秦永丽
- 作品数：12 被引量：32H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划公益性行业(农业)科研专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 蓝舌病病毒17型VP2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定被引量：13
- 2011年
- 为制备蓝舌病病毒(BTV)血清17型VP2蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究用原核表达系统部分重叠表达的两段VP2蛋白共同免疫BALB/c小鼠,采用细胞融合技术获得杂交瘤细胞,通过以重组VP2蛋为白包被抗原的间接ELISA筛选获得2株稳定分泌抗BTV17 VP2蛋白的MAbs杂交瘤细胞株,分别命名为3F4和4H10。Ig亚类鉴定2株MAbs均为IgG1/κ链。Western blot证明,2株MAbs均能识别重组VP2蛋白。间接免疫荧光试验表明:2株MAbs均与BTV17呈阳性反应,其中MAb 3F4与BTV1、BTV2、BTV3、BTV5、BTV8、BTV11、BTV13、BTV16、BTV23、茨城病病毒(IBAV)、牛轮状病毒(BRV)、牛呼肠孤病毒(RV)均呈阴性反应,但与BTV10和BTV24呈弱阳性反应。利用合成多肽对VP2抗原表位鉴定结果表明,MAb 3F4识别的抗原表位为540DPWNNR545,MAb 4H10识别的抗原表位为540DPWNNRA546。本研究结果为建立BTV17型特异性检测方法及VP2功能研究奠定了基础。
- 王凌凤杨涛孙恩成耿宏伟秦永丽赵晶蔡绪禹刘霓红李文京吴东来
- 关键词：VP2单克隆抗体抗原表位
- 抗蓝舌病病毒VP6和VP7蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3
- 2012年
- 为制备针对蓝舌病病毒(BTV)的单克隆抗体(MAb),本研究利用血清型1型BTV(BTV1)免疫BALB/c鼠,将其脾淋巴细胞与SP2/0进行融合,并用BTV1包被ELISA板,通过间接ELISA方法筛选出3株稳定分泌抗BTV1的MAb的杂交瘤细胞株(2B10、3D4和4H8)。利用表达BTV1主要蛋白的真核表达重组质粒转染BHK-21后,对所制备的杂交瘤细胞株上清进行间接免疫荧光(IFA)以及western blot鉴定,结果显示:2B10和4H8与VP7蛋白反应,而3D4与VP6蛋白反应。同时,IFA鉴定结果进一步表明,3株MAb与24个血清型的BTV均可以发生反应。本研究制备的MAb为建立BTV免疫学检测方法和相关病毒蛋白的功能研究奠定了基础。
- 魏鹏孙恩成刘霓红杨涛徐青元秦永丽赵晶冯瑜菲王文世张翠云吴东来
- 关键词：蓝舌病病毒单克隆抗体VP7蛋白
- 蓝舌病病毒8型VP2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定被引量：8
- 2014年
- 为制备蓝舌病病毒03TV）8型VP2蛋白的单克隆抗体（MAb）TL鉴定其抗原表位，本研究采用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统表达并纯化的重组VP2蛋白免疫BALB／c小鼠，三免后取小鼠脾淋巴细胞与SP2／0细胞进行融合，并以纯化的重组VP2蛋白为包被抗原，通过间接ELISA筛选出两株能够稳定分泌抗BTV8VP2蛋白的MAbs杂交瘤细胞株（2G4和387）。间接免疫荧光结果表明：2G4和387与BTV8均呈阳性反应，与BTV1～7、BTV9-24、茨城病毒、中山病毒以及赤羽病毒均呈阴性反应。Westernblot结果显示，2G4和387均能够识别BTV8及BTV8重组VP2蛋白。Ig亚类鉴定2G4和387均为IgG1／κ链。利用原核表达的96条覆盖VP2全长的麦芽糖结合蛋白（MBP）融合短肽对MAbs的抗原表位进行鉴定，结果表明：MAb2G4识别的抗原表位为捌LCRLLSTIGRKMCNTE^296。本研究结果为BTV8型特异性检测方法的建立及VP2蛋白结构和功能的研究奠定了基础。
- 席娜赵国辉孙恩成秦永丽孙亮魏天徐青元杨涛孙晶刘二战钱爱东吴东来
- 关键词：VP2蛋白真核表达单克隆抗体抗原表位
- 蓝舌病病毒8型VP2蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定
- 蓝舌病(Bluetongue，BT)是由呼肠孤病毒科环状病毒属蓝舌病病毒(Bluetongue virus，BTV)引起的反刍动物虫媒传染病。BTV能感染大多数家养的和野生的反刍动物，因动物的易感性不同表现出不同的临床症...
- 秦永丽
- 关键词：VP2蛋白单克隆抗体抗原表位
- 文献传递
- 蓝舌病病毒8型VP2蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定
- 病(Bluetongue,BT)是由呼肠孤病毒科环状病毒属蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)引起的,主要由库蠓传播的反刍动物烈性非接触性传染病.BT血清型众多,目前已发现24个血清型,最近又相继分离到...
- 秦永丽李俊平李文京吴东来孙恩成耿宏伟徐青元杨涛赵晶王文世魏鹏冯瑜菲
- 关键词：反刍动物蓝舌病病毒VP2蛋白单克隆抗体抗原表位基因鉴定
- 蓝舌病病毒群特异性单克隆抗体的制备
- 本研究以原核表达的血清型17型蓝舌病病毒(BTV-17)的VP7蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,通过常规杂交瘤技术将免疫后小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行融合,以BHK-21细胞繁殖的血清型12型蓝舌病病毒
- 耿宏伟杨涛马健男孙恩成王凌凤魏鹏秦永丽吴东来
- 西尼罗病毒prM基因可溶性表达与抗原性鉴定
- 为进行西尼罗病毒(WNV)NY99株prM蛋白的免疫学研究,通过PCR方法扩增WNV NY99株prM基因,并将其克隆至原核表达载体pMALTM-c2X上,构建重组表达质粒pMALTM-c2X-prM,经IPTG诱导后得...
- 赵晶秦永丽孙恩成杨涛徐青元耿宏伟王凌凤蔡绪禹魏鹏王文世步志高吴东来
- 文献传递
- 西尼罗病毒C基因可溶性表达与抗原性鉴定
- 为进行西尼罗病毒(WNV)NY99株C蛋白的免疫学研究,通过PCR方法扩增WNV NY99株C基因,并将其克隆至原核表达载体pMALTM-c2X上,构建重组表达质粒pMALTM-c2X-C,经IPTG诱导后得到可溶
- 孙恩成杨涛徐青元耿宏伟王凌凤蔡绪禹赵晶秦永丽魏鹏王文世步志高吴东来
- 蓝舌病病毒群特异性单克隆抗体的制备
- 耿宏伟杨涛马健男孙恩成王凌凤魏鹏秦永丽吴东来
- 抗蓝舌病病毒VP7和NS2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：4
- 2011年
- 为建立蓝舌病病毒(BTV)的检测方法和研究该病毒蛋白的功能,本研究利用BTV血清8型(BTV8)免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾淋巴细胞与SP2/0细胞融合,制备单克隆抗体(MAb)。并以BTV8作为包被抗原建立间接ELISA方法,经筛选获得了8株稳定分泌抗BTV8 MAb的杂交瘤细胞株(1B2、1F6、2B1、2D10、3B6、3D9、4D4和4D12)。Western blot结果显示,MAb 1F6、2B1、2D10、3B6、3D9与BTV8 VP7蛋白反应,MAb B2、4D4、4D12与BTV8 NS2蛋白反应。间接免疫荧光结果显示,该8株MAb与24型BTV血清型呈不同的反应谱系。本研究所获得的MAb为建立BTV免疫学检测方法和相关病毒蛋白的功能研究提供了实验依据。
- 秦永丽孙恩成耿宏伟杨涛刘霓红赵晶王凌凤徐青元蔡绪禹李文京吴东来
- 关键词：蓝舌病病毒VP7蛋白单克隆抗体
