祁淑芸
- 作品数:17 被引量:60H指数:4
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家科技支撑计划甘肃省科技重大专项计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 口蹄疫病毒核酸试纸条检测方法的建立被引量:6
- 2015年
- 本研究通过核酸探针与免疫层析相结合的方法,建立了一种简单、敏感、特异的检测口蹄疫病毒的方法。试验利用RT-PCR方法获得口蹄疫病毒3D核苷酸片段,在引物中设计了灵敏度高、特异性好的核酸探针——生物素和地高辛,使扩增产物结合探针。利用胶体金的放大原理将链霉亲和素与金颗粒形成胶体金混合物,从而与RT-PCR产物中的生物素探针结合。硝酸纤维素膜上端标记生物素化山羊抗兔IgG作为指控条带,下端标记抗地高辛抗体以捕获RT-PCR产物中的地高辛探针。组装金标试纸条,检测RT-PCR产物,结果表明该核酸试纸条可以检测到0.3×10^-3-3×10^-3μg/μL,敏感性高于琼脂糖凝胶电泳,两种方法的符合率高,核酸试纸条检测方法是一种敏感性高、成本低且费时短的新型检测方法。该方法为口蹄疫病毒检测提供了一种新的思路。
- 龚真莉蒋韬祁淑芸陈国栋刘艳红李勇
- 关键词:口蹄疫病毒3D基因生物素探针
- 口蹄疫病毒部分免疫功能肽段的合成、鉴定及免疫功能评价
- 2015年
- 利用微波多肽合成仪Liberty,合成O型口蹄疫病毒VP1 140~160和200~213氨基酸序列的两条肽段,并用高压液相色谱仪及质谱分析仪就合成的多肽片段进行分析纯化和鉴定;将合成的多肽片段作为半抗原与载体蛋白BSA偶联,免疫小鼠,进行血清制备和抗体效价测定.结果表明:成功合成了口蹄疫2条免疫功能短肽,其纯度均达到80%以上.半抗原成功与载体蛋白偶联;小鼠抗血清经过抗体效价检测证明半抗原与载体蛋白偶联组的抗体水平高于其余2个对照组,但是达不到免疫保护的水平.同时说明Liberty是一种操作简单、方便,合成效率高的多肽合成仪,可高效合成研究用多肽.
- 龚真莉蒋韬祁淑芸陈国栋李勇刘艳红
- 关键词:口蹄疫病毒
- 一种用于检测口蹄疫病毒抗体的抑制ELISA方法及应用
- 本发明涉及一种用于检测口蹄疫病毒抗体的抑制ELISA方法及应用,属于生物技术技术领域,本发明利用将阴阳性血清及被检血清直接在已包被捕获抗体的ELISA板上稀释后紧接着加入等量的稀释至工作浓度的病毒抗原,同时设置至少4孔病...
- 周广青马军武邵军军常惠芸龚真莉郭建宏祁淑芸李苗苗何继军
- 口蹄疫病毒单链抗体基因的构建及其推导蛋白三维结构的分子模拟
- 2009年
- 用口蹄疫病毒(FMDV)Asia1/JS/China/2005株灭活抗原免疫家兔,从兔脾细胞中提取RNA作为模板,通过PCR及重叠PCR方法构建出FMDV的单链抗体基因。测序结果显示,序列中有重链可变区(VH)及轻链可变区(VL)基因,经Blast比较,发现VH、VL的相似性最高分别可达81.0%和93.0%,且在序列中有连接VH及VL的柔性接头(Gly4Ser)3。用EXPASY软件包预测了推导蛋白的特性。运用Swiss-pdb viewer软件的SWISS-Model处理器对构建的单链抗体基因推导的蛋白序列进行了三维结构的分子模拟。拉马钱德兰图证明,所模拟的单链抗体的三维结构较为合理。
- 刘涛周广青马军武林密祁淑芸冯霞马明仁
- 关键词:口蹄疫病毒单链抗体分子模拟
- 口蹄疫病毒液相阻断BSA-ELISA抗体检测试剂盒及应用
- 本发明涉及一种口蹄疫病毒液相阻断BSA‑ELISA抗体检测试剂盒及应用,属于生物技术领域,本发明通过口蹄疫病毒抗原的浓缩冻干工艺处理抗原;通过豚抗IgG‑生物素与HRP‑SA相结合建立新的酶联免疫吸附试验方法,同时操作方...
- 周广青马军武邵军军常惠芸龚真莉祁淑芸马米灵李苗苗何继军郭建宏
- 文献传递
- 口蹄疫病毒毒株库创建及疫苗和诊断技术研发与应用
- 张永光王永录刘在新马军武尚佑军方玉珍曹轶梅祁淑芸张强潘丽
- 口蹄疫是世界性重大动物疫病,被中国和世界动物卫生组织列为动物传染病之首,不仅可使畜牧业遭受灭顶之灾,还会严重影响国家的经济、贸易、公共卫生和食品安全。中国是该病危害最为严重的国家之一,鉴于当时对口蹄疫的病原学、流行病学和...
- 关键词:
- 关键词:口蹄疫病毒动物疫病诊断动物传染病
- 夹心阻断ELISA试剂在制备口蹄疫病毒抗体检测试剂盒中的应用
- 本发明涉及夹心阻断ELISA试剂在制备口蹄疫病毒抗体检测试剂盒中的应用,属于生物技术领域,本发明将阴阳性血清及被检血清直接在已包被捕获抗体的ELISA板上稀释后紧接着加入酶标抗体,最后加入病毒抗原,同时设置病毒抗原对照,...
- 周广青常惠芸刘伟龚真莉祁淑芸邵军军吕律郭慧琛高闪电何继军
- O型口蹄疫疫苗免疫牛抗体消长动态的LPB-ELISA检测被引量:25
- 2007年
- 分别按一次免疫、首免后第15 d加强免疫和首免后第60 d加强免疫程序,对3组试验牛(每组牛20头)用O型口蹄疫疫苗进行了免疫。免疫后不同时间点用液相阻断ELISA(LPB-ELISA)测定了免疫牛O型口蹄疫抗体效价。结果,首免后第15 d加强免疫牛和第60 d加强免疫牛抗体水平较高,50%保护牛所占比例分别为56.3%和63.1%,完全受保护的牛所占比例分别为34.3%和29.5%。第60 d加强免疫牛的保护率要高于第15 d加强免疫牛和一次免疫牛的保护率。结果表明,首免后第60 d加强免疫是最理想的免疫程序。
- 魏孔福祁淑芸林密冯霞张峰马军武
- 关键词:O型口蹄疫液相阻断ELISA抗体检测抗体消长
- 猪免疫口蹄疫灭活疫苗后外周血细胞亚群变化的研究被引量:2
- 2016年
- 为了解动物在注射口蹄疫灭活疫苗后机体免疫状态的变化情况,本试验选取口蹄疫阴性猪进行疫苗免疫,利用流式细胞术检测方法来测定外周血中免疫细胞亚群的变化。结果显示,树突状细胞在免疫后能够快速产生应答,在24h内其含量出现明显升高;B细胞和Th细胞含量在免疫后第10天都出现了明显升高,且两者之间的变化存在着高度相关性,而抗体水平的变化情况与这两种细胞含量的变化也高度相关;细胞毒性T细胞含量在免疫后也出现升高。这说明灭活疫苗免疫动物后不仅可以激活机体的体液免疫应答反应,产生高水平抗体,发挥免疫保护作用,更重要的是能够在短时间内激发机体的固有免疫应答,同时能够激活细胞免疫应答,全方位发挥免疫保护作用。
- 张柳冯霞靳野祁淑芸张晓霞马军武
- 关键词:口蹄疫病毒TH细胞CTL细胞
- 一种用于检测口蹄疫病毒抗体的抑制ELISA方法及应用
- 本发明涉及一种用于检测口蹄疫病毒抗体的抑制ELISA方法及应用,属于生物技术技术领域,本发明利用将阴阳性血清及被检血清直接在已包被捕获抗体的ELISA板上稀释后紧接着加入等量的稀释至工作浓度的病毒抗原,同时设置至少4孔病...
- 周广青马军武邵军军常惠芸龚真莉郭建宏祁淑芸李苗苗何继军
- 文献传递