胡锦跃
- 作品数：50 被引量：126H指数：6
- 供职机构：长沙市中心医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖南省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生交通运输工程建筑科学更多>>
- 全人源抗鼻咽癌噬菌体单链抗体的筛选与鉴定
- 2009年
- 目的从全人源抗鼻咽癌噬菌体抗体库中筛选特异性单链抗体（ScFv），并对其特异性进行鉴定。方法通过噬菌体表面展示技术把ScFv表达在噬菌体表面，以鼻咽癌细胞作为抗原，用抗原递减法，通过“吸附-洗脱-扩增”过程筛选并富集特异性抗体，及ELISA筛选，获得特异阳性克隆进行免疫组化鉴定并测序。结果通过对抗体库进行三轮正负淘洗和富集后，随机挑选4212个克隆进行ELISA，发现3个克隆对CNE2呈强阳性反应，而与人正常细胞系HUVEC等呈弱阳性反应或不反应。对克隆HNSA033进一步进行免疫细胞化学验证，结果与ELISA反应一致；免疫组织化学鉴定表明克隆HNSA033与鼻咽癌组织和鼻咽组织阳性率的差别有统计学意义。结论通过淘选富集、ELISA和免疫化学鉴定获得特异性较强的噬菌体克隆，为鼻咽癌发病机制的研究和临床诊断以及治疗奠定了基础。
- 李艳东谢平丽王甲甲李跃辉胡锦跃李官成
- 关键词：抗体
- 转染人乳头瘤病毒的宫颈癌U14移植同系小鼠后的生长特性和转移规律被引量：6
- 2001年
- 目的 :探讨转染人乳头瘤病毒 (HPV)的小鼠宫颈癌U1 4移植同系小鼠后生长特性和转移规律。方法 :用电穿孔法及阳离子脂质体将HPV 1 6型的早期基因E6 ,E7分别转染小鼠宫颈癌U1 4,筛选、鉴定表达E6 ,E7的转化细胞即E6 +U1 4,E7+U1 4,然后分别经皮下和腹腔移植于同系小鼠 ,观察其生长特性和转移规律。结果 :皮下移植野生型U1 4,E6 +U1 4及E7+U1 4后 ,出瘤时间分别为 5～ 7d ,1 1～ 1 4d及 8～ 1 0d (P <0 .0 5 ) ;平均生存期分别为 2 9d ,43 .3d及 3 5d ;淋巴转移率分别为 90 % ,3 0 %及 40 % ;肺转移率分别为 6 0 % ,1 0 %及 2 0 %。腹腔内移植后 ,荷瘤小鼠平均寿命分别为 1 4.2d ,2 0 .6d及 1 8.3d ;未发现淋巴和肺转移。结论 :转染HPV的小鼠宫颈癌U1 4移植同系小鼠后 ,显示出与移植野生型不同的生长特性和转移规律。该模型为研究以HPVE6 ,E7为靶的免疫或其他方法治疗宫颈癌提供了有价值的动物模型。
- 陶光实杨盛波林秋华刘毅智杨元华吴宜林刘凤英胡锦跃孙去病
- 关键词：子宫颈肿瘤U14转染疾病模型小鼠
- 脂质体载体法转染FPRL1基因到HEK293细胞及其鉴定
- 2002年
- [目的]验证脂质体载体法将FPRL1基因有效转染到HEK293细胞。[方法]G418筛选，RT-PCR和趋化试验。[结果]用脂质体载体法将FPRL1基因转染HEK293细胞，G418筛选，3周形成集落状细胞克隆；RT-PCR以FPRL1特异性引物扩增，凝胶电泳可见1条约700bp的目的片段，对照组为阴性；趋化实验显示HEK293/FPRL1细胞在一定浓度的fMLP的刺激下有趋化活性，而HEK293细胞无反应。[结论]初步证实脂质体载体法能有效地将FPRL1基因导入HEK293细胞，且FPRL1在细胞中有表达。
- 曹雯胡锦跃李官成
- 关键词：HEK293细胞
- 泛素编辑酶A20改变炎症状态及调控NF-κB信号通路逆转癌症的研究进展被引量：2
- 2018年
- 近来的研究数据极大地支持了慢性炎症是癌症发展的关键组成部分的概念。许多癌症来自感染部位,促炎细胞因子协调肿瘤微环境并参与肿瘤过程,通过促进肿瘤细胞增殖、存活、侵袭和转移。A20(也称为RNFAIP3)是泛素编辑酶,作为有效的抗炎信号分子,可以限制多个细胞内信号级联。最近的报道已将A20鉴定为各种癌症中关键的肿瘤抑制因子。本文就A20在炎症信号级联调控中的作用作一综述,并解释了A20如何通过抑制炎症反应来调节癌症进展。
- 周昕安东建胡锦跃
- 关键词：NF-ΚB信号传导
- 人源抗肝癌单链抗体SA3与增强型绿色荧光蛋白的融合表达及其体内靶向性研究(英文)被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨人源抗肝癌单链抗体SA3与增强型绿色荧光蛋白(EGFP-SA3)的融合表达、纯化、复性及其体内靶向性。方法:将SA3,EGFP基因,插入pET-25b(+),构建EGFP-SA3/pET-25b(+)原核表达载体,测序鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导融合蛋白EGFP-SA3的表达,复性、纯化后经SDS-PAGE鉴定;EGFP-SA3与HepG2细胞经体外孵育后在荧光显微镜下观察单链抗体SA3与肝癌细胞的结合作用;然后通过尾静脉将其注射入荷肝癌裸鼠体内观察EGFP-SA3的体内靶向作用。结果:SA3,EGFP基因分别插入载体pET-25b(+)后,重组表达载体EGFP-SA3/pET-25b(+)分别行NcoI-XhoI和NcoI-EcoRI双酶切,结果发现在750 bp左右出现一条带,与EGFP基因大小一致,在1.5 kb左右处出现一条带,与EGFP和SA3两个基因片段的总大小一致,DNA测序结果证实融合表达载体EGFP-SA3/pET-25b(+)构建成功;重组表达载体EGFP-SA3/pET-25b(+)经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE显示融合蛋白EGFP-SA3分子质量为58 kD,主要以包涵体的形式存在;纯化、复性后,免疫荧光检测结果显示SA3与HepG2细胞能特异性地靶向结合;注射了EGFP-SA3的荷肝癌小鼠的肿瘤部位有绿色荧光发出,显示EGFP-SA3具有良好的肿瘤特异性。结论:融合蛋白EGFP-SA3与HepG2细胞有较强的结合能力,单链抗体SA3有望用于肝癌的分子诊断和靶向治疗。
- 黄建李跃辉郭锋杰童永清王甲甲胡锦跃李官成
- 关键词：肝癌SCFVEGFP
- B7基因修饰的肿瘤细胞诱导抗大肠癌主动免疫被引量：3
- 2000年
- 目的 :研究B7基因修饰的肿瘤细胞诱导抗大肠癌CTL的活化。方法 :采用电击法将B7基因导入小鼠大肠癌细胞CMT93 ,G418筛选阳性克隆 ,免疫组化显示B7分子有高效表达 ,B7 +CMT93(CMT93 -B7)接种于C57BL/6小鼠背部皮下 ,其致瘤性显著下降 (P<0 01) ;CMT93 -B7致敏的小鼠对野生型瘤细胞具有免疫保护作用(P<0 05) ;用CMT93和CMT93 -B7细胞分别经腹腔免疫小鼠 ,得到腹腔浸润淋巴细胞及致敏脾细胞 ,MTT法进行体外杀伤实验。结果 :CMT93 -B7诱导的CTL(cytotoxicTlymphocyte)对CMT93的杀伤活性显著高于野生型CMT93诱导的CTL对相同靶细胞的杀伤活性(P<0 05) ,并且CMT93 -B7诱导的CTL对CMT93 -B7的杀伤率显著高于对野生型CMT93的杀伤率 (P<0 05)。结论 :B7分子有效地促进抗大肠癌CTL的活化 。
- 胡锦跃王飒朱建高周国华孙去病
- 关键词：B7基因基因转移主动免疫
- 内质网应激调控NADPH氧化酶表达在克罗恩病中的作用被引量：1
- 2019年
- 目的研究衣霉素(Tm)诱导肠上皮细胞发生内质网应激(ERS)的过程中,ERS的不同通路调控还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶中调节蛋白P47 PHOX的表达,以评估不同通路对氧化应激(OS)的影响,探讨ERS调控NADPH氧化酶的表达在克罗恩病的作用及可能机制。方法选取克罗恩病患者手术标本10份作为实验组,再选取结肠癌患者癌旁正常肠黏膜手术标本10份作为对照组,采用免疫组织化学方法检测肠道标本中GRP78蛋白和P47 PHOX蛋白的表达情况。随后取离体培养的肠上皮细胞,观察Tm刺激细胞后,GRP78和P47 PHOX蛋白表达的情况,并考察不同浓度的4-苯基丁酸钠盐(4PBA)是否可以抑制Tm诱导的GRP78和P47 PHOX蛋白表达。再分别抑制ERS不同通路IRE1α-XBP1S、IRE1α-TRAF2-JNK、PERK-eIF2α,检测P47 PHOX蛋白表达的情况。结果与结肠癌癌旁正常肠黏膜标本比较,克罗恩病肠黏膜标本GRP78和P47 PHOX表达明显升高。在离体的细胞中Tm诱导ERS发生,GRP78蛋白、P47 PHOX蛋白表达增加,而4PBA可以抑制上述蛋白的表达。抑制IRE1α-TRAF2-JNK、PERK-eIF2α途径均可以使P47 PHOX蛋白下调,而抑制IRE1α-XBP1S使P47 PHOX蛋白表达上调。结论 ERS可能通过调控NADPH氧化酶细胞溶质中的调节蛋白P47 PHOX,从而影响OS,最终参与克罗恩病的发病过程。其中IRE1α-TRAF2-JNK、PERK-eIF2α途径可能诱导P47 PHOX蛋白表达从而促进OS的发生。而IRE1α-XBP1S可以降低P47 PHOX蛋白活性,对OS有保护作用,可增强细胞对应激的适应性。
- 李凌倩曾亚曾亚申月明
- 关键词：克罗恩病内质网应激NADPH氧化酶氧化应激
- 转染异种CXCR4基因下调黑色素瘤的致瘤性被引量：3
- 2007年
- 【目的】利用基因转染技术将人源趋化因子受体CXCR4基因转染小鼠黑色素瘤细胞B16,研究异源CXCR4基因转染对肿瘤致瘤性的影响。【方法】脂质体转染法将人CXCR4基因导入小鼠黑色素瘤B16细胞中,RT-PCR、流式细胞术(FACS)分析人CXCR4在B16细胞中的表达,体内成瘤实验验证B16细胞的致瘤性。【结果】人CXCR4基因转染B16细胞,G418筛选获得阳性细胞克隆,RT-PCR检测到人CXCR4 mRNA的表达,流式细胞分析检测到人CXCR4蛋白的表达,体内成瘤实验证实异源CXCR4转染降低了B16的生长速度。【结论】异源CXCR4基因转染下调黑色素瘤的致瘤性,其机制可能与异源CXCR4诱导的免疫交叉反应有关。
- 汪砥刘蓓李跃辉周国华谢平丽李官成胡锦跃
- 关键词：黑色素瘤
- 用EBV转化的大肠癌患者B细胞构建噬菌体抗体库
- 目的:构建全人源化的噬菌体抗体库。方法:采用 EBV 转化技术,ELISA 技术,PCR 技术,噬菌体表面呈现技术。结果:EBV 转化8例大肠癌患者 PBMC,其中七例有抗大肠癌抗体产生,多次 PCR 扩增出5种 VH（...
- 朱建高李跃辉胡锦跃李官成周国华李小玲孙去病
- 关键词：EB病毒转化噬菌体抗体库
- 文献传递
- B7基因修饰的肿瘤细胞诱导抗大肠癌主动免疫
- ＜正＞目的荷瘤宿主不能诱导强有力的抗肿瘤免疫,一个主要的原因是肿瘤的抗原性弱。提高肿瘤细胞的免疫原性或者提高机体对肿瘤抗原的敏感性是肿瘤免疫治疗的关键。B7提供T细胞活化所需的共刺激信号,能促使针对肿瘤细胞表面抗原的CT...
- 胡锦跃段招君孙去病
- 文献传递
