章立娟
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：传染病预防控制国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 不同来源RNA聚合酶对霍乱弧菌分型噬菌体VP3启动子的作用
- 2011年
- 目的:研究不同来源的RNA聚合酶对预测的霍乱弧菌分型噬菌体VP3启动子的作用。方法:以含有预测的VP3启动子区的片段取代质粒pRL-null的T7启动子区,以海肾萤光素酶基因Rluc为报告基因,在霍乱弧菌N16961内检测霍乱弧菌RNA聚合酶对克隆的启动子区的作用;将上述重组质粒和表达VP3 RNA聚合酶的质粒共转化大肠杆菌JM109,检测大肠杆菌和VP3的RNA聚合酶对克隆的启动子区的作用。结果:N16961的RNA聚合酶不能识别并作用于启动子P1、P2、P5、P6、P10和P12,JM109的RNA聚合酶可能识别并作用于启动子P7和P11;只有P2、P7、P8、P9、P13、P16和P17在JM109内可以被克隆表达的VP3 RNA聚合酶识别转录。结论:宿主菌N16961与非宿主菌JM109的RNA聚合酶识别转录VP3启动子的能力不同,可能与噬菌体的宿主特异性有关;VP3的RNA聚合酶对大部分有活性的VP3启动子具有直接启动转录作用,但部分启动子可能需要VP3或宿主蛋白的辅助作用才能表现出更强的活性;VP3启动子对VP3 RNA聚合酶的特异性也不同,P1、P2和P12对VP3的RNA聚合酶具有高度特异性,P7和P11的特异性较弱。
- 张京云张茜章立娟阚飙
- 关键词：RNA聚合酶启动子噬菌体霍乱弧菌
- 霍乱弧菌分型噬菌体VP3尾丝蛋白的表达及功能分析被引量：1
- 2008年
- 目的研究霍乱弧菌分型噬菌体VP3的尾丝蛋白的受体结合功能,探讨VP3感染机制。方法分析VP3的尾丝蛋白gp44序列并克隆表达和纯化,以荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察尾丝蛋白与VP3敏感株和抗性株的结合能力。利用重叠PCR扩增、测定并分析对VP3有天然抗性的霍乱弧菌野生株的wav基因簇的序列。结果VP3的gp44与T7噬菌体尾丝蛋白gp17的同源性高。表达的重组蛋白His-gp44与大肠杆菌不能结合,与VP3敏感株和天然抗性株结合,敏感株的核心寡糖基因簇(wav)基因缺失后不能结合。能与His-gp44结合的敏感株和抗性株,其wav基因簇序列只有一个碱基的差异。结论VP3的gp44是尾丝蛋白,能与霍乱弧菌表面受体特异性结合。
- 张京云张茜李伟章立娟阚飙
- 关键词：霍乱弧菌噬菌体
