翟素珍 作品数:13 被引量:24 H指数:3 供职机构: 贵州医科大学 更多>> 发文基金: 贵州省教育厅自然科学研究项目 贵阳市科学技术计划项目 贵州省科学技术基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
α-硫辛酸促进帕金森病大鼠黑质细胞铁转出的机制 被引量:3 2018年 目的检测α-硫辛酸(α-LA)对帕金森病(PD)模型大鼠中脑黑质的铁调节蛋白2(IRP2)、膜铁转运蛋白1(FP1)表达的影响,探讨α-LA在PD模型大鼠黑质调节铁转出的机制。方法健康雄性SD大鼠60只,随机分为假手术组(n=15)、模型组(n=45)。采用立体定位技术将6-羟基多巴胺(6-OHDA)注入大鼠右侧纹状体建立PD模型,假手术组注入同等量的生理盐水。4周后,取30只模型大鼠随机分为PD模型组(n=15)和PD治疗组(n=15)。PD治疗组腹腔注射α-LA 50 mg/(kg·d),连续2周,PD模型组给予同等量生理盐水。治疗14 d后,用圆筒试验(cylinder test)测试大鼠左前肢的使用率;取各组大鼠右侧中脑黑质,采用免疫组织化学染色法检测酪氨酸羟化酶(TH)的表达和分布,采用普鲁士蓝染色法检测铁阳性细胞的数量变化,采用Western blot法检测IRP2和FP1的水平。结果与假手术组相比,PD模型组左前肢使用率显著降低;TH阳性细胞数明显减少,黑质铁阳性细胞数量明显增加;IRP2水平明显增加,FP1水平降低。与PD模型组相比,PD治疗组左前肢使用率明显增加;TH阳性细胞数明显增加,黑质铁阳性细胞数量明显减少;IRP2水平降低,FP1水平增加。结论α-LA能够下调IRP2水平,通过IRP2/IRE通路,上调FP1水平,促进细胞对铁离子的转出,降低PD模型大鼠黑质的铁沉积,减轻6-OHDA诱导的PD模型大鼠脑损伤。 蔡婷 魏操 翟素珍 邰胜燕 张春林 焦玲关键词:帕金森病 Α-硫辛酸 α-硫辛酸对帕金森病细胞模型FTH和FTL的影响 2019年 目的探讨α-硫辛酸(α-LA)对6-羟基多巴胺(OHDA)诱导的帕金森病(PD)细胞模型铁蛋白重链(FTH)和铁蛋白轻链(FTL)表达的影响。方法用噻唑蓝(MTT)法确定6-OHDA最适造模浓度和α-LA治疗浓度。实验分为对照组、模型组和α-LA组。超微量紫外分光光度仪测定各组细胞内铁和丙二醛(MDA)含量;Western印迹检测铁调节蛋白(IRP)1、IRP2及FTH和FTL的表达。结果与对照组相比,模型组细胞存活率显著降低(P<0.01),细胞内铁含量、MDA含量显著增加(P<0.01),IRP1、IRP2表达水平显著上升(P<0.01),FTH、FTL表达水平显著下降(P<0.01)。与模型组相比,α-LA组细胞存活率明显上升(P<0.01),MDA、铁含量均明显减少(P<0.01),IRP1、IRP2表达水平明显下降(P<0.01),FTH、FTL表达水平明显上调(P<0.01)。结论α-LA降低了PD细胞模型中的铁含量和氧化应激水平,对PD细胞模型具有保护作用。 肖永珊 焦玲 翟素珍 邰胜燕 杨慧 张春林关键词:帕金森病 硫辛酸 美洲大蠊几丁质酶基因的原核表达及蛋白纯化 被引量:3 2016年 昆虫几丁质酶是昆虫几丁质代谢不可或缺的关键酶类。本研究旨在构建美洲大蠊几丁质酶Pa Cht1基因原核表达载体,纯化并鉴定Pa Cht1重组蛋白,为后续酶活等测定奠定基础。定向克隆Pa Cht1基因成熟肽序列至原核表达载体pET32a(+)上,将构建成功的pET32a-Cht1重组表达质粒导入大肠埃希菌Rosetta中,分别对诱导剂IPTG浓度和诱导时间进行优化,确定最佳诱导浓度和诱导时间,并对表达产物进行可溶性分析。表达产物经镍离子柱纯化后通过Western Blot鉴定。结果表明,美洲大蠊几丁质酶Pa Cht1成熟肽基因编码区长1 083 bp,编码360个氨基酸。最佳诱导浓度和诱导时间分别为0.2 mmol/L和4 h。所得重组蛋白大小约60 k D,与预期结果大小一致,重组蛋白主要以包涵体的形式存在。Western Blot鉴定重组蛋白可与6×His-tag单克隆抗体特异性结合。说明成功构建了原核表达载体pET32a-Cht1,并诱导表达获得了重组几丁质酶蛋白。 李宏伟 王吉平 张堤 张春林 赵文静 张晶 翟素珍关键词:美洲大蠊 几丁质酶基因 原核表达 蛋白纯化 致倦库蚊Cecropin基因家族的比较和系统发育分析 被引量:3 2016年 利用生物信息学方法比较分析了致倦库蚊Cecropin家族4成员的基因结构、氨基酸序列、蛋白理化特性,预测蛋白空间结构,并基于7种昆虫绘制分子进化树,随后使用RT-PCR方法获取致倦库蚊Cecropin家族4成员的c DNA。结果表明:致倦库蚊Cecropin家族基因有两条正向编码,两条反向编码,长度为330~544 bp,由2个外显子和1个内含子构成;氨基酸序列长度为59~61 aa,具有两条基序和多个保守位点;编码的蛋白理论分子量为6 284.6~6 619.0 k D,p I值为10.36~11.24,亲水性平均系数为0.393~0.551;蛋白预测的二级结构和三级结构结果基本一致,它们具有1个信号肽结构域和1个催化结构域,结构域主要由α-螺旋构成;7种昆虫的Cecropin蛋白进化关系与物种进化关系基本一致,并以“目”或“亚目”为单位分别聚类,CPIJ005108与致倦库蚊Cecropin祖先基因最相似。本研究的分析结果可为蚊科Cecropin结构和功能的研究提供有价值的信息。 赵文静 张晶 张春林 翟素珍 王吉平关键词:致倦库蚊 CECROPIN 基因家族 生物信息学 致倦库蚊天蚕素CecB2基因的原核表达及蛋白纯化 2016年 构建致倦库蚊(贵阳株)天蚕素B2(CecB2)基因原核表达载体,并原核表达获得重组蛋白。定向克隆CecB2成熟肽序列至原核表达载体pET32a(+)上,将成功构建的pET32a-CecB2重组表达质粒转化大肠埃希菌Rosetta中经IPTG诱导表达,对IPTG诱导浓度和诱导时间优化后表达所得目的蛋白采用镍离子亲和层析纯化,SDS-PAGE和Western blot检测鉴定表达蛋白。结果表明,成功构建原核表达载体pET32a-CecB2,IPTG浓度和时间优化结果为IPTG浓度为0.05mmol/L,诱导时间为3h。SDS-PAGE检测获得大小约25ku的可溶性纯化蛋白,Western blot鉴定纯化蛋白可与鼠抗His-tag单克隆抗体发生抗原抗体结合反应。说明所构建原核表达载体pET32a-CecB2能在大肠埃希菌中可溶表达,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。 王吉平 张堤 张春林 赵文静 张晶 翟素珍关键词:致倦库蚊 原核表达 蛋白纯化 致倦库蚊几丁质合成酶基因CqCHS1和CqCHS2的表达与分析 被引量:3 2016年 利用生物信息学方法比较分析致倦库蚊几丁质合成酶CqCHS1、CqCHS2的基因结构、氨基酸序列、蛋白理化特性,预测蛋白跨膜结构和空间结构,并基于6种昆虫绘制分子进化树,随后使用Real-time PCR方法探测CqCHS1、CqCHS2基因在致倦库蚊不同发育时期的表达谱。结果显示:CqCHS1、CqCHS2基因长度分别为39 206 bp和17 920 bp,分别包含10个和9个外显子;CqCHS1、CqCHS2氨基酸序列长度分别为1 579 aa和1 214 aa;理论分子量分别为179.581 k D和138.816 k D,等电点分别分别为6.21和8.28,亲水性平均系数分别为-0.076和0.101;预测跨膜次数分别为17次和13次;二者具有相近的二级结构组成和三级结构。进化树显示,6种昆虫CHS1和CHS2分别聚类,形成两大分支。它们CHS的同源性与物种的亲缘关系基本一致。Real-time PCR结果显示,CqCHS1在卵期呈低表达,幼虫时期表达增高,到蛹期达到峰值,成虫期表达量降低。CqCSH2在幼虫期表达量最低,卵和蛹期表达量较低且差异不大,成虫期表达量最大。本研究的结果可为深入了解致倦库蚊的发育情况提供有价值的信息,并为围绕几丁质代谢为基础的杀虫剂研制,提供潜在的药物靶点。 赵文静 张春林 翟素珍 孙谦 张晶关键词:致倦库蚊 几丁质合成酶 基因表达模式 生物信息学 一种基于大数据的医学生物信息数据分析方法 本发明公开一种基于大数据的医学生物信息数据分析方法,包括步骤一、原始数据获取并处理得到待分析数据,步骤二、基于互联网大数据获取比对数据及案例数据,步骤三、建立分析诊断模型进行异常数据的筛选及诊断预测,步骤四、结合缓存病例... 翟素珍 李洪星 朱玉苹 钟曦黑质磁敏感加权成像诊断帕金森病的Meta分析 被引量:4 2015年 目的采用Meta分析评价黑质磁敏感加权成像(SWI)对帕金森病(PD)的临床诊断价值。方法对Web of Science、PubMed、中国生物医学文献数据库等数据库中公开发表的有关SWI诊断PD的文献进行评价和筛选,采用RevMan5.3、Stata11.2统计软件检验异质性。根据异质性结果选择相应效应模型,计算总体效应值及其95%可信区间(95%CI),最后进行敏感度和漏斗图分析。结果共收集到符合纳入标准文献9篇,累计正常对照组389名,病例组355例。PD组与正常对照组的黑质相位值总体效应检验[Z=1.11,P=0.27,95%CI(-0.05,0.11)]、黑质网状带相位值总体效应检验[Z=1.82,P=0.07,95%CI(-0.00,0.01)]差异无统计学意义,黑质致密带相位值总体效应检验[Z=27.88,P<0.00001,95%CI(-0.06,-0.05)对诊断PD有统计学意义。漏斗图分布呈倒漏斗形,近似对称;Begg's检验、Egger's检验证实发表无偏倚;敏感度分析结果可靠。结论 Meta分析提示SWI测量黑质致密带相位值有助于诊断PD。 杨铁 周波 李东璟 翟素珍 王吉平 张春林 焦玲关键词:帕金森病 黑质 磁敏感加权成像 META分析 球孢白僵菌转SPHvt/GNA融合毒力蛋白基因菌株的构建及其对斯氏按蚊毒力的测定 目的:构建转SPHvt/GNA融合毒力蛋白基因的球孢白僵菌菌株,使得该转基因菌株对蚊虫的毒力增强,从而为控制蚊虫及蚊媒传染病提供新的思路。 方法: 1.将已知的澳大利亚漏斗网蜘蛛(Hadronyche versuta... 翟素珍关键词:球孢白僵菌 蚊媒传染病 菌株筛选 球孢白僵菌Bb_bm01菌株PacC基因突变体的构建及其毒力和孢子萌发率的测定 被引量:2 2016年 通过敲除球孢白僵菌(Beauveria bassiana)菌株bm01的PacC基因,研究了PacC基因敲除对球孢白僵菌毒力和分生孢子萌发速率的影响。利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的转化方法转化Bb_bm01,通过同源重组敲除Bb_bm01的PacC基因,筛选ΔPacC基因敲除菌株,获得了遗传稳定的ΔPacC基因敲除菌株。通过毒力测定,对比了野生菌株和ΔPacC基因敲除菌株对家蚕和大蜡螟毒力的差异,发现ΔPacC基因敲除菌株对家蚕和大蜡螟毒力都减弱,差异具有统计学意义(p<0.01),表明在Bb_bm01菌株中的PacC基因与它的致病性相关;另外,比较ΔPacC基因敲除菌株与野生型菌株Bb_bm01在SDB液体培养基中的孢子萌发率,发现ΔPacC基因敲除菌株孢子萌发明显减慢,表明PacC基因参与调控孢子萌发。 翟素珍 王吉平 陈晶晶 卢海泉 王四宝 张春林关键词:球孢白僵菌 孢子萌发