在此转分化过程中的作用。方法将经免疫磁珠法（用血小板-内皮细胞粘附分子PECAM-1做免疫分选标记）纯化后的原代肺动脉内皮...
- 卢玮黄磊何惠华朱朋成葛晓娜杜惠扬敖启林孙红蕾
- 关键词：低氧平滑肌样细胞转分化转化生长因子Β1
- 文献传递
- TGF-β_1在低氧诱导肺动脉内皮细胞向平滑肌样细胞转分化中的作用被引量：5
- 2006年
- 目的研究低氧条件下肺动脉内皮细胞(PAEC)向平滑肌样细胞的转分化及转化生长因子β1(TGF-β1)在此转分化过程中的作用。方法将经免疫磁珠法(用血小板内皮细胞粘附分子1做免疫分选标记)纯化后的原代肺动脉内皮细胞分别在常氧(含21%O2、5%CO2、74%N2)和低氧(含1%O2、5%CO2、94%N2)条件下培养1、4、7 d,用核酸干扰法(RNAi)阻断TGF-β1的表达,用逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)和Western blot分别检测各组细胞TGF-β1mRNA和蛋白的表达,并用免疫细胞化学法检测平滑肌细胞标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)的表达,结合形态学观察从而判定有无平滑肌样细胞的转分化。结果低氧可增加肺动脉内皮细胞TGF-β1mRNA和蛋白的表达(P<0.05),RNAi沉默TGF-β1基因表达后可明显降低其mRNA和蛋白含量(P<0.05),随着低氧培养时间的延长,肺动脉内皮细胞转分化为平滑肌样细胞的比率逐渐增加(P<0.05);阻断TGFβ-1表达后,平滑肌样细胞的转化率明显降低(P<0.05)。结论肺动脉内皮中存在具有转分化为平滑肌样细胞潜能的细胞;低氧可明显促进转分化,TGF-β1在此转分化过程中起重要作用。
- 卢玮黄磊何惠华朱朋成葛晓娜杜惠扬敖启林孙红蕾
- 关键词：低氧内皮细胞平滑肌样细胞转分化转化生长因子Β1
- 不同粉尘对大鼠肺组织损害及细胞因子释放的比较研究
- 尘肺是指吸入粉尘颗粒引起的肺间质广泛性纤维化性病变,是严重危害人们身心健康的一种职业病,探明尘肺的发病机理对于防治尘肺具有重要的指导意义.研究结果表明;染尘大鼠早期BALF中增高的LDH活性, 总蛋白和磷脂的含量及肺组织...
- 葛晓娜
- 关键词：粉尘乳酸脱氢酶总蛋白转化生长因子-Α
- 文献传递
- 中药814对吸烟加肺炎克雷伯杆菌感染诱发大鼠COPD的防治被引量：3
- 2002年
- 应用吸烟加反复肺炎克雷伯杆菌感染法建立大鼠慢性阻塞性肺疾病 (COPD)模型。大鼠分为对照组 (C) ,吸烟加感染组 (SI)和治疗组 (T)。T组于吸烟感染前 3d开始用中药 814灌胃治疗 ,动物分别于第 4、 8、 16周处死。结果表明 ,与 SI组相比 ,第 16周 T组大鼠肺组织细支气管壁增厚程度 ,细支气管狭窄程度以及肺气肿面积均明显减轻(P<0 .0 5 ) ,维多利亚蓝染色显示 ,T组大鼠肺腺泡动脉肌化程度明显小于 SI组 (P<0 .0 5 ) ,与 C组相比无显著差异(P>0 .0 5 )。T组大鼠第 16周 Pa O2 比 SI组增高 (P<0 .0 5 ) ,右心室收缩压 (RVSP)降低 (P<0 .0 5 ) ,两指标接近正常水平。结果提示 ,中药 814对吸烟加肺炎克雷伯杆菌感染诱发的大鼠
- 葛晓娜熊密郝春荣
- 关键词：阻塞性肺疾病吸烟细菌感染中药814
