胡兵 作品数:17 被引量:49 H指数:5 供职机构: 湖北省疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 更多>>
2015年湖北省武汉市发热呼吸道症候群病原谱研究 被引量:4 2017年 目的了解2015年武汉市发热呼吸道症候群病原谱构成。方法采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法从2015年1-12月,对采自武大中南医院和湖北省妇幼保健院共104份发热呼吸道症候群病例标本进行15种传染病病原体及分型的检测,分析其病原谱构成。结果共检测出11种传染病病原体阳性,38份阳性病例,总阳性率为36.54%(38/104),其中,病毒阳性29份,细菌阳性17份,细菌病毒共感染8份,分别占阳性病例的76.32%、44.74%和21.05%。男性感染阳性率32.75%(19/58),女性感染阳性率为41.3%(19/46),二者差异无统计学意义(χ~2=0.808,P=0.369)。5岁及以下婴幼儿是呼吸道病毒的主要感染人群。11种病原体中,排名前3位的为呼吸道合胞病毒(45.45%,5/11))、呼吸道腺病毒(36.36%,4/11))、肺炎链球菌(27.27%,3/11)。不同病原体感染季节性不同,有的病原体表现出严格的季节性。结论 2015年武汉市呼吸道症候群感染的病原体以病毒性病原体为主,尤其在低龄幼儿组,呼吸道合胞病毒、腺病毒和肺炎链球菌感染为其呼吸道症候群感染的主要病原体。 占建波 方斌 杨红梅 胡兵 潘阮刚 詹发先 李静关键词:病原谱 病毒 细菌 呼吸道合胞病毒表位重组蛋白F1-F/M2的原核表达、纯化及其免疫原性 被引量:1 2014年 目的原核表达、纯化呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)表位重组蛋白F1-F/M2,并检测其在小鼠体内的免疫原性,为RSV亚单位疫苗的研制、疫苗所致免疫病理反应机理的研究提供参考。方法利用定点突变技术对原核表达载体pGEX-6p-1进行改造,在其GST标签前制造一个HindⅢ酶切位点;从RSV long株中扩增F1片段,从质粒pET28a-G1-F/M2中扩增F/M2基因片段,并在克隆载体pUC19的辅助下,将F1-F/M2基因连接至改造后的pGEX-6p-1载体中,构建重组表达质粒pGEX-6p-1-F1-F/M2,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经6×His-tag标签蛋白纯化试剂盒纯化后,经尿素浓度梯度透析复性,SDS-PAGE分析其纯度,BCA法检测其浓度,Western blot法分析其反应原性。将纯化的重组蛋白F1-F/M2经铝佐剂乳化后,经腹腔免疫BALB/c小鼠,共3次,间隔10 d,末次免疫后10 d,采用空斑减少试验检测小鼠血清、肺组织匀浆和鼻腔冲洗液中抗RSV中和抗体水平;取小鼠脾脏,分离脾单个淋巴细胞,采用ELISAPOT技术检测重组蛋白诱导产生IFNγ的细胞免疫水平。结果重组表达质粒pGEX-6p-1-F1-F/M2经双酶切和测序证实构建正确;表达的重组蛋白F1-F/M2相对分子质量约为20 800,表达量约占菌体总蛋白的20%,几乎全部以包涵体形式表达;纯化的重组蛋白的纯度约为90%,浓度为0.42 mg/ml,可与小鼠抗RSV血清发生特异性反应;重组蛋白F1-F/M2能诱导小鼠血清中产生较高滴度的中和抗体(1∶289),肺部组织匀浆中略弱(1∶242),鼻腔冲洗液中未检测到中和抗体;重组蛋白F1-F/M2免疫小鼠的脾淋巴细胞经体外抗原刺激能产生特异性IFNγ斑点。结论成功原核表达了表位重组蛋白F1-F/M2,纯化后的重组蛋白能诱导产生较高滴度的中和抗体及CTL应答,有望开发成RSV亚单位疫苗。 胡兵 方志正关键词:呼吸道合胞病毒 表位 重组蛋白 原核细胞 纯化 免疫原性 应用液相芯片技术检测六种输入性烈性传染病病原的方法研究 被引量:5 2019年 目的研究新型中药制剂对疟原虫的杀伤及对宿主的免疫影响。方法应用将多重PCR扩增和液相芯片检测技术检测埃博拉病毒(EBV)、拉沙热病毒(LFV)、裂谷热病毒(RVFV)、马尔堡病毒(MRBV)、克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)、中东呼吸综合征病毒(MERSV),为相关输入性烈性传染病的检测提供一种技术储备。方法建立6种相关病毒的多重PCR扩增反应体系,分别用每种病毒特异性核酸探针与不同编码的荧光微球进行偶联,将PCR扩增产物与偶联有不同核酸探针的微球混合物进行杂交反应,建立6种病毒的液相芯片检测方法,并进行特异性和灵敏度验证。结果特异性检测结果表明不同病毒之间检测结果没有出现相互交叉干扰的现象,说明建立的6种烈性传染病病毒液相芯片检测方法用于不同病毒的检测具有良好的特异性;EBV检测核酸灵敏度为10^-7 ng,LFV、MRBV、RVFV、CCHFV、MERSV检测灵敏度均为10^-6 ng。结论建立的可同时检测EVB等6种输入性烈性传染病病毒的方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于相关输入性传染病疫情的应急检测。 戴莹 雷亚克 岳苗苗 胡兵关键词:多重PCR 液相芯片 人呼吸道合胞病毒及其疫苗研究进展 被引量:1 2013年 人呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是引起婴幼儿支气管炎和肺炎的主要病原体.虽然已经过半个多世纪的研究,但至今仍没有安全有效的RSV疫苗上市.科研人员经过几十年的努力,对RSV的分子生物学、流行病学、致病机制等方面的研究已取得重大进展.此文就RSV的病毒学特征、流行病学和疫苗研发策略做一综述. 胡兵 方志正关键词:呼吸道合胞病毒疫苗 流行病学 湖北省荆州市2017-2018年肾综合征出血热宿主动物监测结果分析 被引量:10 2020年 目的总结2017-2018年湖北省荆州市肾综合征出血热(HFRS)宿主动物监测结果,了解该市HFRS宿主动物种类、密度及带病毒情况。方法 2018年4-5月(春季)、2017和2018年的9-10月(秋季)在荆州市8个县(市、区)各选取1~2个自然村,采用夹夜法在室内及野外捕鼠。鉴定鼠种并取鼠肺,采用实时荧光定量PCR检测汉坦病毒核酸并分型。结果 2017-2018年荆州市平均鼠密度为7.02%,平均鼠带病毒率为13.37%。春季室内鼠密度为9.52%,小家鼠为优势鼠种,未发现携带汉坦病毒;野外以未收小麦田鼠密度较高(27.92%),黑线姬鼠为优势鼠种。春季总带病毒率为12.64%,阳性黑线姬鼠均在未收小麦田中捕获,携带Ⅰ型汉坦病毒。秋季室内鼠密度为5.60%,黄胸鼠为优势鼠种,未发现携带汉坦病毒;野外以包菜地(12.33%)、未收稻田(9.21%)、虾田(5.99%)鼠密度较高,黑线姬鼠为优势鼠种。秋季总带病毒率为13.62%,阳性黑线姬鼠在未收稻田、包菜地捕获,携带Ⅰ型汉坦病毒;阳性褐家鼠在未收虾稻田、虾田捕获,携带Ⅱ型汉坦病毒。结论荆州市室内生境鼠密度较高,但未检测到汉坦病毒;野外生境中,春季未收小麦田、秋季包菜地及未收稻田鼠密度、鼠带病毒率较高,阳性鼠为黑线姬鼠和褐家鼠。 刘天 夏世国 夏世国 梅芳盛 郝海波 黄继贵 黄继贵 姚梦雷 刘力 杨瑞 胡兵 吴杨 童叶青关键词:肾综合征出血热 宿主动物 黑线姬鼠 褐家鼠 2018年咸宁市城区高中新生健康状况调查 2019年 目的了解2018年咸宁市城区高中新生的健康状况,为制定高中生疾病预防控制措施提供参考依据。方法参照《学生健康检查表》要求,于2018年9月对咸宁市城区高中入校新生进行预防性健康检查,并对数据进行分析。结果参加健康检查新生共4 285人,其中男生2 423人,女生1 862人,身高体重发育正常,主要问题集中在视力不良和龋齿,其检出率分别为67.8%和7.5%,女生和城镇学生视力不良检出率高于男生和乡村学生(χ^2=19.8、18.7,均P<0.05),乡村学生龋患率高于城镇学生(χ^2=42.3,P <0.05)。丙氨酸氨基转移酶(ALT)异常检出率为5.2%,ALT异常率乡村高于城镇(χ^2=19.2,P<0.05)。结论 2018年咸宁市城区高中新生健康状况总体良好,主要问题是视力不良和龋齿,应将其作为高中生预防保健工作的重点。 潘小青 胡兵关键词:高中生 健康 2017-2020年湖北省荆州市肾综合征出血热宿主动物监测分析 被引量:4 2022年 目的总结荆州市2017-2020年肾综合征出血热(HFRS)宿主动物监测结果,为该市HFRS科学防控提供依据。方法在全市8个县(市、区)开展HFRS宿主动物监测。在春季(4-5月)和秋季(9—10月)采用夹夜法分别于室内、野外布放鼠夹。室内及野外选取荆州市常见生境。对捕获鼠进行鉴定,无菌取鉴定鼠肺,利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测鼠肺汉坦病毒并分型。结果 2017-2020年荆州市平均鼠密度4.83%(1 106/22 910),鼠汉坦病毒阳性率9.83%(58/590)。鼠密度居前3位的地区分别为江陵县(9.61%)、沙市区(6.44%)和石首市(4.92%)。鼠汉坦病毒阳性率由高到低依次为沙市区(17.31%,27/156)、江陵县(8.51%,16/188)、监利县(8.42%,8/95)和洪湖市(7.29%,7/96),其它地区捕获鼠未检出汉坦病毒。春季鼠密度为5.47%(578/10 566)。其中室内生境鼠密度6.15%(146/2 374),鼠汉坦病毒阳性率1.89%(1/53),阳性鼠为厨房捕获小家鼠;野外生境鼠密度5.27%(432/8 192),鼠汉坦病毒阳性率11.76%(16/136),阳性鼠以小麦田和虾稻田捕获黑线姬鼠、褐家鼠为主。秋季鼠密度为4.28%(528/12 344)。其中室内生境鼠密度6.06%(198/3 269),鼠汉坦病毒阳性率0.78%(1/129),阳性鼠为杂物间捕获黄胸鼠;野外生境鼠密度3.64%(330/9 075),鼠汉坦病毒阳性率14.71%(40/272),阳性鼠以蔬菜田、虾田、虾稻田、稻田捕获黑线姬鼠和褐家鼠为主。捕获黑线姬鼠均携带HNTV型汉坦病毒;褐家鼠、小家鼠、黄胸鼠携带SEOV型汉坦病毒。结论荆州市HFRS宿主动物以野外捕获黑线姬鼠、褐家鼠为主,分别携带HNTV型、SEOV型汉坦病毒。江陵县、沙市区鼠密度及鼠汉坦病毒阳性率均较高。 刘天 郝海波 郝海波 姚梦雷 侯清波 黄继贵 吴杨 刘漫关键词:肾综合征出血热 宿主动物 褐家鼠 黑线姬鼠 暴雨洪涝灾害后一例肾综合征出血热流行病学调查与病原追溯分析 目的:探讨武汉市蔡甸区暴雨洪涝灾害后一例肾综合征出血热疫情并进行病原追溯,为预防和控制肾综合征出血热提供科学依据. 方法:采用现场流行病学调查和实验室溯源分析. 结果:武汉市蔡甸区暴雨灾害后发生1例肾综合征出血热病例,病... 杨小兵 胡兵 庞蓓蓓 田俊华 汪鹏 邹娇娇 李月荣 张青松关键词:肾综合征出血热 流行病学 汉坦病毒 基因分型 乙型脑炎减毒活疫苗株全长感染性克隆的构建及表达外源基因的初步研究 2014年 通过构建乙型脑炎病毒减毒株SA14-14-2的全长cDNA克隆,来初步探讨将其作为表达载体的可行性,为下一步利用乙型脑炎病毒作为载体构建嵌合病毒打下基础。利用长片段RT-PCR的方法分两段扩增出乙型脑炎病毒cDNA,通过片段两端的酶切位点,将cDNA依次连接到pACYC184载体。进一步利用分子克隆的手段,在乙型脑炎病毒基因组cDNA的3′非编码区插入增强型绿色荧光蛋白(Ehanced green fluorescent portein,EGFP)基因作为报告基因,通过体外转录和转染,拯救乙型脑炎病毒和表达绿色荧光蛋白的乙型脑炎嵌合病毒。采用RT-PCR、蚀斑实验和荧光显微镜观察等方法对恢复病毒进行鉴定。对恢复病毒进行连续6次细胞传代,从病毒生长特性和结构基因稳定性的角度对恢复病毒传代稳定性进行研究。结果表明成功地扩增并构建得到乙型脑炎病毒的全长cDNA,在此基础上进一步构建得到了乙型脑炎嵌合病毒rJEV-EGFP全长cDNA,经过体外转录和转染获得了活的rJEV病毒及嵌合病毒rJEV-EGFP,并采用了多种方法对其进行了鉴定,拯救出的恢复病毒在已传代的代次内稳定性良好,嵌合病毒rJEV-EGFP可稳定地表达绿色荧光蛋白。本研究应用反向遗传学技术构建并在BHK-21细胞中成功地拯救出了rJEV和rJEV-EGFP活病毒,同时也表明乙型脑炎病毒SA14-14-2株可以作为载体来表达外源基因。 胡兵 杨爽 方志正关键词:乙型脑炎病毒 反向遗传学 增强型绿色荧光蛋白 2019-2020年冬春季麻城市社区季节性流感病毒感染率血清学队列研究 2024年 目的确定社区内有血清学证据的各亚型/系季节性流感病毒感染率,分析影响季节性流感病毒感染的因素。方法在2019年11月(即流感流行季节前)麻城市15个村/街道招募6~59岁居民建立队列,开展横断面基线调查,采集血清,收集人口学及儿童防护知识、行为、态度等信息,在次年7月(即流感流行季节后)进行横断面随访调查,再次采集血清。两次调查配对血清通过血凝抑制(haemagglutination inhibition,HI)试验或微量中和(micro-neutralisation,MN)试验,使用各亚型/系流感病毒流行代表株作为抗原,测定流感病毒特异性抗体,如果抗体有四倍或以上增高,确定为感染。运用单因素和多因素Logistic回归分析感染A(H3N2)、B/Victoria流感病毒的影响因素。结果2019年11月,队列纳入800名研究对象,包括340名6~17岁儿童和460名18~59岁成年人,2020年7月随访到605名研究对象(包括224名儿童、381名成人)并获得了流行季节前后配对血清。25.3%(153/605)的研究对象至少感染过一种亚型/系的季节性流感病毒。儿童各亚型/系流感病毒总感染率为44.2%(95%CI:37.6%~50.8%)显著高于成人的感染率14.1%(95%CI:10.7%~17.7%)。儿童的A(H3N2)流感病毒感染率最高,其次为B/Victoria。流感流行季节前A(H3N2)[OR=0.88(95%CI:0.84~0.93)]、B/Victoria[OR=0.97(95%CI:0.95~0.99)]病毒的MN或HI抗体水平与儿童是否感染该亚型/系流感病毒相关。结论2019—2020冬春季节麻城市6~59岁居民季节性流感病毒感染率较高,近50%的6~17岁儿童感染过季节性流感病毒。流行季节前较高的HI/MN抗体水平可能降低A(H3N2)和B/Victoria流感病毒的感染风险。 范津菘 占建波 陈悦 董少波 鲁健 郭俊峰 林小靖 蓝雨 秦堃 周剑芳 胡兵 徐翠玲关键词:季节性流感 队列研究 血凝抑制试验 抗体滴度