胡静
- 作品数:9 被引量:23H指数:3
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖北省自然科学基金卫生部临床学科重点项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 正常人外周血淋巴细胞凋亡受体的表达与细胞凋亡的关系被引量:5
- 2007年
- 本研究检测凋亡受体Fas、TNFRⅠ、TNFRⅡ在人外周血淋巴细胞(PBL)增殖过程中的表达情况及其细胞周期特异性,并探讨其与凋亡受体途径介导的细胞周期特异性细胞凋亡的关联性。应用双参数流式细胞术检测人外周血淋巴细胞在G0期和经植物凝集素刺激(PHA)进入细胞周期后Fas、TNFRⅠ、TNFRⅡ的表达情况以及细胞周期特异性,同时检测肿瘤坏死因子-α、抗Fas抗体诱导人外周血淋巴细胞的凋亡。结果表明:经植物凝集素刺激24小时后的外周血淋巴细胞Fas、TNFRⅠ、TNFRⅡ表达率较G0期外周血淋巴细胞分别增加了(35.55±6.63)%,(30.63±2.66)%,(26.62±5.14)%,均具有显著性差异(P<0.01),而且主要表达在G1期;未经植物凝集素刺激的外周血淋巴细胞停留在G0期,TNF-α和anti-Fas诱导后没有发生凋亡,而刺激后进入细胞周期的淋巴细胞经TNF-α和anti-Fas诱导后发生凋亡,其凋亡主要在G1期。结论:凋亡受体在外周血淋巴细胞中的表达与凋亡受体途径介导的细胞凋亡有明显的量效关系,凋亡受体途径介导细胞凋亡的细胞周期特异性与凋亡受体表达的细胞周期特异性有关,细胞凋亡的发生与细胞是否进入细胞周期有关。
- 胡静何小军冯永东杨长永韩中博龚建平
- 关键词:细胞周期细胞凋亡人外周血淋巴细胞细胞增殖
- 结缔组织生长因子在烟雾暴露大鼠肺血管重塑中的作用被引量:1
- 2007年
- 目的研究烟雾暴露大鼠在体应用结缔组织生长因子(CTGF)反义寡核苷酸(ASON)对肺血管重塑的影响,探讨 CTGF 在烟雾暴露致肺血管重塑中的作用。方法 35只大鼠按随机数字表法分为正常对照组(A 组)、烟雾暴露1个月组(B 组)、烟雾暴露+大剂量 CTGF ASON 1个月组(C组)、烟雾暴露+小剂量 CTGF ASON 1个月组(D 组)、烟雾暴露2个月组(E 组)、烟雾暴露+大剂量CTGF ASON 2个月组(F 组)、烟雾暴露+小剂量 CTGF ASON 2个月组(G 组),每组5只。用苏木精-伊红(HE)染色观察肺血管重塑;用免疫组化法观察 CTGF 在肺动脉中的表达;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺动脉 CTGF mRNA 表达。采用 SPSS 12.0软件,数据以±s表示,组间差异显著性检验采用方差分析,两两比较采用 q 检验,相关分析采用直线回归法,P<0.05为差异有统计学意义。结果 (1)A 组肺动脉管壁面积/管总面积(WA%)为(28.6±1.2)%、B 组为(42.5±2.3)%、C组为(33.7±1.8)%、D 组为(42.1±2.4)%、E 组为(49.6±2.1)%、F 组为(34.3±1.9)%、G 组为(38.4±2.0)%。C 组与 B 组比较差异有统计学意义(q=5.09,P<0.01),F、G 组与 E 组比较差异均有统计学意义(q 值分别为8.15、3.75,P 均<0.05);(2)A 组肺动脉平滑肌 CTGF 蛋白表达吸光度(A)值为0.098±0.015、B 组为0.159±0.023、C 组为0.118±0.017、D 组为0.153±0.022、E 组为0.406±0.036、F 组为0.109±0.012、G 组为0.146±0.024。C 组与 B 组比较差异有统计学意义(q=3.26,P<0.05),F、G 组与 E 组比较差异均有统计学意义(q 值分别为67.08、18.09,P 均<0.01);(3)A 组肺动脉 CTGF mRNA 表达为0.051±0.010、B 组为0.823±0.096、C 组为0.216±0.056、D 组为0.810±0.085、E 组为2.452±0.267、F 组为0.207±0.062、G 组为0.509±0.067。C 组与 B 组比较差异有统计学意义(q=53.50,P<0.01),F、G 组与 E 组比较差异均有统计学意义(q 值分别为132.22、93.70,P 均<0.01)。结论应用 CTGF ASON 可显著降低烟雾暴露诱导的大鼠肺血
- 田锋徐永健张珍祥范新蕾胡静
- 关键词:血管结缔组织生长因子反义寡核苷酸
- CTGF在烟雾暴露大鼠肺血管中的表达及其与肺血管重建的关系被引量:3
- 2008年
- 目的:探讨烟雾暴露致大鼠肺血管重建中结缔组织生长因子(CTGF)表达的变化及意义。方法:24只大鼠随机分为对照组、烟雾暴露1、2和3月组,HE染色观察肺血管重建,天狼猩红染色检测胶原增殖,免疫组化观察CTGF在肺动脉中的表达,RT-PCR检测肺动脉CTGFmRNA表达。结果:随烟雾暴露时间延长,肺动脉管壁面积/管总面积(WA%)、胶原沉积、CTGFmRNA和蛋白表达呈时间依赖性增加(组间P<0.01)。CTGF表达与WA%呈正相关。结论:大鼠烟雾暴露后早期即出现肺血管重建,且随时间延长逐渐加重,CTGF在肺动脉中的表达逐渐升高,可能在此过程中起重要作用。
- 田锋徐永健张珍祥胡静范新蕾
- 关键词:结缔组织生长因子肺动脉
- 人重组Fas配体体外诱导细胞周期特异性凋亡模型的建立及其意义被引量:1
- 2007年
- 以Molt-4、Jurkat细胞株和外周血淋巴细胞(peripheralbloodlymphocyte,PBL)为靶细胞,检测细胞膜上Fas的表达。人重组Fas配体(recombinanthumanFasligand,rhFasL)诱导细胞6~36h后用改良后的API等方法检测细胞凋亡及诱导凋亡过程中细胞周期蛋白的变化,探讨Fas介导的细胞凋亡与细胞周期的关系。结果显示:rhFasL诱导Molt-4、Jurkat细胞株和植物血凝素刺激进入细胞周期的PBL的凋亡具有细胞周期特异性并始动于G1期;而G0期PBL的细胞膜上虽然也有Fas的表达,但不能诱导细胞凋亡。研究还发现rhFasL诱导细胞凋亡时G1期的细胞周期蛋白D3明显升高,细胞周期蛋白E明显下降。以上结果表明rhFasL体外诱导的细胞凋亡发生在晚G1期,细胞凋亡的发生与细胞是否通过限制点进入细胞周期有关,细胞凋亡发生于晚G1期是G1期细胞周期蛋白E的下降和检测点的监督导致DNA受损的细胞不能通过G1/S交界的结果。
- 何小军胡静李小兰肖徽陶德定龙浩成胡俊波龚建平
- 关键词:细胞周期体外流式细胞术
- 结缔组织生长因子在吸烟者及慢性阻塞性肺疾病患者肺血管中的表达及其与肺血管重塑的关系被引量:5
- 2007年
- 目的探讨吸烟者及慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的肺血管重塑中结缔组织生长因子(CTGF)的表达及意义。方法取24份(非吸烟对照组、吸烟组、吸烟伴 COPD 组,每组8例)手术切除的肺组织,HE 染色观察肺血管重塑,天狼猩红染色检测胶原增殖,免疫组化观察 CTGF 在肺动脉的表达,RT-PCR 检测肺动脉 CTGF mRNA 表达。结果 (1)肺动脉管壁面积/管总面积(WA%),非吸烟对照组为(28.4±4.7)%,吸烟组为(46.3±3.5)%,吸烟伴 COPD 组为(55.5±3.9)%(P<0.01)。HE 染色可见,吸烟组、吸烟伴 COPD 组肺动脉管壁明显增厚。(2)肺动脉壁胶原厚度,非吸烟对照组为(6.4±1.6)μm,吸烟组为(15.9±2.4)μm,吸烟伴 COPD 组为(16.4±2.3)μm(P<0.01)。天狼猩红染色可见,吸烟组、吸烟伴 COPD 组肺动脉管壁胶原明显增多。(3)CTGF mRNA 表达量,非吸烟对照组为0.095±0.015,吸烟组为0.396±0.167,吸烟伴 COPD 组为0.501±0.177(P<0.01)。(4)CTGF 蛋白表达量,非吸烟对照组为0.085±0.011,吸烟组为0.245±0.095,吸烟伴 COPD组为0.303±0.191(P<0.01)。(5)相关分析:CTGF mRNA 及蛋白表达量与 WA%呈正相关(r 分别为0.915、0.919,P<0.01)。结论单纯吸烟者即有肺血管重塑,吸烟伴 COPD 者的肺血管重塑程度更重,CTGF 可能在此过程中起重要作用。
- 田锋徐永健张珍祥胡静
- 关键词:肺动脉结缔组织生长因子
- 别嘌醇致药物超敏反应综合征1例报道被引量:2
- 2016年
- 别嘌醇引起药物超敏反应综合征(drug-induced hypersensitivity syndrome,DHS)是一种由别嘌醇诱发的以急性广泛的皮损,伴发热,肝、肾、肺等多脏器受累,淋巴结肿大为特征的严重全身性药物不良反应[1]。华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科收治1例别嘌醇超敏反应综合征患者,现报告如下。1病例资料患者,男性,24岁,因"发热5d,皮疹4d"入院。
- 王燕翠胡静齐俊英许东
- 关键词:别嘌醇超敏反应
- 香烟烟雾提取物对人肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及蛋白激酶C的相关作用被引量:2
- 2008年
- 目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)对人肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的影响及蛋白激酶C(PKC)信号转导途径在其中所起的作用。方法①不同浓度的CSE作用于人PASMC24h,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测PASMC增殖,锥虫蓝排斥法检测活细胞率。②PASMC与PKC激活剂PMA预孵24h或与PKC抑制剂Ro31-8220(简称Ro)预孵30min,然后暴露于5%CSE24h,采用MTT法、流式细胞术、增殖细胞核抗原(PCNA)免疫细胞化学染色等方法观察细胞增殖的变化。③5%CSE作用于PASMC24h,采用RT-PCR和Western blot方法分别检测PKC-α mRNA和蛋白的表达。结果①20%和30%的CSE对PASMC有细胞毒性作用;5%和10%CSE不影响PASMC的活细胞率;MTT检测结果示5%CSE组PASMC的吸光度(A)值较对照组明显增高。②5%CSE组PASMC的MTTA值、增殖指数(PI)、S期细胞分数(SPF)、PCNA阳性表达率增高,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。PMA+5%CSE组和Ro+5%CSE组以上指标均降低,与5%CSE组比较,差异有显著性意义(P<0.05),与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。③5%CSE组PKC-α mRNA和蛋白表达量增加,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论高浓度的CSE对PASMC有细胞毒性作用,低浓度(5%)的CSE则能促进PASMC的增殖。PKC特别是PKC-α可能在CSE促人PASMC增殖的信号转导机制中起重要作用。
- 胡静徐永健张珍祥田锋
- 关键词:吸烟蛋白激酶C肺动脉细胞增殖
- 香烟烟雾提取物通过PKC途径促进大鼠肺动脉平滑肌细胞bFGF表达被引量:3
- 2008年
- 目的:研究香烟烟雾提取物(CSE)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响及蛋白激酶C(PKC)信号转导途径在其中所起的作用。方法:组织块法培养正常Wistar大鼠PASMCs。5%CSE作用于PASMCs不同时间及PASMCs先与PKC特异性抑制剂Ro31-8220预孵育,然后再暴露于5%CSE,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PASMCs bFGF mRNA表达,免疫细胞化学检测bFGF蛋白表达。结果:对照组PASMCs中有少量bFGF mRNA和蛋白表达(分别为0.093±0.034,0.142±0.013)。暴露于5%CSE后4h细胞内bFGF mRNA和蛋白表达增加,mRNA于8h达高峰(0.436±0.103,P<0.01),蛋白于12h达高峰(0.237±0.031,P<0.01),此后逐渐下降,但24h都仍高于对照组。Ro31-8220预孵育可显著抑制5%CSE诱导的bFGF mRNA和蛋白表达增加。结论:5%CSE可通过激活PKC途径促进大鼠PASMCs bFGF的表达。
- 胡静徐永健张珍祥田锋
- 关键词:成纤维细胞生长因子2肺动脉蛋白激酶C
- 流式细胞术检测临床实体瘤细胞周期蛋白表达的方法研究被引量:2
- 2007年
- 目的探讨cyclin/DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白质印迹技术和共聚焦显微镜技术检测临床实体瘤细胞周期蛋白表达的可行性、科学性和优越性,为肿瘤的细胞周期分析提供科学有效的技术支持。方法运用cyclin/DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白印迹技术和共聚焦显微镜技术检测临床实体瘤细胞周期蛋白的表达,并与传统的免疫组织化学切片法进行比较。结果流式细胞术可以准确地对细胞周期蛋白在临床实体瘤中的表达进行定性、定量、定位的分析,较为系统地反映了细胞周期蛋白在临床实体瘤中的表达特性和肿瘤的生物学特性。结论Cyclin/DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白质分析技术和共聚焦显微镜技术是一种科学有效的检测临床实体瘤细胞周期破坏特性的技术和方法。
- 何小军胡静夏云李小兰谢大兴龙浩成陈小燕肖薇陶德定龚建平
- 关键词:流式细胞术细胞周期蛋白共聚焦显微镜