肖小平
- 作品数：10 被引量：12H指数：2
- 供职机构：广州医科大学基础学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 生长抑素类似物通过细胞生长抑制和细胞溶解途径以SSTR2依赖的方式抑制癌细胞增殖被引量：2
- 2009年
- 通过在两个具有不同内源性生长抑素受体(SSTR)表达谱的癌细胞系capan-2和A549中过表达SSTR2,用生长抑素类似物(SSA)奥曲肽或者伐普肽(RC-160)处理实验组的癌细胞,对过表达SSTR2和生长抑素类似物的抗肿瘤增殖效果通过细胞增殖实验进行了研究,而且进一步通过免疫印记的方法研究了SSA/SSTR2涉及的信号通路.结果表明,过表达SSTR2明显抑制了内源性SSTR2表达阳性和阴性癌细胞增殖,而单独使用奥曲肽或者伐普肽对癌细胞增殖影响甚微.然而,在过表达SSTR2的癌细胞中奥曲肽或者伐普肽则可明显抑制癌细胞的增殖,而且具有剂量依赖性.深入研究发现SSA/SSTR2是通过细胞周期阻滞和促凋亡来抑制细胞增殖.结果提示SSTR2可作为候选基因用于本身SSTR2表达阳性或阴性肿瘤的基因治疗,细胞内SSTR2的水平可能是影响肿瘤进程和SSA治疗效果的一个关键因素.
- 邹奕肖小平李月琴张欣周天鸿
- 关键词：生长抑素激酶奥曲肽
- 过表达SSTR2通过多种信号途径抑制SSTR2表达阳性的肿瘤生长被引量：4
- 2009年
- 目的:研究转基因SSTR2对有不同内源性SSTRs表达谱的癌细胞增殖抑制及其潜在信号途径。方法:在裸鼠身上接种过表达SSTR2或LacZ的capan-2cell和A549细胞,观察肿瘤生长情况。在裸鼠身上构建capan-2移植瘤模型,通过皮下注射携带SSTR2基因的腺病毒,观察肿瘤生长情况。免疫印迹法分析可能涉及的信号途径。结果:过表达SSTR2能够抑制具有不同内源性SSTRs表达谱肿瘤的生长,包括capan-2具有内源性SSTR2表达。SSTR2过表达明显影响了凋亡途径、MAPK途径以及血管生成中的一些组件。结论:SSTR2有希望成为使用转基因治疗多数癌症的候选基因。
- 肖小平李月琴徐彬李弘剑张欣周天鸿邹奕
- 关键词：腺病毒异种移植
- 稳定表达人巨细胞病毒蛋白pUL23细胞系建立及其功能研究被引量：1
- 2010年
- 目的:建立稳定表达人巨细胞病毒UL23基因的HELF细胞系,研究病毒蛋白在宿主细胞内行为,为进一步研究人巨细胞病毒蛋白pUL23的功能提供依据。方法:通过PCR技术从人巨细胞病毒基因组中扩增出UL23基因,通过分子克隆技术构建重组逆转录病毒表达载体pLEGFP-N1-FLAG-UL23。将该载体导入Am-phoPackTM-293细胞,收获重组逆转录病毒,然后感染HELF细胞,HELF经持续G418抗性筛选后获得稳定表达UL23基因的细胞系。采用激光共聚焦显微镜观察病毒蛋白在细胞内的定位。结果:RT-PCR、Western blotting结果证实病毒基因UL23能够整合到宿主细胞基因组中,并能在宿主细胞中稳定表达病毒蛋白。共聚焦显微镜观察到病毒蛋白pUL23定位于细胞质,处于细胞核周边。结论:利用逆转录病毒载体介导的基因转移技术,成功构建了稳定表达UL23基因的转基因细胞系。该病毒蛋白在宿主细胞质中的定位,提示病毒蛋白发挥功能的空间位于细胞核周边,有利地推进了人巨细胞病毒蛋白pUL23功能研究的进程。
- 杨丹丽肖小平宫君原员月明李月琴张欣邹弈周天鸿李弘剑
- 关键词：巨细胞病毒逆转录病毒
- 病毒蛋白编码pUL23蛋白能够抵抗γ干扰素的抗病毒作用及机制的研究
- 人巨细胞病毒HCMV在人群中感染非常普遍,对健康人一般不致病,但对免疫低下人群如儿童、器官移植、艾滋病患者等会致病,甚至导致死亡。pUL23是HCMV UL23基因编码的蛋白,实验室前期研究发现pUL23能够与干扰素诱导...
- 肖小平李弘剑员月明李月琴周天鸿
- 关键词：人巨细胞病毒干扰素NMI组蛋白去乙酰化酶
- 文献传递
- 稳定表达人巨细胞病毒pUL49蛋白人胚肺成纤维细胞系的建立
- 2010年
- 目的用逆转录病毒载体介导的基因转移方法,建立稳定表达人巨细胞病毒(HCMV)UL49基因的HELF细胞系。方法首先应用RT-PCR从感染HCMV的HELF细胞RNA中扩增UL49基因,克隆到逆转录病毒载体pLEGFP-N1上,以此构建重组逆转录病毒载体pLEGFP-N1-FLAG-UL49,并转染AmphoPack-TM-293细胞,收集逆转录病毒,感染HELF细胞,经G418抗性筛选出阳性细胞。结果经IFA、RT-PCR及Western blot检测到UL49基因在稳定细胞系中表达。结论 HELF-PLEGFP-N1-FLAG-UL49稳定细胞系构建成功。此细胞系为进一步研究HCMV pUL49蛋白的功能提供了一个有力工具。
- 宫君原肖小平员月明李月琴张欣邹弈李弘剑周天鸿
- 关键词：人巨细胞病毒逆转录病毒稳定细胞系
- 利用酵母双杂交系统筛选与人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23相互作用的病毒编码蛋白被引量：3
- 2011年
- 人巨细胞病毒(HCMV)UL23基因编码病毒皮层蛋白,该基因缺失时,病毒在人包皮成纤维细胞(HFF)中的繁殖速度加快.为进一步阐述HCMV UL23基因编码产物pUL23的功能及调控机制,采用鸟枪法构建了融合于GAL4活性区域的HCMV Towne株基因组随机表达文库.利用酵母双杂交技术,以pGBKT7-UL23为诱饵质粒,从构建的HCMV基因组表达文库中筛选到与pUL23相互作用的病毒编码蛋白pUL24.GST-pull down实验和免疫共沉淀实验进一步确认两种病毒蛋白之间的相互作用.结果表明,构建的HCMV基因组表达文库能够用于GAL4酵母双杂交系统筛选与诱饵蛋白相互作用的病毒自身编码蛋白.病毒蛋白pUL23和pUL24之间具有相互作用,这为进一步阐述pUL23在HCMV感染过程中的功能提供依据.该研究为揭示HCMV病毒感染机制奠定了基础.
- 肖静胡嘉淼肖小平员月明刘明亮曾宝娟李婧惠周天鸿冉艳红李弘剑
- 关键词：人巨细胞病毒BAC基因组文库蛋白质相互作用
- 人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23与宿主蛋白IGFBP4相互作用的鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的:利用蛋白质相互作用的技术筛选与pUL23相互作用宿主蛋白,为研究pUL23蛋白对人巨细胞病毒繁殖的影响提供线索。方法:通过酵母双杂交系统从人胚肾cDNA文库筛选与pUL23相互作用的宿主蛋白;通过GST-pu ll-down技术研究二者体外物理性相互作用;免疫共沉淀技术进一步研究二者在胞内相互作用。结果:Pu ll-down技术、免疫共沉淀技术确定了宿主蛋白IGFBP4与pUL23具有相互作用。结论:上述结果为研究pUL23蛋白调节病毒自身繁殖功能提供重要依据。
- 肖小平周天鸿宫君原杨丹丽员月明李月琴邹奕张欣李弘剑
- 关键词：人巨细胞病毒
- 病毒蛋白编码pUL23蛋白能够抵抗γ干扰素的抗病毒作用及机制的研究
- 人巨细胞病毒HCMV在人群中感染非常普遍，对健康人一般不致病，但对免疫低下人群如儿童、器官移植、艾滋病患者等会致病，甚至导致死亡。pUL23是HCMV UL23基因编码的蛋白，实验室前期研究发现pUL23能够与干扰素诱导...
- 肖小平李弘剑员月明李月琴周天鸿
- 关键词：人巨细胞病毒Γ干扰素抗病毒作用磷酸化
- 人干扰素结合蛋白35在人巨细胞病毒感染过程中的表达及意义
- 2017年
- 目的探讨人干扰素结合蛋白35(interferon-induced protein 35,IFP35)在人巨细胞病毒感染过程中的表达及意义。方法依据是否感染人巨细胞病毒将血细胞分为感染组和未感染组;根据人包皮成纤维细胞转染si RNA和阴性si RNA分为基因敲减组和阴性对照组;采用SYBRGreen荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和蛋白质印迹法检测不同分组中IFP35的表达量;用人巨细胞病毒感染人包皮成纤维细胞,采用SYBRGreen荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测不同感染复数的人巨细胞病毒感染人包皮成纤维细胞表达IFP35的差异以及相同感染复数的人包皮成纤维细胞感染人巨细胞病毒0、12、24、48、96小时后IFP35表达的差异;敲减IFP35基因后,检测人巨细胞病毒量的变化情况。结果感染组血细胞中IFP35表达量显著高于未感染组(P<0.05)。感染后细胞中IFP35的表达量随人巨细胞病毒浓度的增加而增加,与经感染复数为0的人巨细胞病毒感染后的细胞比较,经感染复数为0.01、0.1及1.0的人巨细胞病毒感染后细胞中IFP35的表达量均显著升高(P<0.05)。IFP35的表达量随人巨细胞病毒感染时间的延长而增加,且与0小时相比,其余时间其表达量均显著增加(P<0.05)。基因敲减组人包皮成纤维细胞中IFP35的表达水平显著低于阴性对照组(P<0.05)。敲减IFP35基因的人巨细胞病毒DNA基因拷贝数较未敲减IFP35基因的人巨细胞病毒显著增加(P<0.05)。结论 IFP35的表达量与人巨细胞病毒感染的浓度和时间均呈正相关。IFP35基因的表达可能在一定程度上抑制人巨细胞病毒的感染。
- 肖小平宫君原
- 关键词：人巨细胞病毒细胞生长
- 生长抑素2型受体对细胞增殖的影响
- 背景与目的生长抑素(somatostatin，SST)是一种环状多肽类激素，由Brazeau等于1973年从羊下丘脑中分离提取。现在认为SST对许多疾病如肿瘤、炎症、糖尿病、癫痫、早老性痴呆、帕金森病、亨廷顿舞蹈病以及艾...
- 肖小平
- 关键词：生长抑素腺病毒基因治疗MTT
- 文献传递
