王金韬
- 作品数：24 被引量：141H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 氯化锂预先给药对异氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍及海马炎性反应的影响被引量：10
- 2013年
- 目的评价氯化锂（LiCl）预先给药对异氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍及海马炎性反应的影响。方法老龄雄性sD大鼠80只，20月龄，体重350～400g，采用随机数字表法，将大鼠随机分为4组（n=20）：对照组（c组）吸入30％O2-70％N：6h；异氟醚麻醉组（I组）吸入1．4％异氟醚6h，以30％O2-70％N：作为载气；LiCl＋异氟醚麻醉组（L＋I组）腹腔注射LiCl100mg／kg，1次／d，连续3d，第4d行异氟醚麻醉；LiCl组（L组）腹腔注射LiCl100mg／kg，1次／d，连续3d，第4d吸入30％O2-70％N，6h。麻醉结束即刻行动脉血气分析，麻醉结束后24h取海马组织，采用Westernblot法测定海马糖原合成酶激酶．3p（GSK．3p）和核因子κB第310赖氨酸乙酰化蛋白[acetyl－NF—κB（Lys310）]的表达，采用实时定量PCR和ELISA法分别检测海马TNF-α、IL-IB和IL-6的mRNA表达及其含量；麻醉结束后第2d评估认知功能。结果与c组比较，I组GSK-3B和acetyl—NF—κB（Lys310）表达上调，TNF—α、IL-1B及IL-6含量及其mRNA表达水平升高，逃避潜伏期延长，探索时间缩短（P〈0．05），L＋I组和L组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）；与I组比较，L＋I组GSK-3β－acetyl－NF—κB（Lys310）表达下调，TNF—α、IL-1β、IL-6含量及其mRNA表达水平降低，逃避潜伏期缩短，探索时间延长（P〈0．05）。结论氯化锂预先给药可改善异氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍，其机制与抑制海马炎性反应有关。
- 李世勇陈欣陈晔凌谭蕾赵以林王金韬罗爱林
- 关键词：氯化锂异氟醚
- 褪黑激素对氯胺酮诱导胎鼠海马神经元凋亡的影响被引量：6
- 2012年
- 目的探讨褪黑激素对氯胺酮诱导胎鼠海马神经元凋亡的影响。方法原代培养孕16—18dSD大鼠胎鼠海马神经元5d，采用随机数字表法，将神经元随机分为5组（n=6）：对照组（C组）、氯胺酮组（K组）和不同浓度褪黑激素组（M。组，浓度分别为1．0、2．5和5．0mmol／L），K组加入氯胺酮（终浓度为1000μmol／L）孵育3h，M1-3组给予氯胺酮前60min时加入褪黑激素，使各组褪黑激素浓度分别为1．0、2．5、5．0mmol／L，C组加入等量生理盐水。采用MTY法检测发育期神经元活性，流式细胞仪检测线粒体膜电位（ψm），Westernblot法测定cAMP反应元件结合蛋白[p-CREB（Serl33）]、Bcl．2、Bax、细胞色素C表达。结果与C组相比，K组神经元活性降低，神经元线粒体膜电位（ψm）明显降低（P〈0．05），p-CREB（Serl33）和Bcl．2表达下调，Bax和细胞色素c表达上调（P〈O．05）；与K组相比，M2和M3组神经元ψm升高，M1-3组神经元活性增加，Bcl-2表达上调，Bax和细胞色素c表达下调（P〈0．05），p-CREB（Serl33）表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论褪黑激素通过调节Bcl-2和Bax表达，稳定ψm，抑制线粒体内细胞色素c释放，阻止凋亡复合体的形成，进而抑制氯胺酮诱导胎鼠海马神经元凋亡。
- 李世勇赵以林杨柳陈晔凌蔡放王金韬罗爱林
- 关键词：褪黑激素氯胺酮海马神经元
- 神经病理性疼痛大鼠脊髓背角一氧化氮合酶各亚型的表达及活性变化被引量：4
- 2008年
- 目的比较神经病理性疼痛大鼠模型脊髓背角中神经型（nNOS）、诱导型（iNOS）和内皮型（eNOS）三种一氧化氮合酶（NOS）的表达及活性变化。方法雌性SD大鼠20只，150～200g，随机均分为坐骨神经保留性损伤（SNI）组和对照组。SNI组大鼠于左后肢制备SNI模型，对照组大鼠暴露坐骨神经后立即缝合手术切口。术后观测疼痛的变化，于术后第14天断头处死大鼠，截取L4-6段脊髓，分离左右侧脊髓，于-80℃储存。SNI组和对照组各取5只大鼠脊髓，RT—PCR技术扩增nNOS、eNOS和iNOS片段，以β—actin作为内参照，比较SNI组与对照组NOS表达的相对差异。取两组另外5只大鼠脊髓冰上迅速匀浆，均取40μg的蛋白，分别检测组成型NOS（cNOS，即nNOS和eNOS）和iNOS的活性。结果SNI组手术侧nNOS、iNOS的mRNA表达均高于SNI组非手术侧和对照组手术侧（P＜0．05），而eNOS的表达在SNI组手术侧、非手术侧和对照组手术侧之间差异并无统计学意义。NOS亚型催化活性检测显示SNI组手术侧iNOs和cNOS的活性均高于SNI组非手术侧和对照组手术侧（P＜0．05）。结论神经病理性疼痛大鼠模型脊髓背角中iNOS的表达及其合成NO的活性均增加，可能促进了疼痛的发生，nNOS在疼痛中可能具有较强的调节能力。
- 金小高罗爱林王萍张广雄王金韬李亚文
- 关键词：神经病理性疼痛脊髓神经型一氧化氮合酶
- 钙网蛋白在不同疼痛模型大鼠脊髓中的表达
- 2007年
- 目的:观察钙网蛋白在三种疼痛模型大鼠的脊髓中表达的变化,探讨其与疼痛的可能关系.方法:分别制作甲醛炎性痛模型、保留性坐骨神经分支损伤(SNI)模型和慢性缩窄性坐骨神经损伤(CCI)模型,观察大鼠疼痛行为学改变,并分别用免疫组化和Western Blot技术检测大鼠脊髓c-Fos和钙网蛋白的表达.结果:与对照组相比,各模型组大鼠脊髓后角c-Fos阳性神经元增多(P<0.05);SNI模型组和CCI模型组大鼠脊髓钙网蛋白的表达均上调(P<0.05),甲醛炎性模型组大鼠脊髓钙网蛋白变化无统计学意义(P>0.05).结论:脊髓钙网蛋白的表达上调与SNI和CCI模型的慢性神经病理痛发生过程有关.
- 王金韬罗爱林金小高张广雄罗辉宇
- 关键词：疼痛脊髓钙网蛋白
- CREB磷酸化在氯胺酮诱导发育期大鼠海马神经元凋亡中的作用
- 目的:探讨CREB磷酸化在氯胺酮诱导发育期大鼠海马神经元凋亡中的作用。方法:将原代培养第5天大鼠海马神经元分为两组:对照组C组以及实验组K组(与含1000μmol/L氯胺酮培养基共培养3 h),以Annexin-V加PI...
- 谭蕾罗爱林王金韬罗辉宇施庆余
- 关键词：氯胺酮海马神经元CAMP反应元件结合蛋白脑源性神经生长因子
- 文献传递
- 环孢素A延长腺病毒基因治疗载体体内存在时间的研究被引量：1
- 2006年
- 目的研究重组腺病毒载体在免疫抑制疗法应用中的安全性并探讨环孢素A对该载体在体内清除的影响。方法采取腹膜后注射纯化重组腺病毒建立动物模型,连续给予环孢素A 14 d,取不同时间点大鼠样本,HE染色观察各主要脏器病理反应,免疫组化方法检测肝、脾、肺、肾、肌肉及淋巴结腺病毒的表达情况。结果①HE染色切片,各脏器呈现一过性可逆性轻微炎性反应。②免疫组化检测,对照组中重组腺病毒逐渐减弱至阴性,实验组中重组腺病毒存在时相性明显延长(P<0.05)。③腺病毒分布呈现肝脾肺高表达而其它组织表达相对较低。结论重组腺病毒作为基因治疗载体在免疫抑制疗法应用中具有一定的安全性,环孢素A能够部分抑制实验动物体内的免疫反应从而延长重组腺病毒在体内存在的时间。
- 夏曦王蓓蓓陈刚吴鹏罗丹枫李辅军郉辉王金韬卢运萍周剑锋马丁
- 关键词：环孢素A腺病毒基因治疗载体免疫抑制疗法
- 咪达唑仑对人离体精子能动性的影响
- 2012年
- 目的评价咪达唑仑对人离体精子能动性的影响。方法正常精液标本经percoll密度梯度法离心优选后沉淀以新鲜培养基重悬，密度调至（10—30）×106／ml，采用随机数字表法，将其随机分为3组（n=10）：对照组（c组）加入生理盐水正常培养；不同临床浓度咪达唑仑组（M1组和M：组）分别加入咪达唑仑使其终浓度为5、1ttg／ml；C组、M。组和M：组于加入咪达唑仑后10、30、60min时采用计算机辅助精液分析系统评价精子能动性，记录精子运动活力、曲线运动速度、直线运动速度、路径运动速度、头部侧摆幅度、鞭打频率、直线性、摆动性、前向性和移动角度。结果组内组间比较，精子能动性各参数差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论临床浓度咪达唑仑对人离体精子能动性无明显影响。
- 蔡放王金韬罗爱林杨柳李世勇刘征张勇
- 关键词：咪达唑仑精子能动性体外研究
- 氯胺酮对大鼠海马神经元CREB磷酸化水平的影响被引量：4
- 2008年
- 目的探讨氯胺酮对大鼠海马神经元cAMP反应元件结合蛋白（CREB）磷酸化水平的影响。方法原代培养1d龄SD大鼠海马神经元5d，随机分为对照组（C组）和氯胺酮组（K组），每组6孔。K组在终浓度为1000μmol／L氯胺酮的Neurobasel培养液中孵育3h，C组不做任何处理。采用流式细胞仪Annexin V—PI共染法检测凋亡神经元，计算神经元凋亡率；采用免疫组化法测定神经元ser-133位点磷酸化的CREB（pCREB）表达水平；采用RT-PCR法半定量测定CREB下游基因脑源性生长因子（BDNF）mRNA和抑凋亡基因Bcl-2mRNA的表达。结果与C组相比，K组神经元凋亡率升高，pCREB、BDNF mRNA及Bcl-2mRNA的表达均下调（P〈0．01）。结论氯胺酮可能通过抑制CREB磷酸化，下调BDNF及Bcl-2表达，诱导新生大鼠海马神经元凋亡。
- 谭蕾罗爱林王金韬罗辉宇施庆余
- 关键词：氯胺酮海马神经元CAMP反应元件结合蛋白
- PC12细胞转染nNOSα和nNOSβ对NF-kappa B转录活性和细胞凋亡的影响
- 2007年
- 目的:比较转染nNOSα和nNOSβ的PC12细胞NF-kappaB转录活性和细胞凋亡百分数,探讨nNOSα和nNOSβ在功能上的差异性.方法:将携带nNOSα和nNOSβ基因的pcDNA3.0表达质粒转化感受态细胞,在大肠杆菌中扩增后,提纯质粒酶切鉴定.nNOSα和nNOSβ基因的pcDNA3.0表达质粒通过脂质体转染PC12细胞,G418筛选,使用抗nNOS羧基端的抗体,通过免疫组织化学和WesternBlot方法检测nNOS的表达效率.提取经G418筛选PC12细胞核蛋白,采用凝胶电泳阻滞实验(EMSA)检测细胞核NF-kappa B转录活性.不同PC12细胞经PI染色后流式细胞仪分选,测定不同增殖周期的细胞数.结果:质粒酶切鉴定结果与携带nNOSα和nNOSβ基因的pcDNA3.0质粒结构相符;免疫组织化学和Western Blot方法检测转染nNOS基因后表达的nNOSα和nNOSβ均高于未转染的PC12细胞(P<0.05),PC12细胞转染nNOSα增加NF-kappa B转录活性(P<0.05),而nNOSβ降低NF-kappaB转录活性(P<0.05);转染nNOSα和nNOSβ及未转染的PC12细胞均不改变细胞凋亡百分数(P>0.05).结论:nNOSα增加PC12细胞NF-kappaB转录活性,nNOSβ降低C12细胞NF-kappa B转录活性,但均不改变细胞凋亡百分数,nNOSα和nNOSβ在功能上具有差异性.
- 金小高罗爱林王萍王金韬张广雄王贤裕李亚文
- 关键词：细胞凋亡
- 降植烷诱导不同品系大鼠建立类风湿性关节炎动物模型的比较被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨不同品系大鼠用于建立能够分泌类风湿因子(RF)的类风湿性关节炎动物模型。方法:选择雌性Wistar大鼠、雌性Lewis大鼠和雌性DA大鼠各10只,分成3组,分别在实验大鼠尾根部皮下多点注射降植烷150mg。观察大鼠关节是否肿胀和关节炎指数变化,测定RF水平,取脾细胞观察类风湿性关节炎特异性B细胞的数量。结果:10只Lewis大鼠有6只出现关节肿胀,脾细胞涂片显示血清RF检测呈阳性的Lewis大鼠RF特异性B细胞明显多于其他大鼠。而Wistar大鼠和DA大鼠组都没有出现关节肿胀,血清RF检测也呈阴性。结论:降植烷150mg在Lewis大鼠尾根部皮下多点注射方法,能够建立分泌RF的类风湿性关节炎动物模型。
- 罗辉宇罗爱林汪婷婷王金韬谭蕾
- 关键词：类风湿因子降植烷
