翟志臣
- 作品数:7 被引量:3H指数:1
- 供职机构:华南理工大学更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程医药卫生交通运输工程更多>>
- Ⅰ型胶原形态对细胞软骨分化的影响及其机理研究
- 组织工程与再生医学为解决软骨有限的修复能力提供了全新的方法,间充质干细胞(MSCs)可克服软骨细胞的来源限制而在这一修复方法中广泛应用。如何更安全高效地将干细胞诱导为软骨细胞是目前的瓶颈之一。细胞所处的微环境及与细胞相互...
- 翟志臣
- 关键词:软骨分化胶原MSCSMAPK信号通路
- 文献传递
- 一种仿生胶原膜包被的培养器皿及制备方法
- 本发明公开了一种仿生胶原膜包被的培养器皿及制备方法,包括如下步骤:(1)将胶原醋酸溶液与盐缓冲液混合,调整混合液的pH至中性;(2)将步骤(1)的混合液装入培养器皿,于40摄氏度以下保温待胶原重组完成;(3)将步骤(2)...
- 王迎军翟志臣姚咏嫦
- 一种仿生胶原膜包被的培养器皿及制备方法
- 本发明公开了一种仿生胶原膜包被的培养器皿及制备方法,包括如下步骤:(1)将胶原醋酸溶液与盐缓冲液混合,调整混合液的pH至中性;(2)将步骤(1)的混合液装入培养器皿,于40摄氏度以下保温待胶原重组完成;(3)将步骤(2)...
- 王迎军翟志臣姚咏嫦
- 文献传递
- Lysine 21突变对树干毕赤氏酵母木糖还原酶辅酶依赖性的影响
- 木糖还原酶是重组酿酒酵母工程菌利用木糖生成乙醇代谢途径中的关键酶,该关键酶在利用木糖时依赖NADPH而不是NADH是导致酿酒酵母代谢木糖生成乙醇的最终产率低的主要原因之一。本研究利用质粒载体pET28b分别将突变后的基因...
- 曾琦锴杜红丽翟志臣林小琼林影
- 关键词:发酵微生物木糖还原酶基因表达
- 文献传递
- Lysine 21突变对树干毕赤氏酵母木糖还原酶辅酶依赖性的影响被引量:2
- 2008年
- 木糖还原酶是重组酿酒酵母工程菌利用木糖生成乙醇代谢途径中的关键酶,该关键酶在利用木糖时依赖NADPH而不是NADH是导致酿酒酵母代谢木糖生成乙醇的最终产率低的主要原因之一。为了改变树干毕赤氏酵母木糖还原酶的辅酶依赖性,对它的第21位赖基酸Lys进行了突变。利用质粒载体pET28b分别将突变后的基因K21A-XYL1、K21R-XYL1及野生基因WT-XYL1在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中进行表达,表达后的蛋白经His-Tag纯化柱纯化后测定酶学性质。结果表明:K21R突变子的辅酶依赖性没有改变,但K21A突变子的辅酶依赖性由NADPH完全逆转为NADH。
- 曾琦锴杜红丽翟志臣林小琼林影
- 关键词:木糖还原酶定点突变
- 一种仿生胶原膜包被片及其制备方法
- 本发明公开了一种仿生胶原膜包被片及其制备方法。该方法包括:配制胶原重组缓冲液,将胶原的醋酸溶液与胶原重组缓冲液混合均匀,得到混合液,调节所述混合液pH为中性;将载体竖立浸泡在混合液中,保温处理,随后烘干,得到所述仿生胶原...
- 翟志臣郝丽静石志锋卞钲淇薛永业
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- 树干毕赤酵母木糖还原酶Lysine270定点突变的理性设计被引量:1
- 2009年
- Lysine270是树干毕赤酵母木糖还原酶(PsXR)与还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)或还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)形成结合口袋的关键氨基酸之一.为研究该位点对PsXR辅酶偏好性的影响,用其它19种氨基酸替代Lysine270,构建19种不同的木糖还原酶(XR)突变子,利用同源建模和分子对接的方法评价不同突变子与NAD+或NADP+之间的相互作用,并从中选择突变子K270R和K270N进行实验验证.突变基因及野生基因用异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(IPTG)在大肠杆菌内进行诱导表达,经纯化后进行酶学性质研究.结果发现:K270R突变使得XR与NADP+的结合能力降低,米氏常数Km由0.025mmol/L升高到0.050mmol/L;K270N突变使得XR与NADP+不能结合.实验结果亦证实,通过理性选择得到的K270N突变子的辅酶依赖性由NADPH完全逆转为NADH.
- 曾琦锴林影翟志臣林小琼杜红丽
- 关键词:木糖还原酶定点突变生物信息学