莫小辉 作品数:11 被引量:41 H指数:2 供职机构: 上海市皮肤病性病医院 更多>> 发文基金: 湖南省教育厅重点项目 上海市科学技术发展基金 湖南省科技厅重点项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
两种非梅毒螺旋体试剂的比较 甲苯胺红试剂(TRUST)是目前国内广泛应用于梅毒筛查检测的试验之一。考虑到本试验可以作为疗效观察的指标,为了解不同的筛查试剂的检测结果是否可以相互认可,本文选用两家在本地区使用较多的TRUST试剂进行比较,以判断两者是... 莫小辉 金月兰 杨阳 胡伟忠 顾伟鸣关键词:梅毒 血清学检测 阳性检出率 特异性抗体 文献传递 苍白密螺旋体苍白亚种单克隆抗体的制备及应用 2007年 苍白密螺旋体苍白亚种,俗称梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)是严重危害人类健康的性传播疾病——梅毒的病原体。由于Tp体外培养至今尚未成功,从而制约了Tp的基础研究。自从Tp单克隆抗体(TpMcAb)问世以后,已应用于Tp感染的临床诊断、抗原性质分析等方面的研究,其制备方法的完善和改进将对梅毒的诊断和防治提供新的方法。本文对Tp McAb的制备和应用作一综述,以展示近年来Tp McAb的最新研究进展。 莫小辉 吴移谋关键词:梅毒螺旋体 单克隆抗体 两种TRUST试剂在梅毒筛查试验中的比较 2009年 莫小辉 金月兰 杨阳 胡伟忠 顾伟鸣关键词:TRUST试验 抗体滴度 肺炎嗜衣原体蛋白酶样活性因子重组蛋白的血清学诊断价值初探 2008年 目的克隆、表达肺炎嗜衣原体(Cpn)蛋白酶样活性因子(CPAF)的免疫优势区基因(CPAFm),初步评价其在血清学诊断中的应用价值。方法构建pGEX6p-2/CPAFm重组质粒,诱导表达重组蛋白,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定结果;将纯化蛋白免疫新西兰兔,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其免疫原性;与人抗Cpn抗血清反应分析其免疫反应性。间接ELISA法检测CpnIgG和沙眼衣原体(Ct)阳性血清。结果高效表达和纯化出一相对分子质量约为51.3×103的重组蛋白,蛋白质印迹法(Western blot)证明其能与人抗CpnIgG抗体发生反应;在被免疫的新西兰兔体内,特异性IgG抗体的滴度为1∶16000以上,间接ELISA法检测40例CpnIgG参考血清,阴性和阳性结果的符合率均为100.0%(20/20);与微量免疫荧光法(MIF)对照,检测300例临床血清标本中的IgG抗体,符合率为98.3%;检测Ct阳性血清未见交叉反应。结论表达的Cpn CPAF免疫优势区重组蛋白具有良好的免疫活性,在Cpn的血清学诊断中具有较高的应用价值。 郑江花 吴移谋 丁滔 陈丽丽 莫小辉 李忠玉关键词:衣原体 重组蛋白质类 免疫活性 临床实验室技术 抗梅毒螺旋体Tp0453基因重组蛋白单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用 目的:将本室构建的含梅毒螺旋体/(Treponema pallidum,Tp/)外膜蛋白Tp0453的优势表位/(28~288aa/)基因的重组表达体在E.coli M15中进行诱导表达,纯化表达产物并进行抗原性分析。应... 莫小辉关键词:梅毒螺旋体 单克隆抗体 TP0453 文献传递 抗梅毒螺旋体重组蛋白Tp0453单克隆抗体的制备及应用研究 被引量:2 2009年 目的利用基因重组抗原免疫BALB/c小鼠,制备抗梅毒螺旋体(Tp)重组蛋白Tp0453的单克隆抗体(mAb),评价其在早期梅毒Tp抗原诊断中的应用。方法以重组蛋白Tp0453免疫BALB/c小鼠,将免疫后的小鼠脾脏与SP2/0细胞融合,用间接ELISA和Western Blot检测杂交瘤细胞分泌的抗体,并对阳性细胞经亚克隆建株;体内诱生腹水法制备抗体,用硫酸铵沉淀法对mAb进行纯化并测定其亚类和效价;以自制的mAb建立间接免疫荧光法(IIF)检测梅毒患者分泌物标本,并与镀银染色的检测结果进行比较。结果获得4株稳定分泌抗重组蛋白Tp0453的杂交瘤细胞株,分别命名为15B2、8B9、9C6和2F8,其mAb效价分别为1∶25000、1∶8000、1∶50000、1∶10000;2F8杂交瘤细胞分泌的mAb为IgG2b,其他3株交瘤细胞分泌的mAb均为IgG1;4株mAb腹水经SDS-PAGE均显示出一条分子量约为50kDa的重链条带和一条分子量为26kDa的轻链条带;4株杂交瘤细胞染色体数在90~108范围内变化。IIF显示自制的mAb能与天然的Tp抗原结合,检测86例分泌物标本,IIF与镀银染色的符合率为95.3%。结论本实验成功获得了抗Tp0453重组蛋白的mAb,该mAb能识别天然的Tp0453抗原,有望应用于早期梅毒感染的抗原检测。 莫小辉 吴移谋 张明 顾伟鸣 刘双全 赵飞骏关键词:梅毒螺旋体 单克隆抗体 化学发光免疫分析法与梅毒螺旋体明胶凝集试验检测梅毒螺旋体特异性抗体的比较 被引量:17 2008年 梅毒实验室诊断目前主要依靠血清学试验,国内大部分实验室开展的梅毒螺旋体特异性试验主要以梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)为主。而近20年快速发展的化学发光免疫分析法(CLIA)已广泛应用于各领域,但在梅毒的实验室诊断中的临床应用较少。为此,我们与本市3家实验室,对CLIA法检测梅毒螺旋体抗体结果进行了比对分析,现报告如下。 金月兰 顾伟鸣 杨阳 蒋燕群 刘晓艳 刘瑛 胡伟忠 莫小辉 庄亦晖 陈瑜 陈洁 徐萍关键词:梅毒螺旋体特异性抗体 梅毒螺旋体明胶凝集试验 化学发光免疫分析法 梅毒螺旋体抗体 血清学试验 CLIA法 抗梅毒螺旋体重组蛋白Tp0453单克隆抗体的制备及初步应用 为制备抗梅毒螺旋体(Tp)重组蛋白Tp0453(rTp0453)的单克隆抗体(mAb),评价其在早期梅毒诊断中的应用,本研究以rTp0453免疫BALB/c小鼠后,将小鼠脾脏细胞与SP2/0细胞融合,用间接ELISA和W... 曾铁兵 莫小辉 吴移谋 张明 顾伟鸣 刘双全 赵飞骏文献传递 沙眼衣原体CPAF免疫活性区域重组蛋白的表达及在临床诊断中的应用 2007年 目的分析沙眼衣原体(Ct)蛋白酶样活性因子(CPAF)免疫优势区的免疫活性,探讨其在Ct感染诊断中的应用价值。方法构建原核表达重组质粒pGEX-6p-2/CPAF’,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用该纯化的表达产物包被酶标板,建立间接ELISA检测病人血清中的Ct特异性IgM和IgG抗体,同时与晶美公司Ct ELISA试剂盒检测结果进行对比分析。结果含pGEX-6p-2/CPAF’的大肠杆菌BL21大量表达相对分子质量(Mr)约为43×10^3的目的蛋白,用该重组蛋白包被酶标板,建立间接ELISA检测Ct IgM、IgG阴性和阳性参考血清各50份,符合率均为100%;同时检测250份临床血清标本,与晶美公司ELISA试剂盒检测结果的符合率IgM为96.8%,IgG为98.4%。结论表达的Ct CPAF免疫优势区(AA200~AA388)重组蛋白具有良好的免疫反应活性,可望用于Ct感染的临床诊断。 刘佳强 吴移谋 郑江花 莫小辉 陈丽丽 陈超群关键词:沙眼衣原体 重组蛋白 免疫活性 实时荧光核酸恒温扩增技术检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染 被引量:22 2010年 目的评价实时荧光核酸恒温扩增技术(simultaneous amplification and testing,SAT)检测沙眼衣原体(CT)核酸试剂盒(RNA恒温扩增)的敏感性和特异性。方法对229例临床疑似患者的尿样及拭子标本同时进行SAT检测和"金标准"沙眼衣原体细胞培养检测,检测结果有差异的标本采用PCR方法对拭子标本进行复测,根据实验结果评估SAT技术在尿样及拭子标本检测中的敏感性和特异性。结果结合细胞培养和PCR的实验结果作为"扩大金标准",得出SAT技术对临床拭子标本的检测敏感性为97.1%,特异性为100%;对尿样标本检测的敏感性为89.4%,特异性为99.2%。拭子和尿样标本检测结果的符合率为95.2%,经卡方检验,差异无显著性(χ2=3.27,P>0.05)。结论 SAT技术检测CT试剂盒对拭子及尿样标本敏感性及特异性均较好,适用于临床实验室对CT的检测。 顾伟鸣 杨阳 吴磊 莫小辉关键词:沙眼衣原体 尿样检测